Aconitum sarkacının 2D-HPLC-MS için Numune Hazırlama

Aconitum sarkaç burcunu veya APB'yi tartarak numune hazırlamaya başlayın. 10.000'e bir hassasiyet terazisi kullanarak, üç mililitrelik bir mikro santrifüj tüpünde 0.25 gram kuru APB tartın. Buna 2,5 mililitre metanol ekleyin ve ardından 240 watt gücünde ve 40 kilohertz frekansında 30 dakika boyunca sonikasyon yapın.

Sonikasyonlu numuneyi beş dakika boyunca 1.2G'de santrifüjleyin ve süpernatanı toplayın. 0,22 mikronluk bir membran filtreden süzün. Daha sonra, organik faz veya faz B olarak asetil nitril kullanarak iki boyutlu mobil fazı hazırlayın ve sulu faz veya faz A olarak% 0.1 formik asit içeren ultra saf su.0.22 mikron filtreden iki fazlı filtrasyon yaptıktan sonra, mobil fazları 15 dakika boyunca 40 kilohertz'de ultrasonik sonikasyona tabi tutun.

Kabarcıkları çıkarmak için değiştirilen mobil fazı temizleyin. 1B sütun olarak bir C18 sütunu ve 2B sütun olarak bir hidrofilik sütun seçin ve bunları cihaza monte edin. Uygun şönt oranını ayarlamak için, 2D-LC cihaz taslağını bir T üzerinden kütle girişine ve T'nin diğer ucunu şönt bir hatta bağlayın.

Kütle spektrumu için uygun akış hızını sağlamak için akış hızını uygun bir değere ayarlayın.