Sıçanı uyuşturup sterilize ederek ve 12.5x cerrahi mikroskop altında 15 bıçaklı bir neşter ile ksifoidde yatay bir kesi yaparak yenidoğan donör kalbini toplamaya başlayın. Ardından, her iki tarafta koltuk altına kadar yanal olarak dikey kesiler oluşturmak için makas kullanın. Ön torasik duvarı boynun altında başka bir yatay kesi ile çıkarın.
İnferior vena kava veya IVC, sağ ve sol superior vena kava veya SVC ve pulmoner damarları makasla inceleyin. 7-0 ipek sütür kullanarak donuk damarları kuşatın ve bağlayın. Diyaframı forseps ile hafifçe aşağı doğru itin ve IVC'yi 30 gauge iğne ile delerek sağ atriyuma üç mililitre buz gibi, yüksek potasyumlu modifiye Krebs-Henseleit solüsyonu uygulayın.
IVC, SVC ve pulmoner damarları makas kullanarak kesin. Pulmoner arterleri mümkün olduğunca keserek ve 11 numaralı bıçaklı neşter kullanarak brakiyosefalik gövdenin distalindeki aortu keserek uygun uzunluğu sağlayın. Üç mililitrelik bir şırınga kullanarak kalbi buz gibi soğuk kardiyoplejik solüsyonla yıkayın.
Anestezi uygulanmış fareyi eğik bir rafa yerleştirin. Ön dişlerini bir ip ile sabitleyin ve başını cerraha doğru konumlandırın. Işığı boynun dış kısmına ses tellerinin bulunduğu bölgeye yerleştirin.
Dili iki parmağınızla kavrayın ve optimum entübasyon görünürlüğü için hafifçe yukarı ve sola doğru itin. Şimdi, 100 ila 150 gramlık bir sıçan için 18 gauge, iki inçlik bir kanül kullanın ve intratrakeal tüpü bantla sabitleyin. Entübasyon kanülünü küçük hayvan ventilatörüne bağlayın ve üreticinin talimatlarını izleyerek ayarları hayvanın boyutuna göre yapın.
Sıçanı entübe ettikten sonra, cilt insizyonunu yapmak için 15 bıçaklı bir neşter kullanarak orta hat laparotomi yapın. Karnın ön duvarını makasla açın ve bağırsakları sağ üst kadrana doğru hareket ettirin. Daha sonra, pamuk uçlu aplikatörler kullanarak retroperitoneal abdominal aort ve IVC'yi ortaya çıkarın.
Bağırsakları ılık, tuzlu suya batırılmış gazlı bezle örtün ve IVC ve abdominal aortun optimum maruziyetini sağlamak için ekartörler kullanın. Şimdi, infrarenal IVC ve abdominal aortun bifurkasyona kadar künt diseksiyonunu gerçekleştirin. Donuk infrarenal dallanan arterleri ve venleri 10-0 naylon sütürle bağlayın.
Hasat edilen donörün kalbini Krebs-Heneseleit tamponu içeren steril bir cerrahi leğende cerrahi alana taşıyın. Donör kalbini buz gibi soğuk kardiyoplejik solüsyonla aralıklı olarak suladığınızdan emin olun. Daha sonra, mikro makas kullanarak pulmoner gövdeyi ve inen aortu ayırın ve donör kalbi buz gibi soğuk kardiyoplejik solüsyonla sulayın.
Daha sonra, infrarenal aort ve IVC'nin distal ve proksimal segmentlerine dört atravmatik vasküler klemp uygulayın. İki küçük yatay kesim yapmak için mikro makas kullanarak bir aortotomi yapın. Ardından, donör kalbi aortun sol tarafına yerleştirin.
Alıcının infrarenal aortunu ve vericinin çıkan aortunu ve aortotominin saat 12 ve altı pozisyonlarında dikişlerle sabitleyin. Üçüncü ve dördüncü dikişlerle saat üç ve dokuz pozisyonlarında devam edin, üçüncü dikişten sonra kalbi nazikçe aortun sol tarafına çevirin. Her ara boşluğa bir ila iki sütür ekleyerek arteriyel anastomozu sonlandırın.
Şimdi, fareyi saat yönünün tersine çevirin, böylece baş cerrahın sol eline bakar. IVC'nin en iyi şekilde görülebilmesi için donörün kalbini abdominal aortun sol tarafına kaydırın. IVC'de aort anastomozuna biraz yakın bir venotomi yapın.
Boyutu donörün pulmoner gövde çapına göre ayarlamak için ponksiyon için 11 bıçak ve mikro makas kullanarak, intrakoval lümeni heparinize salinle yıkayın. Daha sonra, saat 12 ve altı konumlarından başlayarak damarın arka duvarına kesintili 11-0 naylon dikişler yerleştirerek alıcının IVC'si ile vericinin pulmoner gövdesi arasındaki venöz anastomozu gerçekleştirin. Ön duvara sürekli 11-0 naylon sütür yerleştirin, anastomozların üzerine emilebilir jelatin sünger şeritler yerleştirin ve distal olanlardan başlayarak mikrovasküler kelepçeleri çıkarın.
Koroner damarların dolduğundan ve proksimal klemplerin serbest bırakılmasından kısa bir süre sonra donörün kalbinin atmaya başladığından emin olun. Optimal hemostaz elde etmek için süngerlere pamuklu uçlu bir aplikatör kullanarak hafif basınç uygulayın. Bağırsakları dikkatlice karın içine yerleştirin, arteriyel ve venöz anastomozu bozmamaya dikkat edin.
Karın duvarını kapatın ve hayvanın iyileşmesine izin verin. Sağ ve sol ventriküllerin orta ventrikül seviyesinde rezeke edilen donör greftin yatay bir kesiti gösterilmiştir. Histolojik analiz, endokardiyal fibroelastoz dokusunun yüksek miktarda organize kollajen ve elastin liflerine sahip olduğunu gösterdi.
Endokardiyal fibroelastoz doku, VE-Cadherin ve alfa-SMA için çift boyanmış. CD-31, fosfo-SMAD2 ve SMAD3, CD-31 ve sümüklü böcek veya salyangoz endotelyalden mezenkimal geçişe işaret etti.
