Başlamak için, hasat edilmiş dorsal kök gangliyonlarını alın. Temiz bir tezgahta, 60 milimetrelik bir Petri kabını düzeltme ortamı ile doldurun. Diseksiyon dürbününü ve cam boncuk sterilizatörünü düzenleyin ve dürbünün yanına kırpma aletlerine sahip bir otoklav alet kutusu yerleştirin.
Diseksiyon kapsamını kullanarak, dorsal kök ganglionunun etrafındaki fazla dokuyu çıkarın ve dorsal kök ganglion gövdesine yakın sinir köklerini kesin. Şimdi, ikinci bir 60 milimetrelik Petri kabını taze ortamla doldurun. Diseksiyon kapsamını kullanarak, kesilmiş dorsal kök gangliyonlarını yaklaşık 0,5 milimetreye kadar kesin.
Kesilen dorsal kök gangliyonlarını buz üzerinde ortam içeren 24 oyuklu taze bir plakaya aktarın. Ardından, önceden karıştırılmış hidrojelden sırasıyla 65.1 ve 52.8 mikrolitre pipetleyin soma ve nörit bölmelerine yerleştirin. Kesilen dorsal kök gangliyonlarını soma bölmesine dikkatlice yerleştirin.
Hidrojeli inkübatörde 37 santigrat derecede 30 dakika boyunca termal olarak çapraz bağlayın. Ardından, hidrojeli 90 saniye boyunca UV çapraz bağlayın. Daha sonra, hidrojel ve dorsal kök gangliyonlarına dorsal kök gangliyon büyüme ortamı ekleyin.
Ortamdaki reaktif olmayan veya artık foto başlatıcıları çıkarmak için bir saat sonra tam bir ortam değişikliği yapın.
