Anestezi uygulanmış hayvanı stereotaksik çerçeveye aktararak başlayın ve ardından kafayı burun konisine ve kulak çubuklarına sabitleyin. Hayvanın nabzını, nabzını, oksijen doygunluğunu, kan basıncını ve sıcaklığını ölçmek için probları yerleştirin. Göz merhemi sürün.
Tüyleri tüy dökücü kremle alın ve saç derisini üç pasaj iyot ve alkolle aseptik olarak temizleyin. Bir terminal çalışması için, cerrahi makas kullanarak kafa derisini çıkarın ve kafatasını lamboid sütürden kaudal olarak yaklaşık üç milimetre ve bregmaya üç milimetre önden maruz bırakın. Her iki taraftaki temporal kasın iç kısmını ortaya çıkarmak için kafa derisini parietal olarak kesin.
Ardından, uyarıcı elektrotları uygulamak için kafatasının temiz ve kuru olması için kalan deri altı bağ dokusunu çıkarın. Daha sonra, elektrotların kafatası ile temas edecek tarafına iletken jel uygulayın. Elektrodu bu temporal kasın üzerine yerleştirin ve aralıklı noktalarda kenarlarına cerrahi süper yapıştırıcı ile sabitleyin.
Daha sonra elektrotları rahatsız etmeden her iki taraftaki temporal kas ve kafa derisine lidokain macunu uygulayın. Ekstrakraniyal uyarıcı elektrotların empedansını test edin. Ardından, fareyi intrakraniyal kayıt elektrotları olmayan bir lazer benek görüntüleme cihazının altına yerleştirin.
İki kafatası tACS elektrotu arasında stimülasyon uygulamak için, sabit bir akım sağlayan ticari bir insan uyumlu uyarıcı cihaz kullanın. Stimülasyondan önce net bir taban çizgisi elde edin. Kafatasının her iki tarafında çeşitli genliklerde kısa süreli açma / kapama stimülasyonu uygulayın.
Stimülasyondan sonra net bir taban çizgisi sağlayın. Ekstrakraniyal uyarıcı elektrotlar kafatasının her iki tarafına yanal olarak dört milimetre yerleştirildikten sonra, çapak deliklerinin konumunu orta hattın her iki tarafında iki milimetrede, birbirinden dört milimetre uzakta ve sagital sütüre ortogonal olarak işaretleyin. Ardından, cam elektrotlar için iki çapak deliği açın.
Ekstrakraniyal elektrotlardan kafatasına akım girişini önlemek için bu çapak deliklerini steril mineral yağ ile doldurun. Daha sonra, havuzlanmış cam mikro elektrotları 0.2 molar sodyum klorür ile doldurun ve bunları bir mikro manipülatör kullanarak sagital sütürün yanal olarak yerleştirilmiş iki çapak deliğine yerleştirin. Cam mikro elektrotları çapak deliklerine yerleştirin.
Daha sonra, çapak deliği yerleştirildikten sonra ekstrakraniyal uyarıcı elektrotların empedansını test edin ve bunların beyne giden akım akışına müdahale etmediğini doğrulayın. Ekstrakraniyal stimülasyondan kaynaklanan serebral kan akışını ölçmek için, fareyi intrakraniyal kayıt elektrotları olan bir lazer benek görüntüleme cihazının altına yerleştirin. Beyne yerleştirildikten sonra, bu cam mikro elektrotların serebral korteks içinde yaklaşık bir milimetre olmasını sağlamak için çeşitli simetrik derinliklerde derinlik profilleri gerçekleştirin.
Doppler problarından ve mikro elektrotlardan gelen sürekli verileri yeterince kararlı bir başlangıç süresi boyunca kaydetmek için bir sayısallaştırma sistemi kullanın. Ardından, açma/kapama stimülasyonu uygulayın ve ekstra kraniyal stimülasyonu test edin. Yayılma depresyonunu indüklemek için yapılan deneyler için, kafatasının sağ tarafına üçüncü bir çapak deliği, koronal sütüre 1.5 milimetre rostral ve posterior frontal sütüre bir milimetre lateral ekleyin.
Daha sonra uygulamak için bu çapak deliğini KCL ile doldurun. Düşük yoğunluklu tACS'ye yanıt olarak, serebral kan akımının intrakraniyal direkt DC elektriksel kayıtları ve bilateral lazer Doppler kayıtları için veriler elde edildi. 0.75 miliamperlik bir uyarana yanıt olarak küçük bir yanıt gözlenirken, bir miliamperlik bir uyarana yanıt olarak daha büyük bir yanıt görüldü.
Hem elektriksel hem de serebral kan akışı izleri için, yanıtlar kafatasının sağ ve sol tarafı arasında asimetrikti. Ataklar sırasında serebral kan akışının lazer benekli kafatası görüntülemesi, korteks boyunca eşit olarak dağılan stimülasyona yanıt olarak artan kan akışını gösterdi. Stimülasyondan sonra kan akışı taban çizgisine geri döndü.
