Başlamak için, 20 mililitre fermente üzüm örneğini steril 50 mililitrelik vidalı kapaklı bir tüpe aktarın. Daha sonra tüpe 10 mililitre soğuk su ekleyin ve homojenizasyon için girdap yapın. Numuneyi 800 G'de dört santigrat derecede bir dakika santrifüjleyin.
Süpernatanı 50 mililitrelik yeni bir tüpe aktarın ve dört santigrat derecede 20 dakika boyunca 3000 G'de santrifüjleyin. Süpernatanı attıktan sonra, peleti bir mililitre PBS'de yeniden süspanse edin. Hücre süspansiyonunu iki mililitrelik vidalı kapaklı bir tüpe aktarın ve iki dakika boyunca 14.000 G'de santrifüjleyin.
Şimdi peleti pH 7.4 ve 122 mikrolitre DNA tamponu olan 978 mikrolitre sodyum fosfat tamponunda yeniden süspanse edin. Tüpü girdap haline getirin ve 45 dakika ila bir saat boyunca dört santigrat dereceye yerleştirin. Numunenin bir mililitresini bir lizis çözeltisine, bir tüpe aktarın ve kapağı sıkın.
Numuneyi bir boncuk çırpma öğütücüsünde her biri 60 saniye boyunca üç kez homojenize edin. Daha sonra parçalama matrisi E tüpünü 16.800 G'de bir dakika santrifüjleyin ve süpernanntı temiz bir mikrotüpe aktarın ve tüpe 250 mikrolitre protein çökeltme çözeltisi ekleyin. İçeriği karıştırmak için tüpü 10 kez sallayın.
Numuneyi 16.800 G'de beş dakika santrifüjleyin ve süpernatanı steril 15 mililitrelik bir tüpe aktarın. Daha sonra süpernatanıma bir mililitre bağlayıcı matris süspansiyonu ekleyin ve tüpleri üç dakika rafa yerleştirmeden önce iki dakika ters çevirerek karıştırın. Süpernatanın bir mililitresini çıkardıktan sonra, kalan süpernatanttaki matrisi yeniden süspanse edin.
Karışımın 600 mikrolitresini bir spin filtre tüpüne ve santrifüje aktarın. Ardından akışı boşaltın ve spin filtre borusuna 500 mikrolitre yıkama solüsyonu ekleyin. Döndürme filtresini çıkarın ve beş dakika boyunca yeni bir yakalama tüpüne koyun.
Kuruduktan sonra, filtre membranına 50 mikrolitre ılık DNAse-free su ekleyin ve matrisi bir pipet ucuyla hafifçe karıştırın. DNA'yı elüte etmek için bir dakika boyunca 14.500 G'de santrifüjleyin. Numuneyi bir agaroz jel üzerine yükleyin.
Son olarak, DNA konsantrasyonunu ölçün.
