Arabidopsis thaliana Tohum Yüzey Sterilizasyonu ve Büyüme Odasında Yetiştirme

Başlamak için, iki mililitrelik bir mikro santrifüj tüpüne gerekli miktarda arabidopsis thaliana Columbia sıfır tohumu ekleyin. Tohumların yüzey sterilizasyonu için tüpe iki dakika boyunca% 70 etanol ekleyin ve tüpü hafifçe sallayın. Etanolü çıkardıktan sonra, tohumları beş dakika boyunca steril suyla yıkayın.

Suyu tüpten çıkarın ve kalan suyu çıkarmadan önce tohumların yerçekimi ile tüpün dibine çökelmesine izin verin. Bir tohum suyu süspansiyonu oluşturmak için, tohumları içeren tüpe eşit miktarda steril su ekleyin. Geniş bir pipet ucu kullanarak, bir ekim ızgarasını takiben orta plakadaki her alana arka arkaya yaklaşık 30 ila 40 tohumu eşit olarak dağıtın.

Suyun tohumlarda 30 dakika kurumasını bekleyin. Plakayı mikro gözenekli bantla kapatın ve alüminyum folyoya sarın. Tohum uyuşukluğunun üstesinden gelmek ve homojen çimlenmeyi teşvik etmek için tohumları karanlıkta dört santigrat derecede üç gün boyunca katmanlandırın.

Daha sonra, folyoyu plakadan çıkarın ve çimlenmeyi indüklemek için plakayı tabakalı tohumlarla bir saat boyunca beyaz ışığa aktarın. Tohumları ışıktan korumak için hafif işlemden sonra plakayı alüminyum folyo ile sarın. Plakayı bir büyüme odasına dikey konuma yerleştirin ve karanlıkta 21 santigrat derecede dört gün boyunca yetiştirin.