Başlamak için, kütle fotometresini açın ve herhangi bir ölçüme başlamadan önce bir saat çalışmasına izin verin. Titreşim önleyici tabloyu etkinleştirmek için gücü açın ve izolasyon düğmesine basın. Ardından, MicrofluidX kutusunu etkinleştirmek için hava kompresörünü açın.
Ardından veri toplama yazılımını ve ardından MicrofluidX kontrol yazılımını başlatın. Numuneyi ve kalbirantı yüklemek için, kalbirant santrifüj tüpünü MicrofluidX kutusunun içindeki dört numaralı yuvaya ve numune santrifüj tüpünü beş numaralı yuvaya yerleştirin. Temizleme solüsyonlarını, CS1, CS2 ve CS3'ü MicrofluidX kutusunda sırasıyla bir, iki ve üçüncü konumlara yerleştirin.
Tampon hattını 200 mililitrelik pH 7.4 tampon şişesine bağlayan kapağı takın. Ardından MicrofluidX çipini bir hazırlık plakasına yerleştirin. S akış birimi sensörünün diğer tüp ucunu, numune hattını tamamlayan MicrofluidX çipindeki ilk kanalın numune girişine bağlayın.
L akış birimi sensörünün diğer ucunu MicrofluidX çipindeki ilk kanalın tampon girişine yerleştirin ve tampon hattını sonlandırın. Çıkış toplama için, MicrofluidX çipindeki ilk kanalın çıkışına bir tüp takın ve diğer ucunu bir atık kabına, şişeye veya behere yerleştirin. Kütle fotometresinin objektif merceğine az miktarda mikroskop daldırma yağı sürün.
MicrofluidX çipini kütle fotometresinin tutucusuna yerleştirin, numune girişinin yukarı baktığından emin olun ve aşama cl'yi kullanarak sabitleyin.amps. Birinci kanalın gözlem alanını fotometrenin objektifi ile hizalayarak sahneyi ayarlamak için veri toplama yazılımını kullanın. Ardından kütle fotometresinin kapağını kapatın ve veri toplama yazılımında damlacık seyreltme odak bulma özelliğini etkinleştirin.
Yazılım arayüzünün sol alt köşesindeki beyaz odak halkasını inceleyin. Daldırma yağında hava kabarcıkları olduğunu gösteren boşluklar varsa, kademe hızını maksimuma çıkarın ve bunları ortadan kaldırmak için tablayı yavaşça yan yana kaydırın. Ölçüm sırasında herhangi bir kirlilik olmadığından emin olmak için bir dakikalık ölçüme başlamak için kayıt düğmesine basın.
pH 7.4 olan 200 mililitrelik tampon şişesinin kapağını çıkarın ve pH 5.0 olan 200 mililitrelik tampon şişesine takın. MicrofluidX çipini daha önce gösterildiği gibi bir hazırlık plakasına yerleştirin ve çıkış toplama için MicrofluidX çipindeki ilk kanal yerine ikinci kanalı kullanın. MicrofluidX kontrol yazılımında, M anahtarını beşinci konuma getirin.
Numune hattı akış hızını dakikada sekiz mikrolitreye ayarlayın ve numune hattındaki basıncın 350 milibarın altında kaldığından emin olun. Akış hızlarını hesaplarken, düşük hızdaki tam farkı istenen numune seyreltme faktörüyle eşleştirin. Deneyi tamamladıktan sonra, hatların temizliğini korumak için temizleme protokolünü izleyin.
