Nanosaniye Darbeli Elektrik Alanı (nsPEF) ile Uyarılmış RSC96 Hücrelerinin Hücresel Proliferasyonunun ve Migrasyonunun Doğrulanması

Başlamak için, elektrikle uyarılan RSC96 hücrelerini alın ve 96 oyuklu bir hücre kültürü plakasının her bir oyuğuna 100 mikrolitre hücre ekleyin. Kitten 10 mikrolitre CCK8 çözeltisi alın ve 96 oyuklu hücre kültürü plakasına ekleyin. Plakayı 37 santigrat derecede bir karbondioksit inkübatöründe 30 dakika ila 4 saat daha inkübe edin.

Tohum 3 kez 10 ila 5. Kuyu başına toplam hacmi 2 mililitre olan altı oyuklu bir plakanın her bir oyuğundaki hücreler. Ucu dikey olarak tutarken kültür kuyusunun altına yatay bir çizgi çizmek için bir pipet ucu kullanın. Kültür ortamını çıkardıktan sonra, hücreleri PBS ile iki ila üç kez yıkayın.

Her oyuğa 2 mililitre serumsuz ortam ekleyin, ardından plakayı 37 santigrat derece inkübatöre yerleştirin. Hücre göçündeki değişiklikleri gözlemlemek için ters çevrilmiş mikroskobun 0 saat ve 24 saatte dört kat büyütmesi altında fotoğraf çekin. CCK8 testi, RSC96 hücrelerinin, kontrole kıyasla santimetre başına 5 kilovolt grubunda önemli ölçüde daha hızlı çoğaldığını ortaya koydu.

Buna karşılık, daha yüksek parametreler, kontrol ve santimetre başına 5 kilovolt gruplarından daha kararsız proliferasyon oranlarına yol açtı. Çizik analizi, santimetre başına 5 kilovolt grubundaki RSC96 hücrelerinin göç hızının, kontrol ve santimetre başına 10 kilovolt gruplarından önemli ölçüde daha hızlı olduğunu ortaya koydu.