Mitokondri etiketlemesine başlamak için, DMEM'de% 10 fetal sığır serumu veya FBS ile 20 mikromolar BrdU çözeltisi hazırlayın. Ardından, son konsantrasyonu 1.1 mikromolara ayarlamak için mitokondri izleme boyasını ekleyin. 15 saat sonra, kuyucuklar içeren HeLa hücre süspansiyonuna 10 mikrolitre mitokondri izleme boya çözeltisi ekleyin.
Hücreleri bir saat boyunca inkübe edin. Yeni sentezlenen DNA moleküllerini BrdU ile etiketlemek için kullanılan koşullar, HeLa hücrelerinin mitokondrilerinde BrdU etiketli DNA'nın tespit edilmesine izin verdi. Anti-BrdU antikorları ile elde edilen sinyal spesifikti ve sadece BrdU ile tedavi edilen hücrelerde gözlendi.
BrdU tedavisinden bağımsız olarak, sıfır sıra hücrelerin mitokondrilerinde hiçbir anti-BrdU veya anti-DNA antikor sinyali tespit edilmedi. Anti-BrdU antikorlarından gelen floresan sinyalinin ölçülmesi, BrdU ile tedavi edilen sıfır sıra hücrelerinin, BrdU ile tedavi edilmemiş hücrelerle aynı düşük floresan seviyesini gösterdiğini, ebeveyn hatları A549 ve HeLa için sinyalin 50 kat daha yüksek olduğunu göstermiştir.
