Başlamak için, yetişkin hermafrodit dişi solucanları içeren kültür plakasını inkübatörden çıkarın. Him-5 solucanlarını senkronize ettikten sonra, solucanları M9 tamponu ile beş kez yıkayın. Bir günlük yetişkin erkekleri tohumlanmış plakadan M9 tamponu içeren bir tüpe aktarın.
Kalan bakterileri ortadan kaldırmak ve tahlil sırasında yiyeceklerden kaynaklanan etkileşimi önlemek için solucanları tohumlanmamış bir NGM plakasına yerleştirin. % 1.5 burgu, 25 milimolar sodyum klorür, 1.5 milimolar Tris bazı ve 3.5 milimolar Tris hidroklorür içeren bir kemoreziva test plakası hazırlayın. Burguyu kemoreziva çözeltisi içinde tamamen eriyene kadar bir mikrodalgada ısıtın.
Soğuduktan sonra, kemoretraksiyon burgu çözeltisini petri kaplarına eşit olarak dağıtmak için bir pipet kullanın. Burgu yüzeyinin hafifçe kurumasını sağlamak için kapakları temiz bir alanda açık bırakın. Yüzey uygun şekilde kuruduktan sonra kapakları kapatın.
Kemoreziva testini yapmak için, petri kabının kapağında ve alt tarafında üç ayrı nokta işaretleyin. Plakadaki her deney ve kontrol noktasına iki mikrolitre bir molar sodyum azid uygulayın. Bir solucan toplayıcı ile 20 sağlıklı ve serbestçe hareket eden erkek solucan seçin.
Diseksiyon mikroskobu altında, solucanı başlangıç noktasında serbest bırakın. Kontrol noktasına hızlı bir şekilde iki mikrolitre M9 tamponu ve kapaktaki deney noktasına iki mikrolitre seks feromonu ekleyin. Kapağı yavaşça kapatın ve plakayı sessiz, sıcaklığa dayanıklı bir alana yerleştirin.
30 dakika sonra, her noktadaki solucan sayısını sayarak testi puanlayın. Kemotaksisin gelişmiş bir değerlendirmesi için, bir kamera kullanarak solucanların yörüngelerini kaydedin. HIM-5 erkekleri için kemotaksis indeksi sürekli olarak 0.5'in üzerindeydi, bu da seks feromon kaynağına güçlü bir çekim olduğunu gösterirken, SRD-1 erkekleri için kemotaksis indeksi sıfır civarındaydı.
Başarılı kemocazibe tahlilleri, him-5 erkeğinin zaman içinde feromon kaynağına daha yakın hareket ettiğini ve zaman, mesafe, hız, düzlük ve yön doğruluğunu gösteren renk kodlu yörüngeler olduğunu gösterdi.
