Atomik kuvvet mikroskobu veya AFM ölçümlerinden önce, konsolu bir cam blok üzerine monte edin. Motor kademesinin tutucusuna PBS ile doldurulmuş bir Petri kabı yerleştirin ve cam bloğu AFM kafasına yerleştirin. Ardından AFM başlığını, konsol tampona daldırılacak şekilde Petri kabının üzerine yerleştirin ve lazeri manuel olarak hizalayın.
JPK yazılımında, konsolu sert bir yüzeye ilerletmek için yaklaşma ve edinme düğmesine basın. Tek kuvvet-mesafe eğrisi elde edildikten sonra, kalibrasyon yöneticisini açın ve yöntem altında temas tabanlı'yı seçin. Ardından oda sıcaklığını 20 santigrat dereceye ayarlayın.
Şimdi eğriyi yakınlaştırın ve hassasiyet uyumu için doğrusal parçayı seçin. Hassasiyet onay kutusuna tıklayın ve konsolu yüzeyden 200 mikrometre geri çekin. Ardından sonsuzluk sembolü onay kutusunu seçin ve Termal Gürültüyü Çalıştır'a tıklayın.
Ardından, ortaya çıkan frekans grafiğini yakınlaştırın ve farenin sağ tıklama düğmesini kullanarak bir aralık tanımlayın. Yay Sabiti onay kutusunu seçin ve kalibrasyon yöneticisini kapatın. Doku bloğuna ve kültür ortamına gömülü rejenere aksolotl uzvunu içeren Petri kabını AFM'nin tabak tutucusuna yerleştirin.
Parlak alan modunda doku bloğunun genel bir görüntüsünü elde edin. İlgilenilen bölgeyi yakınlaştırın ve pozlama süresini ve odağı ayarlayın. Girinti ölçümleri için ızgara parametrelerini ayarlayın ve bir dizi kuvvet-mesafe eğrisi kaydedin.
PyJibe yazılımında veri işleme için, kuvvet yer değiştirme eğrisini içeren dosyayı açın. Ön işlem sekmesini seçin ve temas noktası tahmini altında, çizgi ve polinom ile parça parça sığdır'ı seçin. Ardından uygun sekmesini seçin ve model'in altında küresel girinti'yi, yöntem'in altında nelder'ı seçin.
PyJibe yazılımında viskoelastik analiz için kuvvet mesafesi eğrisini içeren dosyayı açın. Ön işlem sekmesini seçin ve temas noktası tahmini altında, çizgi ve polinom ile parça parça sığdır'ı seçin. Ardından uygun sekmesini seçin ve model altında, KVM modeli kullanılarak viskoelastisite için düzeltilmiş Hertz modelini seçin.
Yöntem'in altında least sq'yi seçin. Doğru girinti yarıçapını 10 mikrometreye ve yaklaşma hızını saniyede 7,5 mikrometreye ayarlayın. Görünür ve gevşememiş Young modülünü, görünür viskoziteyi ve Maxwell elementi gevşeme süresini elde etmek için Modeli Uygula ve Tümünü Sığdır'a basın.
Belirgin Young'ın sağlam uzuvlardaki yarıçap ve ulna modül ölçümleri anlamlı bir fark göstermedi. Histoliz fazı sırasında, görünen Young'ın yarıçap ve ulna modülü sırasıyla 0.03 ve 0.13 kilopaskal'a dramatik bir şekilde azalmıştır. Sağlam kıkırdağın merkezindeki belirgin Young modülleri periferden daha yüksekti.
Histoliz aşamasında, belirgin Young modülü ölçümleri kıkırdak merkezi ve periferi arasında anlamlı bir fark göstermedi. Kıkırdak yoğunlaşması sırasında, belirgin Young moduli, orta sertlik değerlerini temsil eden 0.77 kilopaskal'a önemli ölçüde artmıştır. Gevşetilmemiş modüller, histoliz sırasında ve yoğunlaşan kıkırdakta sağlam doku boyunca önemli farklılıklar gösterdi.
Görünen Young moduli, gevşetilmemiş modüllere oldukça benziyordu ve bu da ağırlıklı olarak elastik bir tepkiye işaret ediyordu. Histoliz sırasında belirgin viskozite, sağlam doku ve yoğunlaşan kıkırdak ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha düşüktü.
