Daha önce elde edilen A2780 hücre peletine 500 mikrolitre lizis tamponu ekleyerek başlayın ve minimum iki milimetre açılma çapına sahip bir kesme ucu kullanarak hafifçe karıştırın. Taze hazırlanmış RNaz'ın mililitresi başına 20 mikrogram ekleyin ve hafifçe ters çevirerek karıştırın. 30 dakika boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin.
İnkübasyonun sonunda, proteinaz K'yı mililitre başına 100 mikrogramlık son bir konsantrasyona ekleyin ve yavaşça 10 kez ters çevirin. Tüpü her 10 dakikada bir ters çevirerek bir saat boyunca 55 santigrat derecede tekrar inkübe edin. Pipet 500 mikrolitre fenol:kloroform:izoamil alkol reaktifini tüpe yerleştirin ve tüpü yaklaşık 20 kez yavaşça ters çevirin.
Oda sıcaklığında 15 dakika boyunca 9.391 G'de santrifüj yapın. Üst sulu viskoz tabakayı yeni bir tüpe pipetleyin. Eşit miktarda kloroform ekleyin ve hafifçe ters çevirerek karıştırın.
Tüpü bir kez santrifüj ettikten sonra, sulu tabakayı toplayın. Konsantrasyonu 0.2 mol artırmak için tüpe uygun miktarda beş molar sodyum klorür ekleyin. Tüpe iki hacim% 100 etanol ekleyin ve yavaşça 20 kez ters çevirin.
Oda sıcaklığında beş dakika boyunca 15.871 G'de santrifüj. Süpernatanı attıktan sonra, 500 mikrolitre% 70 etanol ekleyin. Aynı durumda tekrar santrifüj yapın ve ardından süpernatanı atın.
Pelet hava ile kurutulduktan sonra, 50 mikrolitre steril nükleaz içermeyen su ekleyin ve rehidratasyona bırakın. Daha sonra DNA'yı kesme ucunu kullanarak pipetleyerek karıştırın. DNA konsantrasyonunu ölçmek için UV spektrofotometrisini kullanın.
DNA'yı sindirdikten sonra,% 0.8 agaroz kullanarak ayırın. Agaroz jelini 0.25 molar hidroklorik asit çözeltisine oda sıcaklığında 10 dakika boyunca hafif ajitasyonla batırın. Daha sonra jeli damıtılmış suyla iki kez durulayın.
DNA'yı denatüre etmek için, jeli bir sodyum hidroksit ve sodyum klorür çözeltisine batırın. Daha sonra jeli damıtılmış suyla iki kez durulayın. DNA'yı gösterildiği gibi nötralize etmek için, jeli pH yedide 0.5 molar hidroklorik asit ve üç molar sodyum klorür çözeltisine batırın.
Ekstraktör genomik DNA'sı, telomer kısıtlama fragmanlarının daha aşağı akış işlenmesi için kullanımını gösteren iyi bir bütünlük gösterdi.
