Başlamak için, çıplak iğnenin ucu 7 milimetre açıkta kalacak şekilde plastik kılıf korumasını keserek 23G'lik bir kelebek iğne hazırlayın. Ardından, kelebek iğnesini polimer borulu 1 mililitrelik bir şırıngaya bağlayın. Anestezi uygulanmış bir fareyi stereotaksik bir çerçeveye yerleştirin ve bir yüz maskesi ile anesteziyi koruyun.
Sonra, sıçanın arka başındaki ve boynundaki kürkü çıkarın. Sıçanın kafasını kulak çubuklarıyla sabitleyin. Hayvanın kafasını dikey olarak yaklaşık 45 derece alçaltmak için stereotaksik çerçevenin burun çubuğunu hareket ettirin.
Arka kafada, oksipital çıkıntı ile atlas omurgası arasında bir eşkenar dörtgen yönüyle hafif basık bir yüzey bulun. Yüzeyi% 70 etanol ile ovalayın. BOS toplama için, kelebek iğneyi, hareket iğnenin plastik manşon koruması tarafından engellenene kadar eşkenar dörtgen şeklindeki bastırılmış yüzeyin ortasına dikey olarak cisterna magna'ya sokun.
BOS'un iğneden yavaşça akmasına izin vermek için şırınga pistonunu yavaşça çekin. Yaklaşık 100 mikrolitre BOS'u polimer tüpe toplayın. Polimer boruyu kelebek iğneye çok yakın sıkıştırın ve boruyu bu noktada kesin.
Berrak numuneyi şırıngaya çizin. Numuneyi steril 0,2 mililitrelik mikrotüpe atın ve bir saate kadar buz üzerinde saklayın. Hayvanın kafasındaki BOS çekilme bölgesini dezenfekte edin.
Fareyi stereotaksik çerçeveden çıkarın ve kafesine geri koyun. Kalite kontrol için numunenin 2 mikrolitresini bir kenara koyun ve geri kalanını daha fazla analiz için 80 santigrat derecede saklayın. Tekrarlanan BOS yoksunluğu, üç deney sıçan grubunda beş gün boyunca gerçekleştirildi ve net BOS ile sonuçlanan başarılı geri çekilmelerin yüzdesi olarak ifade edildi.
BOS çekilmesi için kanüle edilen çift başlı implant donanımlı sıçanlarda başarı oranı %71.1 idi, bu da hayvanın kafasındaki kanülün tekrarlanan BOS örneklemesini engelleyebileceğini gösteriyor. Buna karşılık, BOS toplama işlemi sadece bağlı veya telemetri elektrotları implante edilmiş hayvanlarda cisterna magna ponksiyonu ile gerçekleştirildiğinde, başarı oranı %86.7 ve %88.9 idi.
