Bu çalışma için, pirinç fidelerinde yetiştirilen küçük kahverengi planthopper veya SBPH'leri kullanın. Kültürler hazır olduğunda, yetiştirilen SBPH'leri bir santrifüj tüpüne koyun ve 10 ila 30 dakika boyunca bir buz banyosuna yerleştirin. Ardından, donmuş bir SBPH'yi, karnı yukarı bakacak şekilde stereo mikroskop altındaki bir cam slayta yerleştirin ve odağı altı bacağına ayarlayın.
Ultra ince uçlu iki yüksek hassasiyetli cımbız hazırlayın. Bir cımbız kullanarak, yerinde tutmak için böceğin vücuduna bastırın ve bir bacağını diğer cımbızla dikkatlice çekin. Sonra böceğin göğsüne hafifçe bastırın ve hemolenfin yaradan akmasına izin verin.
Hemolenf toplamak için, pipet ampulüne bir mikrolitre kılcal tüp yerleştirerek bir mikropipet hazırlayın. Kılcal tüpü, mikropipet pipet ampulünü tutarak böcek yarasına yakın yerleştirin. Kılcal ucu eksüding hemolenfe dokunun ve toplayın.
Kılcal boru istenen ölçek çizgisine ulaştığında, emme işlemini durdurmak için pipet ampulü üzerindeki küçük deliği parmağınızla hafifçe bloke edin. Daha sonra toplanan hemolenfleri 100 mikrolitre PBS tamponuna boşaltın. Hemolenf toplanmasının doğruluğu, ayrı ayrı toplanan üç hemolenf örneğinde de benzer bir protein içeriği gösteren SDS-PAGE ile doğrulandı.
Larva için, toplam protein konsantrasyonu mililitre başına yaklaşık 3.7 miligram idi. Yetişkin kadın ve erkek SBPH'lerde, protein konsantrasyonları sırasıyla mililitre başına yaklaşık 3.5 ve 3.6 miligram idi ve üç örnek arasında anlamlı bir fark göstermedi. Larva hemolenfi, iki ila 20 nanometre büyüklüğünde hemositler gösterdi.
Ek olarak, hücre konsantrasyonu toplanan üç hemolenf örneğinde karşılaştırılabilirdi.
