JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Biz ARDS inducing bir domuz modelinde sağ ventrikül disfonksiyonu oluşturma iletişim kuralı mevcut. İnvaziv sol ve sağ ventrikül kardiyak çıkış akışı kullanarak aort ve pulmoner arter, aynı zamanda kan basıncı ölçüm sonuçları aort ile pulmoner arter etrafında probları izlenmesi göstermektedir.

Özet

Özellikle nedeniyle pulmoner hipertansiyon ise morbidite ve mortalite kalp yetmezliği olan hastalarda önde gelen nedenlerinden biri sağ ventrikül (RV) disfonksiyon, olur. Bir daha iyi anlama ve bu hastalığın tedavisi için kesin hemodinamik sol ve sağ ventrikül parametrelerin izlenmesi önemlidir. Bu nedenle, kardiyak hemodinami ve araştırma amaçlı ölçülerini deneysel domuz modellerinin kurmak için önemlidir.

Bu makale ARDS indüksiyon oleik asit (OA) ve sonucu sağ ventrikül fonksiyon bozukluğu gibi domuz ve hemodinamik parametreler değerlendirmek için gerekli veri alma işlemi araçları kullanarak gösterir. Sağ ventrikül disfonksiyonu elde etmek için ARDS neden için oleik asit (OA) kullanılan ve bu pulmoner arter hipertansiyon (PAH) ile eşlik. Bu model, PAH ve ardışık sağ ventrikül disfonksiyonu ile birçok Hemodinamik parametreler ölçülebilir ve sağ ventrikül birim yük tespit edilebilir.

Solunum hızı (RR), kalp hızı (İK) ve vücut ısısı da dahil olmak üzere tüm hayati parametreleri tüm deney boyunca kaydedildi. Hemodinamik parametreler femoral arter basıncı (FAP), aort basınç (AP), sağ ventrikül basınç (peak sistolik, son sistolik ve end diastolik sağ ventrikül basınç), Merkezi venöz basınç (CVP) de dahil olmak üzere, pulmoner arter basıncı (PAP) ve Sol Atardamar basıncı (LAP) aort akışı (AAF) ve pulmoner arter akışı (PAF) artan dahil olmak üzere perfüzyon parametreleri yanı sıra ölçülen. Hemodinamik ölçümleri kardiyak çıkış (CO) sağlamak için transcardiopulmonary thermodilution kullanılarak yapıldı. Ayrıca, PiCCO2 sistem (Pulse Contour kardiyak çıkış sistem 2) extravascular akciğer su (EVLW) ve global end-diastolik hacim (GEDV) yanı sıra inme birim varyans (SVV) gibi parametreleri almak, basınç farkı (PPV), darbe için kullanıldı. Bizim izleme yordamı sağ ventrikül fonksiyon bozukluğu tespit ve hemodinamik bulgular izleme önce ve sonra birim yönetim için uygundur.

Giriş

Özellikle altta yatan neden pulmoner hipertansiyon2ise sağ ventrikül (RV) disfonksiyon bir önemli morbidite ve mortalite hastalarda kalp yetmezliği1, nedenidir. Karavan ile yüksek uyum normalde ilişkili düşük direnç pulmoner sistem içine kan pompalar. Bu nedenle, RV düşük pik sistolik basıncı ile karakterizedir. Ayrıca sol ventrikül (LV)3ile karşılaştırıldığında bir altıncı kontur işi oluşturur. Onun ince kas nedeniyle RV bir değişiklik öncesi ve afterload4,5çok açık olacaktır. Kasılma ve gevşeme Sistol ve karavan diastole sırasında izovolümik aşamalarını LV olduğu gibi farklı değildir RV başarısızlık kısa vadeli ölüm oranı önemli ölçüde artırdığı için sol ve sağ ventrikül hemodinamik parametrelerin incelenmesi ile akut sağ kalbe sıkıntı4,7, kritik hasta hasta tedavide önem arz etmektedir 6.

Önyükleme parametrelerini Merkezi venöz basınç (CVP) gibi ve sol ventrikül önyükleme parametrelerini pulmoner kapiller wedge basıncı (PCWP) gibi uzun bir süre hasta birim durumunu belirlemek için kullanılmıştır. Son zamanlarda, bu parametreleri yalnız bir hastanın sıvı8,9,10algılamak uygun değildir gösterilmiştir. RV disfonksiyonu olan hastalarda tedavi birim yoksunluğu ile cilt tekrar ve tanıma sıvı yanıt verme hızını algılamak için önemlidir. Kaçınmak birim aşırı mortalite ve yoğun bakım ünitesi (ICU) kalış bu hastalarda uzunluğu azaltmak için esastır.

Bu çalışma ile tutarlı ve yinelenebilir sağ ventrikül disfonksiyonu domuz modeli kurduk. İnsanlar onun benzerliği nedeniyle, tutarlı ve tekrarlanabilir büyük hayvan modeller kardiyak hemodinami ve ölçümlerin araştırma amaç için kurmak gereklidir.

Protokol

Bu potansiyel deneysel duruşmada domuzlarla 21 imzalat erkek ve kadın iç (Alman landrace) 3-6 ay arasında 45-55 kg vücut ağırlığı ile yaş bakım ve kullanım, Hamburg City (hayvanların toplum Komisyonu tarafından kabul edildi Reference-No. 18/17). VARIŞ esaslarına göre tüm deneyler yapılmıştır ve tüm hayvan bakımı 'Kılavuzu bakım ve kullanım Laboratuvar hayvanları' (NIH Yayın No. 86-23, gözden geçirilmiş 1996)11uygun olarak aldı.

1. akış sonda iki nokta kalibrasyon

  1. Akış sondaları deiyonize suyla geçirin ve sonda fişi perivasküler akışı modülü koyarak transonik akış sonda sisteme bağlayın.
  2. Veri analiz yazılımı açın (Örn., LabChart 8).
  3. Bir iki nokta kalibrasyon için bir ölçüm sıfır ve ölçeğiiçin bir kaç saniye sonra akış sonda sistemi belirleyerek başlayın.
  4. Veri Analizi Yazılım penceresinde, Birim Dönüşüm için gidin ve iki nokta Kalibrasyon seçin. Sıfır olarak ayarlamak için bir temel işaretleyin. Daha sonra 10 L/dk ile bir alanı işaretlemek ve 1 V bir hazır ayar değeri olarak küme.
  5. Diğer sonda için yordamı yineleyin.

2. millar kateter kalibrasyon

  1. Sıfırlama ve kalibrasyon önce steril vücut sıcaklığı sıcak suda 30 dakika kateter ucu önceden ıslatın.
  2. Millar kateter köprü amplifikatör fiş köprü amplifikatör modül koyarak bağlayın.
  3. Veri analiz yazılımını başlatın.
  4. Kateter ucu Pnömatik sıfırlama aracın koymak, koymak belgili tanımlık değer için 0 mmHg ve bir ölçüm programda Start tıklayarak başlatın.
  5. Çalışan ve pnömatik sıfırlama aracı için 100 mmHg ayarla ölçüm tutun. Ölçüm durdurmaktıklayarak durdurabilirsiniz.
  6. Start tuşuna basarak veri analiz yazılımı çalıştırmak ve Stoptuşuna basın. Genişletme Bridge penceresinde tıklatın ve birimleriseçin. 0 ile 100 mmHg, satır taban çizgisi buna göre ayarlayın. Yazılım kalibrasyon için önceden ayarlanmış değere göre kateter şimdi için tüm vücut baskısı kalibre edilmiş.
  7. Diğer Millar kateter için yordamı yineleyin.

3. domuz hazırlanması

  1. Domuz 20 mg/kg Ketanest, 4 mg/kg Azaperon ve 0.1 mg/kg Midazolam intramüsküler enjekte edilerek ilaçlama ve bir 20 G-damar damar kulak içine yerleştirin.
  2. Kuyruk üzerinde göğüs ve oksijen sonda yer EKG çıkartmaları.
  3. Saf oksijen (15-18 L/dak) bir maske kullanarak domuz burun yolu ile yönetmek ve cerrahi olarak aşağı trakea hazırlamak.
  4. Trakea çevresine bir daire koymak, nefes borusu içine bir kesi yapmak ve bir 8,5 Mallinckrodt tüp içine güvenli bir hava yolu için yer bir neşter (11 bıçak) kullanın. Tüp ile önceden ayarlanmış döngü düzeltmek ve deri dikiş ile kapatın.
  5. Anestezi 0,9 (domuzlarda ergen %2.0 için bir endexpiratory konsantrasyonu eşdeğer) bir MAC ve 0,01 mg/(kg∙h) fentanil infüzyonu kullanarak Sevoflurane ile başlar. Mekanik havalandırma 10 mL/kg, a oran-in 14/dk, bir gelgit hacmi ile başlayıp bir pozitif ekspiratuar basınç (PEEP) 7 mmHg. İnspiratory oksijen oranı (fiO2) 0,3 için ayarla. 10 dakika sonra anestezi derinliği güvenli bir şekilde ameliyat yeterince derin. Hiçbir insan kaynakları ve kan basıncı yükselmesine tespit edilmelidir.
  6. Sıvı dengeyi bazal ses hızında bir infüzyon pompası ile 10 mL/(kg∙h) cristalloid.
  7. Yavaşça sabun su kullanarak domuzun cilt temizlemek. Povidone-iyot içeren bir cilt dezenfeksiyon çözüm cilt kirliliği azaltmak için kullanın.

4. hayati parametre ölçümleri

  1. 5 F termistör ekleme içine sağ femoral arter arter kateter, bir 8 F uygulayıcıya kılıf sol femoral arter, Merkezi venöz kateter ve juguler ven (Şekil 1) içine bir 8 F uygulayıcıya kılıf içine uçlu için bir ultrason kullanın.
  2. Seldinger'ın teknik12kullanarak kateter yerleştirme yerleştirin.
    1. Bir iğne hedef gemisi ultrason görüş altında yerleştirin.
    2. Bir tel ile iğne damar koymak, ultrason kullanarak Tel doğru yerleşimini doğrulayın ve tel geminin tüm prosedürü boyunca tutun. İğneyi çıkarın ve bir dilatör tel üzerine yerleştirin.
    3. Hafif basınç ile dilatör üzerinden cilt tel olarak rehberlik kullanarak damar içine koymak. Dilatör kaldırmak, kateter tel koymak, Tel sonuna kadar emin olun yeri kateter ve kateter sonunda geminin gördüm.
    4. Kabloyu yavaşça kateter dışarı çekerek çıkarın.
  3. 7F pulmoner arter kateteri (PAC) 8F uygulayıcıya kılıf yerleştirin ve karavana yerleştirin Pulmoner arter eğri üstünde-e doğru sınıf başkanı ve örnekleri aldıktan sonra geri çekme gösterildiği kadar karışık venöz kan gaz örnekleri almak için gerekirse, PAC daha fazla PA sokun.
  4. 8F uygulayıcıya kılıf sol femoral arter ve aort yerleştirerek ilk Millar uçlu kateter takın.
  5. Bir mini laparotomi gerçekleştirmek (yaklaşık 5-10 cm yeter) aşağı linea prepping için elektrokoter kullanarak symphysis yukarıda alba.
    1. Açın linea alba makas ile kesme ve mesane çok yavaşça çekin.
    2. 3/0 dikiş kullanarak mesane çanta dize dikiş koymak ve bir neşter (11 bıçak) ile mesane içine bir kesik.
    3. Üriner kateter mesane yerleştirin, su ile kateter'ın balon şişirmek ve çanta-dize dikiş kullanarak bunu düzeltin. Karın 3/0 dikiş ile kapatın.

5. cerrahi kalp hazırlanması

  1. Göğsü açmadan önce 1.0 fiO2 artan ve 0.1 mg kg(-1) panküronyum ilk bolus intravenöz yönetmek13.
  2. Ortalama bir yöntemdir gerçekleştirin.
    1. Elektrokoter göğüs kemiği aşağı prepping için kullanın. Yavaşça göğüs kemiği çevreleyen doku gelen kemik salınan bir testereyle bölen önce incelemek.
    2. Elektrokoter kanamayı azaltmak ve göğüs kemiği kemik balmumu ile mühür için kullanın. Açılan göğüs kemiğinin iki yarısı arasında bir göğüs kaburga ayıracı yerleştirebilir ve yaygın olarak göğüs üstünde belgili tanımlık aygıt tanıtıcı büküm tarafından ameliyat için gerekli olduğu kadar açabilirsiniz.
  3. Yavaşça makas ve forseps kullanarak kalp zarını açın ve 2/0 dikiş ile cilde düzeltebilirim.
  4. Pulmoner ve aort çok yavaşça kanama önlemek için artan arter incelemek. Dikkatle ultrason akış sondaları her iki arterler etrafında sırasıyla yer (Şekil 2).
  5. Place 2 çanta dize dikişler 5/0 dikiş kullanarak pulmoner arter. Bir neşter (11 bıçak) küçük bir kesi (yaklaşık 1 mm) çanta dizeleri ortasında dikiş ve Millar kateter (Şekil 3) düzeltmeden önce pulmoner arter yer yapmak için kullanın.
  6. Dikkatle LAA klamp ve 2 çanta dize dikiş 4/0 dikiş kullanarak yerleştirin. Küçük bir kesi yapmak ve ana venöz damar sol atriyum çanta dize dikiş (Şekil 3) kullanarak düzeltmeden önce yer.
  7. Kalp zarını steril eldiven hemodinami güvenilir (Şekil 4) korumak için üzerine dikiş tarafından kapatın. Teller ile göğüs kapatma gerçekleştirmek ve Cilt 3/0 dikiş ile kapatın.

6. değerlendirme ve veri toplama

  1. Her ölçüm AO 2 dk ile ve PA akışı ölçümleri gibi program başlatma ve durdurma düğmesini tıklatarak veri analiz yazılımı kullanarak AO ve PA basınç ölçümleri başlatın.
  2. Kardiyak çıkış (CO) sağlamak için transcardiopulmonary thermodilution darbe basınç farkı (PPV) ve kontur birim varyans (SVV) yanı sıra PiCCO2 sistemi kullanarak gerçekleştirin. TD ölçüm başlatmak için tıklatın | Başlangıç.
  3. Arda 10 ° C soğuk serum 15 mL thermodilution her ölçüm adımda için üç kez juguler ven Merkezi venöz satırında bir termistör içine enjekte.
  4. Bir arteryel, Merkezi venöz ve karışık venöz kan gaz örneği her sonra transcardiopulmonary thermodilution ölçüm adım.

7. ses seviyesi en iyi duruma getirme

  1. (6.1-6.4 adımlar) bir temel ölçüm tüm parametreleri sonra M0, adım 5 mL/kg infüzyonu Merkezi venöz hattına bağlı bir infüzyon pompası ile kolloidal (Voluven) kullanarak yükleme bir birimi yönetme.
  2. Denge, 5 dk sonra başka bir ölçüm adım M1 (6.1-6.4 adımlar) başlatın. Yeni oluşturulan kardiyak çıkış için önceden ölçülen CO en az % 10 oranında göre sistem (bkz. Adım 6.2-6.3) artış PICCO2 kullanarak thermodilution tarafından ölçülen başka bir birime yükleme adım (adım 7.1) başlatın.
  3. Daha fazla CO fazla % 10 artış kadar birim yükleme ve denge adımlara devam edin. Şimdi, dengeli bir sıvı durum ulaşılır.

8. indüksiyon sağ ventrikül disfonksiyonu olan ARDS

  1. İçin en az % 90 spO2 korumak için gerektiği şekilde en az 0,5-0,8 fiO2 artmak.
  2. Ardışık sağ ventrikül disfonksiyonu olan bir ARDS oleik asit (OA) infüzyonu tarafından teşvik (0.03-0,06 mL/kg yaklaşık 2 h için).
  3. Adrenalin hemodinami sabit tutmak için bir perfusor (3 mg adrenalin 50 ml serum fizyolojik) kullanarak sürekli administration'ı kullanın. İnfüzyon hızı 50 mmHg ortalama arteriyel basınç korumak için gerektiği şekilde artırın.
  4. Kalsiyum, magnezyum ve antiarrhythmics ekleyin (%1 Lidocain) istikrarlı sinüs ritmi korumak için OA infüzyonu sırasında gerektiği gibi.

9. ses seviyesi en iyi duruma getirme

  1. Sonra indüksiyon ARDS orta hafif, tüm parametreleri (M2) başka bir ölçüm 6.1-6.4 adımları gerçekleştirin.
    Not: Şimdi, ARDS hemodinamik ölçümlerde bir domuz modeli için temel model ayarlanır. Birim yanıt ARDS ve sağ ventrikül disfonksiyonu başlangıç Protokolü başı gerekir olarak kadar kan alarak veya birim artan hacim yükü azaltmak için üzerinde daha fazla araştırma için infüzyon tanımlanmış bir miktarda ekleyerek yükleyin.

10. sonlandırma

  1. Ölçümler bittikten sonra ise anestezi altında domuz 1mmol/kg potasyum klorür intravenöz enjekte edilerek ötenazi.

Sonuçlar

Bizim hayvan modeli domuzlarda Hemodinamik parametreler geniş bir çeşitlilik gösterir. Boyutu ve hemodinami onun benzerlik nedeniyle, bir kolayca tam aynı ekipman olarak insanlarda kullanılan benzer sonuçlar elde etmek için kullanabilirsiniz. Ancak, anestezi değerleri deneyime dayalı ve bağlı olarak ağırlık değişebilir / yaş / zorlanma domuz.  A hayvan hastalıklarıyla ilgili anestezik planın değerlendirmek için müşavire danışılmalıdır.

Tartışmalar

ARDS pulmoner hipertansiyon tarafından karmaşık, çok ölümcül bir hastalıktır. Bu durum acı hastalar için daha fazla tedavi hakkında bilgi gereklidir. Ne zaman çalışma ve canlılar ile araştırma, mümkün olduğu kadar mantıklı olmak çok önemlidir. Bu durumda bir denemede mümkün olduğunca fazla bilgi toplamak gereklidir.

Böyle bir açık atan kalp modelindeki bazı kritik cerrahi adımlar vardır. Domuzlar gereksiz yere kullanmamayı, olmalı hemodinami RV ve Ra üzerin...

Açıklamalar

Daniel A. Reuter Pulsion Tıbbi Danışma Kurulu üyesidir. Constantin J.C. Trepte Maquet tarafından dersler için onur ödülü aldı. Diğer yazarlar hiçbir çıkar çatışmaları bildirin.

Teşekkürler

Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Animal Bio AmpADInstrumentsFE136
Quad BridgeAmpADInstrumentsFE224
Power Lab 16/35ADInstruments5761-E
LabChart 8.1.8 WindowsADInstruments
Pulmonary artery catheter 7 FEdwards Lifesciences Corporation  131F7 
Prelude Sheath Introducer 8 FMerit Medical Systems, Inc.SI-8F-11-035
COnfidence Cardiac Output FlowprobesTransonicAU-IFU-PAUProbes-EN Rev. A 4/13
AdrenalinSanofi6053210
Oleic acidSigma Aldrich112-80-1
Magnesium VerlaVerla7244946
KetaminRichter Pharma AGBE-V433246
AzaperonSanochemia Pharmazeutika AGQN05AD90
MidazolamRoche Pharma AG3085793

Referanslar

  1. Kapur, N. K., et al. Mechanical Circulatory Support Devices for Acute Right Ventricular Failure. Circulation. 136, 314-326 (2017).
  2. Zochios, V., Jones, N. Acute right heart syndrome in the critically ill patient. Heart Lung Vessel. 6 (3), 157-170 (2014).
  3. Ranucci, M., et al. Fluid responsiveness and right ventricular function in cardiac surgical patients. A multicenter study. HSR Proceedings in Intensive Care and Cardiovascular Anesthesia. 1 (1), 21-29 (2009).
  4. Mehta, S. R., et al. Impact of right ventricular involvement on mortality and morbidity in patients with inferior myocardial infarction. Journal of the American College of Cardiology. 37, 37-43 (2001).
  5. Vieillard-Baron, A., Charron, C. Preload responsiveness or right ventricular dysfunction. Critical Care Medicine. 37 (9), 2662-2663 (2009).
  6. Marik, P. E., Baram, M., Vahid, B. Does central venous pressure predict fluid responsiveness? A systematic review of the literature and the tale of seven mares. Chest. 134 (1), 172-178 (2008).
  7. Marik, P. E., Cavallazzi, R. Does the central venous pressure predict fluid responsiveness? An updated meta-analysis and a plea for some common sense. Critical CareMedicine. 41 (7), 1774-1781 (2013).
  8. Eskesen, T. G., Wetterslev, M., Perner, A. Systematic review including re-analyses of 1148 individual data sets of central venous pressure as a predictor of fluid responsiveness. Intensive Care Medicine. 42 (3), 324-332 (2016).
  9. Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. Improving bioscience research reporting: the ARRIVE guidelines for reporting animal research. Osteoarthritis and cartilage, Osteoarthritis Research Society. 20 (2), 56-60 (2012).
  10. Akella, A., Sharma, P., Pandey, R., Deshpande, S. B. Characterization of oleic acid-induced acute respiratory distress syndrome model in rat. Indian Journal of Experimental Biology. 52 (7), 712-719 (2014).
  11. Meinhardt, J. P., Friess, U., Bender, H. J., Hirschl, R. B., Quintel, M. Relationship among cardiac index, inspiration/expiration ratio, and perfluorocarbon dose during partial liquid ventilation in an oleic acid model of acute lung injury in sheep. Journal of Pediatric Surgery. 40 (9), 1395-1403 (2005).
  12. Zhu, Y. B., et al. Atrial natriuretic peptide attenuates inflammatory responses on oleic acid-induced acute lung injury model in rats. Chinese Medical Journal (English. 126 (4), 747-750 (2013).
  13. Gould, D. A., Baun, M. M. The Role of the Pulmonary Afferent Receptors in Producing Hemodynamic Changes during Hyperinflation and Endotracheal Suctioning in an Oleic Acid-Injured Animal Model of Acute Respiratory Failure. Biology Research for Nursing. 1 (3), 179-189 (2000).
  14. Galie, N., et al. 2015 ESC/ERS Guidelines for the diagnosis and treatment of pulmonary hypertension. European Heart Journal. 37, 67-119 (2015).
  15. Galie, N., et al. 2015 ESC/ERS Guidelines for the diagnosis and treatment of pulmonary hypertension: The Joint Task Force for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Hypertension of the European Society of Cardiology (ESC) and the European Respiratory Society (ERS), Endorsed by: Association for European Paediatric and Congenital Cardiology (AEPC), International Society for Heart and Lung Transplantation (ISHLT). European Respiratory Journal. 46, 903-975 (2015).
  16. Oliveira, R. K., et al. Usefulness of pulmonary capillary wedge pressure as a correlate of left ventricular filling pressures in pulmonary arterial hypertension. Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (4), 459 (2014).
  17. Hoeper, M. M., et al. A global view of pulmonary hypertension. Lancet Respiratory Medicine. 4, 306-322 (2016).
  18. Nagy, A. I., et al. The pulmonary capillary wedge pressure accurately reflects both normal and elevated left atrial pressure. American Heart Journal. 167 (6), 876-883 (2014).
  19. Daughters, G. T., et al. Effects of the pericardium on left ventricular diastolic filling and systolic performance early after cardiac operations. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 104 (4), 1084-1091 (1992).
  20. Zimmerman, R., et al. Posttransfusion Increase of Hematocrit per se Does Not Improve Circulatory Oxygen Delivery due to Increased Blood Viscosity. Anesthesia & Analgesia. 124 (5), 1547-1554 (2017).
  21. Giglioli, C., et al. Hemodynamic effects in patients with atrial fibrillation submitted to electrical cardioversion. International Journal of Cardiology. 168 (4), 4447-4450 (2013).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T psay 141Hemodynamicsa ventrik l disfonksiyonuARDSkontrol sa ventrik l parametreleripulmoner arter hipertansiyonMillar kateterlersonda ak

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır