Etiketli TSA ve SAB çökeltme plakalarını çalışma alanının yakınına, ancak teste müdahale etmeyecek bir alana yerleştirin. Örnekleme başlangıç zamanını belgeleyin. Aseptik olarak, her iki plakayı da açın, agarın kurumasını önlemek için kapakları biyolojik güvenlik kabinindeki temiz bir yüzeye dört saate kadar çalışma alanından uzağa yerleştirin.
İşlemin sonunda plakaların kapaklarını kapatın ve numune alma durma süresini belgeleyin. Gevşek bir şekilde, plakaları torbalayın ve kültürleri inkübe edin. Eldivenli parmak ucu örneklemesi için, iki etiketli TSALT plakası edinin.
Plakaların kapağını aseptik olarak çıkarın ve numune alma alanından uzakta temiz bir çalışma yüzeyine yerleştirin. Her parmağın ve başparmağın pedini plakanın yüzeyine yavaşça yuvarlayın. Agar yüzeyini çatlatmadan agar üzerinde hafif çöküntüler yapmak için yeterli kuvvet kullanın.
Aseptik olarak kapağı tekrar plakanın üzerine yerleştirin. Numune alma işleminin tamamlanmasında elleri sterilize ettikten sonra, plakaları gevşek bir şekilde torbalayın ve kültürleri inkübe edin. Doğrudan aşılama için, Amerika Birleşik Devletleri Farmakopesi yöntemini izleyerek, TSA ve SAB çökeltme plakalarını biyogüvenlik kabinine yerleştirin.
Kabini hazırladıktan ve malzemeleri hazırladıktan sonra, numune alma başlangıç zamanını belgeleyin. Test makalesini ve ilgili triptik soya suyu ve sıvı tiyoglikolat orta şişelerini edinin. Şişelerde septum varsa, koruyucu kapakları her şişeden çıkarın ve septumu steril bir alkollü mendille silin.
Homojen bir süspansiyon sağlamak için test maddesini vorteks edin ve şişeleri steril bir şırınga ve hipodermik bir iğne kullanarak test makalesinin doğrulanmış bir hacmiyle aşılayın. Septumu steril bir alkollü mendille silin ve inkübasyon sırasında hava değişimine izin vermek için steril bir havalandırma ünitesi takın. Bu oturumun her test makalesi için adımları yineleyin.
TSA ve SAB çökeltme plakalarını aseptik olarak kapatın ve eldivenli parmak ucu örneklemesini gerçekleştirmeden önce numune alma bitiş zamanını belgeleyin. Eldivenleri% 70 steril izopropil alkolle silin, plakaları gevşek bir şekilde torbalayın ve kültürleri inkübe edin. Tüm test malzemelerini biyolojik güvenlik kabininden dışarı aktarın.
Benzer şekilde, doğrudan aşılama için, NIH alternatif sterilite test yöntemini izleyerek, TSA ve SAB çökeltme plakalarını biyogüvenlik kabinine yerleştirin ve numune alma başlangıç zamanını belgeleyin. Test makalesini ve ilgili IFA Plus etiketli, IFN Plus etiketli ve SAB plakasını edinin. IFA Plus ve IFN Plus şişelerindeki koruyucu kapakları çıkarın ve septumu steril alkollü mendille silin.
Test makalesini vorteksledikten sonra, şişeleri steril bir şırınga ve hipodermik bir iğne kullanarak test makalesinin doğrulanmış hacmiyle aşılayın ve septumu tekrar silin. Şişeleri BACT/ALERT Dual T cihazında inkübe edin. Bir pipetleyici kullanarak, SAB plakasını doğrulanmış miktarda test maddesi ile aşılayın ve steril bir döngü kullanarak izolasyon için çizgi çizin.
Numunenin inkübasyon için ters çevrildiğinde plaka kapağına akmamasını sağlamak için 10 dakika bekletin: Bir test makalesi ile aşılanmış her SAB plakasını plastik bir torbaya yerleştirin. Onları gevşek bir şekilde bağlayın. TSA ve SAB çökeltme plakalarını aseptik olarak kapatın.
Plakalardaki örnekleme bitiş zamanını belgeleyin ve eldivenli parmak ucu örneklemesini gerçekleştirin. Numune aldıktan sonra eldivenleri %70 alkolle silin. Eldivenleri alkolle sildikten sonra plakaları gevşek bir şekilde torbalayın ve kültürleri inkübe edin.
Biyolojik güvenlik kabininde pasif hava prosesi izlemesi sırasında kültürlenen bir kirleticinin tek bir kolonisini gösteren bir TSA hava çökeltme plakası burada gösterilmiştir. İki ayrı koloni morfolojisinin üç koloni oluşturan birimlerine sahip TSALT yüzey örnekleme plakası bu şekilde gösterilmiştir. Plakanın kenarında tek bir koloni bulunan TSALT yüzey kültürü, örnekleme işlemi sırasında zayıf aseptik kullanımı gösterir.
Her parmağın veya başparmağın en geniş yüzey alanını kullanarak eldivenli parmak ucu örnekleri elde etmek için doğru yöntem bu resimde gösterilmiştir. Sadece parmak ucunun örneklendiği yanlış işlem burada gösterilmektedir. Çıplak gözle görülebilen ve BACT/ALERT sistemi tarafından otomatik olarak algılanamayan kalıp toplarının bir örneği burada gösterilmektedir.
Bu bulgulara dayanarak, tüm BCT / ALERT şişelerinin terminal görsel muayenesi ve NIH alternatif sterilite test yöntemi kullanılarak mantar kültürü için SAB plakasının eklenmesi önerilir.
