Başlamak için, Lizojen suyu veya LB ortamını elde edin ve antibiyotikleri ortama ekleyin. Ortamın beş mililitresini kapaklı steril test tüplerine alikot edin. Ortamı, dondurucu stoklarından alınan plazmitleri ifade eden Escherichia coli suşları ile aşılayın ve kültürü gece boyunca bir çalkalayıcıda inkübe edin.
Daha sonra, DMSO'da 10 milimolar tiyofen sülfonamid çözeltisi hazırlayın ve iyice karıştırmak için girdap yapın. 15 mililitrelik konik tüplerde alınan 10 mililitre ortamda kültürleri 1 ila 100 kez geri seyreltin. Karıştırmak için kısaca girdap.
96 oyuklu bir plakanın uygun kuyucuklarına kültürler ekleyin. Karıştırdıktan sonra, her seferinde 50 mikrolitre çözelti aktararak A'dan E'ye kadar bir seyreltme serisi hazırlayın. Plakayı mikro gözenekli bantla örtün ve inkübe edin.
Bandı çıkardıktan sonra, bir plaka okuyucu kullanarak, 600 nanometre GFP ve mCherry'deki optik yoğunluğu okuyun. Son olarak, verileri hücre başına normalleştirilmiş floresan olarak kaydedin ve çizin. 3-tiyofen sülfonamid bileşikleri için veriler, 1A ve 3B bileşiklerinin her birinin farklı derecelerde LuxR / HapR'ye inhibe edici olduğunu, 2B'nin ise herhangi bir aktiviteye sahip olmadığını göstermiştir.
