Başlamak için, sağlıklı bireylerden idrar örnekleri toplayın. Büyük apoptotik gövdelerde hücre kalıntılarını ortadan kaldırmak için 15 mililitrelik konik bir tüpte 12 mililitre numuneyi santrifüjleyin. Ardından, 10 mililitre süpernatanı 15 mililitrelik yeni bir tüpe aktarın.
Numuneye bir mililitre yükleme tamponu ve 200 mikrolitre EV tuzak boncuğu bulamacı ekleyin. Numuneyi oda sıcaklığında uçtan uca dönüşle 30 dakika inkübe edin. Numuneyi pelet yapmak için 15 mililitrelik konik boruyu manyetik bir ayırıcı rafa yerleştirin.
Süpernatanı dikkatlice çıkarın ve boncukları bir mililitre yıkama tamponunda tekrar askıya alın. Ardından, süspansiyonu 1,5 mililitrelik bir mikro santrifüj tüpüne aktarın ve hücre dışı vezikülü veya EV'ye bağlı boncukları yeniden süspanse etmek için hafifçe pipetleyin. Mikro santrifüj tüpünü 1,5 mililitrelik tüpler için manyetik bir ayırıcı rafa yerleştirin.
Bir P200 pipeti kullanarak, süpernatanı dikkatlice aspire edin. Şimdi, boncukları bir mililitre yıkama tamponu ile yıkayın, ardından oda sıcaklığında bir mililitre PBS ile iki yıkama yapın. Boncukları 100 mikrolitre taze hazırlanmış 100 milimolar Trietanolamin ile beş dakika inkübe edin.
1.5 mililitrelik mikro santrifüj tüpü manyetik ayırıcı rafı kullanarak, EV'leri içeren elden kaçan çözeltiyi toplayın. Elde edilen çözeltileri birleştirdikten sonra, dört santigrat derecede bir vakumlu santrifüj yoğunlaştırıcı kullanarak eluiti kurutun.
