Başlamak için, ameliyat masasına anestezi uygulanmış bir fare yerleştirin. Steril oftalmik makas ve forseps kullanarak göğüs ve karın boşluklarını açın. Bu, kalbi ve bağırsakları açığa çıkaracaktır.
Mezenterik arterleri ve aortu ayrı ayrı dikkatlice inceleyin. Mezenterik arterleri PBS'de durulayın ve bunları% 1 penisilin-streptomisin-amfoterisin B çözeltisi içeren 10 santimetrelik bir Petri kabına aktarın. Benzer şekilde, aortu durulayın ve aynı çözeltiyi içeren başka bir Petri kabına aktarın.
Aort ve mezenterik arterlerin etrafındaki tüm yağları hızla alın. İki kez duruladıktan sonra, arterleri bir doku kültürü başlığına stereo mikroskop altına yerleştirin. Arterler boyunca dikkatlice uzunlamasına bir kesim yapın.
Daha sonra ince forseps kullanarak, aortun dış tabakasını ve mezenterik arterlerin ilk dalını soyun. Dış tabakayı 0,1 ila 0,2 mililitre kültür ortamı içeren 3,5 santimetrelik bir Petri kabına yerleştirin ve yaklaşık bir milimetre küplük küçük parçalar halinde doğrayın. Doku parçalarını jelatin kaplı bir T-25 şişesine aktarın.
Şişeyi% 5 karbondioksit ile 37 santigrat derecede bir inkübatöre dikey olarak yerleştirin. Üç saat sonra, tüm doku bloklarını batırmak için şişeye beş mililitre DMEM yüksek glikoz büyüme ortamı ekleyin.
