Fareyi ameliyat için hazırladıktan sonra, sternumun yedi milimetre solunda ve subkostal kenarın yaklaşık yedi milimetre yukarısında hedef alanı belirleyin. Forseps kullanarak cildi tanımlanan alan üzerinde kaldırın ve sadece cildi kesmek için keskin mikro diseksiyon makası kullanarak 10 milimetre dairesel bir kesi yapın. Daha sonra göğüs kafesi üzerindeki yumuşak dokuyu çıkarın ve bir koter kalemi kullanarak her iki uçtaki büyük kan damarlarını koterize edin.
Altıncı veya yedinci kaburgayı forseps ile yükseltin ve interkostal kası delmek için künt mikro diseksiyon makasının tek bir bıçağını kullanın. Şimdi makası nazikçe döndürün ve akciğer dokusu ve kaburgalarla temastan kaçınırken interkostal boşlukta yaklaşık 10 milimetrelik bir kesi yapın. Uygun akış gücünü belirlemek ve memeyi pisliklerden arındırmak için bileğinizdeki veya elinizdeki basınçlı havayı nazikçe boşaltın.
Ardından, akciğer hasarına neden olmamak için keside kısa süreli hava patlamaları uygulayın. Forseps ile altıncı veya yedinci kaburgayı kaldırın ve ekartörü göğüs duvarına paralel bıçaklarla interkostal insizyona yerleştirin. Ardından, ekartörün açılmasına ve akciğerin kademeli olarak ortaya çıkmasına izin vermek için kolu dikkatlice serbest bırakın.
Şimdi kurumasını önlemek için açıkta kalan akciğer dokusuna 37 dereceye kadar ısıtılmış iki ila üç damla steril PBS uygulayın. Bir parça alüminyum folyoyu farenin üzerine küçük bir kesik ile kaplayın ve doğrudan açıkta kalan akciğer dokusunun üzerine yerleştirin. Hedeflenen akciğer foto dönüşümü için kesiğin yalnızca açık toraksı ve yakındaki dokuyu gösterdiğinden emin olun.
Ardından, fare ve alüminyum folyo üzerine kesikli bir kutu yerleştirin ve kesiğin açıkta kalan akciğerle aynı hizada olduğundan emin olun. Ve fotoğraf dönüştürme lambasını doğrudan kutudaki oyuğun üzerine yerleştirin. Ardından, açıkta kalan akciğer dokusunu altı dakikalık sürekli bir süre boyunca aydınlatmak için fotoğraf dönüştürme lambasını etkinleştirin.
Fotoğraf dönüştürme işleminden sonra, lambayı devre dışı bırakın ve lamba kutusunu ve alüminyum folyo maskesini fareden uzaklaştırın. Bilekten hava boşaltarak akciğeri göğüs duvarından ayırın ve ardından göğüs kesisinden hava boşaltın. Ekartör kolunu sıkıca kavrayın ve bıçakları kapatmak için sıkın.
Kapalı ekartörü interkostal boşluktan dikkatlice manevra yapın ve akciğer dokusuna temas etmediğinizden emin olun. Ardından, interkostal insizyonu basit bir sürekli sütür deseni ile kapatmak için 5-0 ipek sütür kullanın ve insizyonun her iki tarafındaki kaburganın dahil edilmesini sağlayın. Yara kenarlarının hizalandığından ve göğüs duvarının bütünlüğünü yeniden sağladığından emin olmak için dikişi sıkıca çekin.
Ucunu dört kez düğümleyerek dikişi sabitleyin. Dikiş kuyruklarını düğüme mümkün olduğunca yakın kesin ve cerrahi zımbalar kullanarak cildi kapatın. Göğüs boşluğundaki fazla havayı çıkarmak için, ksifoid işleminin altına 28 gauge iğne ile bir mililitrelik bir şırınga yerleştirin.
Şırıngayı yaklaşık bir mililitreye geri çekin. Şırıngayı fareden çıkarın ve havayı boşaltın. Mavi ışığa maruz kalmadan önce akciğer metastazlarını ifade eden maruz kalan Dendra2'nin görüntüleri gösterilmektedir.
Akciğer metastazlarını ifade eden Dendra2'nin mavi ışığa maruz bırakılması, altı dakikalık maruz kalmanın hem ex vivo hem de in vivo örneklerde foto dönüştürülmüş kanaldaki en parlak sinyali ürettiğini gösterdi. Mavi ışığa maruz kalarak ameliyat edilen farelerden alınan her üç doku tipinde de foto dönüştürülmüş ve foto dönüştürülmüş olmayan hücreler tanımlandı. Mavi ışığa maruz kalmadan ameliyat edilen farelerin dokularında sadece foto dönüştürülmemiş tümör hücreleri bulundu.
