Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
Bu makalede, 3T tarayıcı kullanarak insan orta beyin ve subkortikal yapılarda 1.2 mm örnekleme ile yüksek çözünürlüklü fonksiyonel manyetik rezonans görüntüleme gerçekleştirmek için teknikler anlatılmaktadır. Insan üstün kollikulus (SC) görsel uyarım topografik haritalar çözmek için bu tekniklerin kullanılması örnek olarak verilmiştir.
Fonksiyonel MRI (fMRI) non-invaziv insan beyin aktivitesinin korele ölçmek için yaygın olarak kullanılan bir araçtır. Ancak, kullanımı en çok tercih örneğin orta beyin sapı ve olarak subkortikal bölgede daha serebral kortekse bir yüzey üzerinde aktivitesini ölçme üzerine odaklanmıştır. Uzamsal çözünürlük ve fizyolojik gürültü: subkortikal fMRI iki zorlukların üstesinden gerekir. Burada insan SC, ortabeyin dorsal yüzeyi üzerinde bir yapı içinde yüksek çözünürlüklü fMRI gerçekleştirmek için geliştirilen tekniği optimize edilmiş bir grubu tanımlar; yöntemleri, aynı zamanda resim, diğer beyin sapı ve subkortikal yapılar için kullanılabilir.
Yüksek çözünürlüklü (1.2 mm vokseller) SC fMRI bir konvansiyonel olmayan bir yaklaşım gerektirir. İstenen uzamsal örnekleme bir çoklu çekim (serpiştirmeli) spiral edinimi 1 kullanılarak elde edilir. Yana, T SC doku 2 * uzun korteks, bir buna uzun eko zamanı (T E ~ 40 msn) daha olduğunu maxi için kullanılırfonksiyonel kontrast hale getirir. SC tam ölçüde karşılamak için, 8-10 dilim elde edilir. Her bir oturum için fMRI aynı kesit reçete ile bir yapısal anatomisine aynı zamanda yüksek bir çözünürlüğe sahip referans hacme işlevsel bir veri hizalamak için kullanıldığı, elde edilir.
Ayrı bir oturumda, her konu için, biz (0.7 mm örnekleme) T 1 ağırlıklı iyi doku kontrastı verir dizisi kullanarak referans hacmi yüksek çözünürlüklü oluşturun. Referans volüm olarak, orta beyin bölgesi ITK-SNAP yazılım uygulamasını kullanarak 2 parçalı olduğunu. Bu segmentasyon 3 pürüzsüz ve doğru olarak orta beynin bir 3D yüzey gösterimi oluşturmak için kullanılır. Yüzey köşeleri ve normal doku 4 içinde Ortabeyin yüzeyinden derinliği bir harita oluşturmak için kullanılır.
Fonksiyonel verileri parçalı referans volüm koordinat sistemine dönüştürülmüştür. Voksellerden derinliği derneklersinyal kalitesini artırmak için belirli bir derinliğe sınırlarda fMRI zaman serisi verilerinin ortalaması sağlar. Veri görselleştirme için 3 boyutlu yüzey üzerinde işlenir.
Laboratuar biz SC 1 içinde görsel uyarı ve gizli ve açık görsel dikkat topografik haritalar ölçüm için bu tekniği kullanabilirsiniz. Bir örnek olarak, SC görsel uyarılmasına polar açısının topografik temsilini göstermektedir.
1. Polar açı Topoğrafya Stimulus ve Psikofizik
SC bir polar açı retinotopic haritası elde etmek için, biz uyarıcı olarak hareket eden noktalar 90 ° kama (eksantriklik görsel açı 2-9 °, nokta-hız 4 ortalama ° / sn) (Şekil 1) kullanın. Bu SC aktivite gizli dikkatini 5 uygulanarak geliştirilmiştir biliniyor, dolayısıyla biz mevcut sinyal artırmak için paradigmada bir dikkat görev kullanın. Her 2 s yargılanıyor, konular gizlice tüm kama katılmak ve fiksasyon korurken bir hız ayrımcılık görevi gerçekleştirmek için talimat vardır. Kama rastgele diğer tüm noktalar daha yavaş veya hızlı hareket eden, her mahkemeye seçilen sektörlerden biri noktalarla 2 × 3 sanal sektörlere ayrılmıştır. Her denemenin ardından, kama uyaran bir 24 sn süre ile tam döner böylece fiksasyon etrafında döndürülerek 30 ° dir. Her çalışma uyaranın 9.5 dönmeler (228 sn) oluşur ve deneysel oturumları içerir16-18 çalışır.
Her çalışma süresi boyunca bu görevde tabi performansını korumak için, görevin zorluk iki rasgele içiçe iki-yukarı-aşağı bir merdiven kullanılarak ayarlanır. Her iki ardışık doğru denemeler sonra hız farkı% 8 oranında azalır ve her yanlış deneme için, aradaki fark% 8 oranında artmıştır.
Tarama öncesinde bu performansı istikrarlı bir seviye elde edene kadar bütün konularda tarayıcı dışında görsel görev İnanç; bu 3-4 20 dakikalık süresi uygulama oturumları gerektirir. Tipik bir ayrım eşik 1 ° -1,5 ° / sn aralığı içindedir.
2. Konu Hazırlığı
3. SC yerelleştirme ve Reçete
4. Fonksiyonel MRI Parametreler
Tüm görüntüleme GE tarafından sağlanan 8-kanal, baş bobini kullanarak bir GE Signa HD12 3T MR tarayıcı yapıldı. Uyarma bir 6.4 ms pencereli-sinc darbe tarayıcı vücut sarmalı kullanılarak uygulanmıştır.
Insan SC 1.2 mm örnekleme elde etmek için, biz üç-shot spiral yörünge edinimi 6,7 kullanın. Üç çekim çeşitli nedenlerle ihtiyaç vardır. Bizim tarayıcı ve pratik olması çok uzun FOV gerektirir> 77 msn, özellikle, tek-shot edinimi. Birden çok çekim başlangıç değeri ve faz lineer trend çıkarılarak düzeltme sonrası birlikte birleştirilir. TE edilen ilk iki hacim bir alan haritası tahmin etmek için ilk çerçevesi üzerine 2 ms artırılır ve bu haritası lineer düzeltilmesi için kullanılır. Rekonstrüksiyon görüntüleri ~ 20 bir SNR vardı. SC Zamansal güç spektrumu genellikle voksellerfizyolojik gürültü ile ilişkili yapının biraz gösterdi; 3-shot edinimi kullanımı kardiyak nabız ve solunum nispeten yüksek frekanslı efektleri üzerinde güçlü bir filtreleme etkisi vardı. Diğer gürültü azaltma teknikleri bu yüksek çözünürlüklü bağlamında sorunludur. Örneğin, RETROICOR 6 gibi geriye dönük düzeltme yöntemleri çoklu çekim veriler için geçerli değildir ve kardiyak gating gürültü ve T 1 denge bozuklukları ile ilişkili artifakı tanıttı.
Yankı zamanı, T E = 40 msn, biz kortikal gri cevher (~ 45 msn) gözlenen daha SC dokuda buna uygun uzun T 2 * (~ 60 msn) ölçüldü çünkü genellikle korteks (30 milisaniye) kullanılan daha uzun.
Toplama bant genişliği bizim tarayıcı üzerinde istenmeyen ısınmasına neden olur pik gradiyent akımı azaltmak için 62.5 kHz ile sınırlıdır. Biz TR = 1 sn, yani üç çekim bir birimde her 3 elde edilir seçinsn.
5.. Yapısal MRG ve 3D Modelleme
Her konu için tek bir ayrı oturumda, (0.7 mm örnekleme) T 1-ağırlıklı sekans iyi doku kontrastı (3D SPGR, 15 ° flip angle, T I = 450 hazırlanan inversiyon verir kullanarak referans hacmi yüksek çözünürlük elde msn, 2 uyarılmaları, ~ 28 dakika süre, 0.7 mm vokseller).
Bu referans hacmi, biz segmenti orta beyin, beyin sapı ve ITK-SNAP uygulaması 2 tarafından sağlanan otomatik ve manuel teknikleri bir arada kullanarak talamus (Şekil 2A) bölümlerini doku. Özellikle, biz bir otomatik bölümleme aracı kullanmak gereken her beyin sapı içindeki kullanıcı tohumlar birden fazla nokta; yazılım otomatik kontrast ve yoğunluk kriterleri tanımlanmış bir bölge içinde kısıtlı tohum noktaları etrafında segmentasyon genişletir. Bu otomatik bölümleme sonra ayarlaed, gerektiği takdirde, manuel kullanılarak, "boya benzeri" voksel araçları.
SC beyin omurilik sıvısı doku arayüzü isodensity yüzeye mozaikleme kullanarak segmentasyon enterpolasyonlu, ve bu ilk yüzeyi varyasyonel deforme yüzey algoritması kullanılarak 3 aliasing eserler (Şekil 2, B ve D) azaltmak için rafine edilir. Bu yüzey köşeleri ve laminer hesaplamalar için bir referans (aşağıda açıklanmıştır) gibi fonksiyonel veriler görsel bir aracı olarak kullanılmak üzere dışarı doğru normal vektörleri sağlar.
6. Image Analysis
FMRI verileri analiz etmek, biz mrVista yazılım paketi (indirilebilir kullanabilirsiniz http://white.stanford.edu/mrvista.php) yanı sıra laboratuarımızda mrVista çerçeve üzerinde geliştirilen araçlar. Önümüzdeki birkaç adımda biz standart mrVista paketi araçları kullanabilirsiniz:
7. Halihazır Harita Analizi
Veri topografik gösterimi analiz için, Uyum analizi her voksel için Stimulus tekrarlama frekansında bir sinüzoidin (yani, yukarıda açıklanan 24 sn teşvik için 1/24 Hz) takarak derinliği ortalama zaman serisi yapılmaktadır. Bu uyum, biz sorumlu yüzey haritaları eldese genlik, tutarlılık, ve faz. Bu analiz, frekans uygulandı ve görsel korteks 9,10 olarak retinotopic haritalar ölçmek için yaygın bir tekniktir.
Sinüzoidal uyum aşaması uyaranın konumunu ölçer. Sıfır faz üst dikey dorukta (Şekil 3) karşılık gelir. Uyaran sonra bu yüzden bir π / 2 faz uyaran sağ görme alanında yatay meridyen döndürülmüş olduğunda karşılık, saat yönünde dönmektedir. Fazın π radyan sonra, uyaran sol görme alanı içine geçer, ve benzeri.
Ayrıca yüksek çözünürlüklü T1-ağırlıklı ses anatomi elle muayene ile SC tüm yüzeysel ölçüde sınırları aldı. Bu sınırlar Şekil işaretlenir. Kırmızı kesik çizgilerle 3.
fMRI doğrudan sinir aktivitesini ölçmek değil, sıkı bir kan akışı yanıt ama yapışkan birleştiğinde değilnöronal aktiviteye. Bu faz cevabı bir hemodinamik gecikme ekler. Gecikme, her SC bölge-of-ilgi bizim tutarlılık eşiğin üzerinde tüm vokseller alarak ve karmaşık düzlemde π etrafında kendi yollarla merkezleme tarafından tahmin edilmektedir. Bizim SC verilerde, bu gecikmeler 2-4 sn düzenin, oldukça küçük. Biz renk haritası 45 derece (3 sn karşılık gelen) (Şekil 3) saat yönünün tersine çevirerek bu gecikme kaldırmak.
8. Temsilcisi Sonuçlar
SC (Şekil 3) bir 3 boyutlu yüzey üzerine işlenmiş Faz verileri görsel uyarılara yanıt SC, yani sol görme alanı sağ SC temsil edilir ve vice-bir-versa içinde contralaterally temsil olduğunu gösterir.
Bir etkinlik retinotopic örgütü vardır. Sağ üst görme alanı sol kollikulus (mavi-kırmızı) üzerinde mediale temsil edilmektedir, ve alt alan (kırmızı-sarı) yanal temsil edilmektedir. SimilArly, sol üst görme alanı sağ kollikulus (mavi-mavi) üzerinde mediale temsil edilir ve daha düşük (yeşil-sarı) yanal temsil edilmektedir.
Tek ünite elektrofizyoloji kullanarak görsel uyarı için) 1 ve 2) mikrostimülasyonla bağlı sakkadik göz hareketleri 11,12 haritalama: Bu topografya SC yanıtların insan dışı primat çalışmaların sonuçları ile uyumludur.
Şekil 1. Orta sagital görüntü izlenebiliyor A) Dilim reçete. B) fonksiyonel görüntüler zamansal ortalama (1-run itibaren) A) kırmızı ile işaretlenmiş merkezi dilim elde.
Şekil 2. Polar açı topoğrafya uyarıcı. Gri bir arka plan üzerinde siyah-beyaz noktalar hareketli bir 90 ° kama fiksasyon etrafında yavaş yavaş döndürülür. Kama 6 virtû bir dizi ayrıldıal sektörler (gri çizgiler sektörler vurgulamak için eklendi) konusu, rasgele seçilen sektörde bir hız ayrımcılık görevi gerçekleştirmek için izin vermek.
Şekil 3. Segmentasyon ve yüzey modelleme. A) orta beyin, beyin sapı ve talamus bölümlerini yüksek çözünürlüklü MR anatomisi miktarlar parçalı idi. B) bir yüzey bölgesi segmented kenarında oluşturuldu. C) Sinüzoidal-fit aşama verileri bir düzlemlerinde oluşan dilim (tutarlılık> 0.25) görüntülenebilir. D) beyin sapı yüzeyi modeli ile döndürülür ve bir büyütülmüş görünüşüdür SC faz veriler görsel için kullanıldı.
Şekil 4. Polar açı haritalar. görsel polar açı kodlamak iki konuda fMRI faz haritalar. Her harita için Koherens eşikleri sağ alt sağlanmaktadır. Renk tekerleği p uyaranın kaplanan aşamaları ile ilgilidirkendi görme alanı konumlarına olar açısı.
Bizim toplama ve veri analiz teknikleri yüksek çözünürlüklü (1.2 mm vokseller) de subkortikal insan beyin yapılarında nöral aktivitenin ölçümü sağlar. 3-shot spiral satın Ortabeyin etrafında fMRI ölçümleri özellikle zararlı olduğunu fizyolojik gürültüyü azaltır. Buna ek olarak, doku bizim laminer bölütleme us SNR arttırmada yardımcı verilerin ortalaması derinliği gerçekleştirmek için olanak sağlar. Biz görsel uyarı ve insan SC 1 gizli görsel dikkat hassas polar açı ...
Çıkar çatışması ilan etti.
Bu malzeme Grant BCS 1063774 altında Ulusal Bilim Vakfı tarafından desteklenen çalışma dayanmaktadır.
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır