Cihazı açarak ve dokunmatik ekran arayüzünden T hücresi transdüksiyon işlemini seçerek başlayın. Prosedürü başlatmak için çalıştır'a tıklayın ve verilen ekran talimatlarını izleyin. Çevre giriş ekranında, operatörün boru setini, lot numarasını ve son kullanma tarihini paraflar.
Ardından, işlem kurulum ekranında tam işlemi seçin. Şimdi, CD4, CD8 seçim yöntemi için iki şişe seçim reaktifi seçin. Boru setini takın, tüm yem bağlantılarının sıkıca ayarlandığından emin olun ve dokunmatik ekrandaki talimatları izleyerek üst ve alt bütünlük testlerini tamamlayın.
Şimdi, ortam ve işleme tampon torbalarını ekrandaki kılavuza göre takın ve boru setinin otomatik olarak hazırlanmasına başlayın. Transfer hücresi ürün ekranı göründüğünde, çözülmüş T hücresi ürününü 150 mililitrelik bir transfer torbasına aktarın ve boru setinin uygulama torbasına steril kaynak yapın. Ardından, uygulama torbasından bir numune almak için bir kalite kontrol torbası kullanın ve bir hematoloji analizörü kullanarak hücre sayımı yapın.
CD4 ve CD8 reaktif şişelerini boru setine bağlayın ve T hücresi zenginleştirmesi için seçim sürecini başlatın. Zenginleştirmeden sonra, seçilen hücrelerin bir örneğini yeniden uygulama torbaları kalite kontrol torbasından çıkarın. İstenen hücre konsantrasyonunu ve başlangıç numarasını girin.
Şimdi, ekrandaki talimatlara göre bir aktivasyon reaktifi şişesi takın. Ardından, karbondioksit konsantrasyonunu% 5'e ve kültür odası sıcaklığını 39 santigrat dereceye ayarlayın. Başlangıç noktası olarak gelişmiş besleme protokolünü kullanarak etkinlik matrisini oluşturun ve bireysel adımları özel optimize edilmiş protokolünüze göre değiştirin.
Bu durumda, transdüksiyon aktivite süresini tohumlamadan 24 saat sonrasına ve kültür yıkamasını transdüksiyondan 48 saat sonrasına ayarlayın. Çalkalayıcı etkinleştirme süresini, kültür yıkamasını başlattıktan 30 dakika sonra başlayacak şekilde ayarlayın. Artık gerekli olmadıkları için orta boy torba değişimi ve atık torbası değişimi işlemlerini silin.
Ardından, ekimi başlatmak için ekranda tamam'a basın. Cihazın, yeniden uygulama torbasından kültür odasına gerekli hacmi otomatik olarak pompalamasına izin verin. Hesaplanan vektör hacmini, 10 mililitrelik bir nihai hacme ulaşmak için soğuk bir ortamla 20 mililitrelik bir reaktif torbasında çözdürün ve hazırlayın.
Transdüksiyon süresini iki dakika sonrasına ayarlamak için aktivite matrisini ayarlayın ve transdüksiyon aktivitesini başlatmak için tamam'a basın. Ekrandaki talimatları izleyerek vektör torbasını boru setine steril olarak kaynaklayın. Aktivite matrisini, transdüksiyondan 48 saat sonra planlanan kültür yıkama ile gerçek transdüksiyon başlangıç zamanına göre değiştirin.
Çalkalayıcıyı etkinleştirme süresini kültür yıkamasından 30 dakika sonrasına programlayın. Son olarak, medya değişiminin altıncı gün öğleden sonra saat 14:00'te gerçekleştiğinden emin olun. Numune düğmesine basın ve aktif kültürden bir kalite kontrol numunesi almak için ekrandaki talimatları izleyin.
Çeşitli analizler için numuneyi üç mililitrelik alikotlara bölün. Son formülasyon tamponunu hazırlayın, bir kısmını daha sonra kriyoprotektan preparatı için saklayın. Ardından, kültürün sonunu gelecekte iki dakikaya ayarlayarak etkinlik matrisini ayarlayın.
Son formülasyon tamponunu boru setine takın ve hasada başlayın. Hedef hücre torbasını kapatın ve çıkarın. Bu çanta, infüzyon veya kriyo-koruma için hazır CAR T hücrelerini içerir.
Klinik çalışmanın RT çalışmaları %46 idiBu, TCT sürecinin hücre genişlemesini etkili bir şekilde desteklediğini gösterir. Nihai ürünün hücre canlılığı %88 ila 94 arasındaydı ve CD3 T hücresi saflığı %89 ila 93 idi Endotoksin, mikoplazma, sterilite, replikasyon yetkin lentivirüs ve rezidüel lösemik hücreler tespit edilemedi.
