Hücre transfeksiyonuna başlamak için, kuyucuk başına 700 HeLa hücresini tohumlamak için seyreltilmiş siRNA içeren 384 delikli plaka kuyucuklarına 20 mikrolitre HeLa hücre süspansiyonu ekleyin. Oda sıcaklığında bir saatlik inkübasyondan sonra, kuyu plakasını 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksitte 72 saat boyunca bir inkübatöre yerleştirin. BrdU'yu transfekte hücrelere dahil etmek için, 56 saatlik siRNA transfeksiyonundan sonra her bir oyuğa 10 mikrolitre 90 mikromolar BrdU çözeltisi ekleyin.
Hücreleri 16 saat boyunca 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksitte inkübe edin. BrdU'nun HeLa hücrelerinin mitokondriyal DNA'sına dahil edilmesinin özgüllüğü, mitokondriyal DNA'dan yoksun rho0 hücreleri kullanılarak incelenmiştir.
