Murin trakeal epitel hücreleri, parke taşı görünümüne sahip sağlam bir tek tabaka oluşturduğunda, hücreleri üç mililitre önceden ısıtılmış PBS ile nazikçe durulayın. Tabağa üç mililitre hayvansal bileşen içermeyen enzimatik ayrışma çözeltisi ekleyin ve 37 santigrat derecede beş dakika inkübe edin. Hücreleri yerinden çıkarmak için nazikçe pipetleyin ve süspansiyonu üç mililitre hayvansal bileşen içermeyen enzim inhibisyon çözeltisine aktarın.
Hücre süspansiyonunu 400 G'de dört santigrat derecede beş dakika santrifüjleyin ve peleti bir mililitre genleşme ortamında yeniden süspanse edin. Tripan mavisi ve bir hemositometre kullanarak canlı hücreleri sayın. Sıçan kuyruğu kollajeni ile önceden kaplanmış 100 milimetrelik bir tabak üzerinde plaka P1 hücre süspansiyonu.
Hücreleri 37 santigrat derecede% 5 karbondioksit ile kültürleyin.
