Başlamak için, çalıştırılabilir bir dosyanın simgesine çift tıklayarak yazılım uygulamasını açın. Ağır zincir ve hafif zincir dizilerini 1 sütununun altındaki metin kutularına boşluk bırakmadan girin. Bispesifik antikorlar için, 2 sütununun altındaki ikinci metin kutusu kümesine ek ağır veya hafif zincirler ekleyin.
Aynı ağır zincirlere ve hafif zincirlere sahip monoklonal antikorlar için bu kutuları boş bırakın. Bu ağır zincir terminal varyantları uygunsa, uç terminal döngüsü ve C terminali kırpma onay kutularını işaretleyin. Kalsiyum klorür gibi temel bileşimler kullanarak ağır ve hafif zincirli kimyasal modifikasyon kutularına antikor ilaç konjugatları için bağlayıcı ve yük dahil olmak üzere kimyasal modifikasyonlar ekleyin.
Bu modifikasyonlar, ilgili protein alt birimine veya zincirine eklenecektir. Toplam disülfid sayısı olarak işaretlenmiş metin kutusunda protein moleküllerindeki disülfid bağlarının sayısını belirtin. İndirgenmiş ağır zincir disülfür bağlarının sayısını indirgenmemiş ağır zincir disülfürler metin kutusuna ve indirgenmemiş hafif zincir disülfür bağlarının sayısını indirgenmemiş hafif zincir disülfürler metin kutusuna girin.
Monoklonal antikorlar hafif zincirinde glikozilasyon varsa, hafif zincir glikosile edildi onay kutusunu işaretleyin. Çıktı klasörü metin kutusu için bir çıktı klasörü seçmek için Gözat düğmesine tıklayın ve dosya uzantısı olmayan çıktı dosyası adını Excel dosyası uzantısı olmayan metin kutusuna girin. Ardından Gönder düğmesine tıklayın.
Ekranda toplu hesaplama raporu oluşturuldu mesajı görünecek ve çıktı dosyası kullanıcı tarafından belirlenen klasörde bulunabilir. Uygulama otomatik olarak kapanacaktır. Çeşitli monoklonal antikorların kimyasal bileşimleri, hesaplanan kütleleri, ölçülen kütleleri ve kütle hataları bu tabloda özetlenmiştir.
Ticari olarak temin edilebilen bir monoklonal antikor standardı, FC bölgesinde özdeş ağır zincirlere, özdeş hafif zincirlere ve bir N-bağlı glikozilasyon bölgesine sahip geleneksel bir monoklonal antikoru temsil etmek üzere seçildi. Uygulama kullanımını genişletmek için ek bir hafif zincir N-bağlı glikozilasyona sahip bir monoklonal antikor, bispesifik bir monoklonal antikor ve bir antikor ilaç konjuge monoklonal antikoru da seçildi. Hesaplanan kütleler ile ölçülen kütleler arasındaki küçük kütle hataları, normal kütle hatası kabul kriterleri içindeydi ve bu da hesaplanan kütlelerin doğru olduğunu gösteriyordu.
