Başlamak için, sekiz ila 10 haftalık, anestezi uygulanmış C57 siyah 6 fareyi cerrahi tezgahın üzerine yatırın. Künt forseps kullanarak dili dışarı çekin ve tutun. Ağza bir laringoskop yerleştirin ve ses telini görselleştirin.
20 gauge intravenöz katetere bir kılavuz tel yerleştirin. Daha sonra kateteri kanat kısmı burun ucu ile aynı hizaya gelene kadar yavaşça trakeaya itin. Fareyi vantilatöre bağlayın ve bir ısı lambasının altına sırtüstü pozisyonda yerleştirin.
Rektal sıcaklığı 37 santigrat derecede tutun. Ameliyat bölgesini tıraş edip dezenfekte ettikten sonra, femoral arterlere erişmek için sol ve sağ kasık bölgelerinde bir santimetrelik bir cilt kesisi yapın. Daha sonra distal femoral arteri dezenfekte edin ve bağlayın ve bir damla lidokain uygulayın.
Proksimal femoral artere bir klips yerleştirin ve klipsin distalindeki arterde küçük bir kesi yapın. Hem sol hem de sağ femoral arterlere bir polietilen 10 kateter yerleştirin. Her bir arteriyel çizgiye 50 mikrolitre bir ila 10 heparinize salin enjekte edin.
Çizgide pıhtılaşmayı önlemek için, fareyi yüzüstü konuma getirin ve stereotaksik bir kafa çerçevesine monte edin. Elektrokardiyogram izleme için sol kola, sol bacağa ve sağ kola üç iğne elektrotu bağlayın. Ardından başın üst kısmını tıraş edin ve üç alternatif iyot ve alkollü çubukla sterilize edin.
2,5 santimetrelik bir orta hat cilt kesisi yapın ve beyin görüntüleme için tüm kafatası yüzeyini ortaya çıkarmak için dört küçük ekartör kullanın. Ardından başınızın üzerine bir Lazer Benek Kontrast Görüntüleyici yerleştirin. Kardiyak arrestten önce serebral kan damarlarının taban çizgisini görmek için Lazer Benek Görüntüleyiciyi ayarlayın.
Kardiyak arresti indüklemeden önce, bir mililitrelik plastik şırıngayı 26 mikrolitre resüsitasyon kokteyli stok çözeltisi ile doldurun. Vücut ısısı 37 santigrat dereceye ulaştığında, kanı iki dakika oksijenlendirmek için oksijen ölçeri %100'e ayarlayın. Daha sonra sağ femoral arterden resüsitasyon kokteyli içeren plastik şırıngaya 200 mikrolitreye kadar kan çekin.
Kardiyak arresti indüklemek için oksijeni kapatın ve anoksiyi indüklemek için nitrojeni %100'e yükseltin. Vantilatörü, izofluran buharlaştırıcıyı, sıcaklık kontrol cihazını ve nitrojen akış ölçeri kapatın. Kalp durması sırasında beyin kan akışının olmadığını onaylayın.
Lazer benek görüntüsünü gözlemleyerek oksijeni %100'e ayarlayın ve kalp durması başladıktan sekiz dakika sonra ventilatörü açın. Kalp atış hızı ve kan basıncı gibi hayati değerleri geri kazandırmak için resüsitasyon kokteyli ile karıştırılan geri çekilmiş oksijenli kanı bir dakika içinde sağ femoral arterden kan dolaşımına hemen infüze edin. Beynin başarılı reperfüzyonunu doğrulamak için Lazer Benek Görüntüsüne bakın.
Ameliyat sonrası iyileşme için ekartörleri kafadan çıkarın, cilt kesisine %0.25 bupivakain uygulayın ve 6-0 naylon dikiş ipliği kullanarak kesiyi kapatın. Daha sonra kapalı cilt kesi yüzeyine antibiyotikli merhem sürün. Farede kardiyak arrest indüksiyonu 45 saniye içinde şiddetli bradikardiye yol açtı.
İki dakikalık bir anoksiden sonra, kalp atış hızı önemli ölçüde azaldı. Kan basıncı 20 milimetre cıvanın altına düştü ve serebral kan akışı durdu. Ayrıca, kalp durmasının sonunda vücut ısısı yavaş yavaş yaklaşık 32 santigrat dereceye düştü.
Kan resüsitasyon karışımına enjekte edildikten sonra tüm hayati fonksiyonlar düzelmeye başladı. Lazer Benek Kontrast Görüntüleme, kalp durması sırasında beyinde kan akışının tamamen olmadığını doğruladı, fotoakustik görüntüler, kalp durması prosedürü sırasında kan akışı, yapı ve oksijenasyondaki değişikliklerin tanımlanmasını sağladı.
