Başlamak için, Chlorella sorokiniana ve Haematococcus pluvialis'in büyüme kinetiğini incelemek için aşılamayı hazırlayın Standart laboratuvar prosedürlerine göre gerekli miktarda steril kültür ortamı hazırlayın. Hem fotobiyoreaktör hem de şişe için ışık kaynağını istenen renk spektrumuna göre yapılandırın. Harici ışık girişimini önlemek için her iki sistemi de örtün.
Fotoperiyot ayarlarını yaptıktan sonra, klorellaya 12 saat boyunca karbondioksit sağlamak için karbondioksit süre sistemini fotobiyoreaktöre bağlayın. Daha sonra, mililitre başına 300.000 hücrelik bir başlangıç hücre yoğunluğu veya 550 nanometrede 0.180'lik bir optik yoğunluk elde etmek için kültür kabını aşılayın. Kültürü, Chlorella sorokiniana için 12 saat ve Haematococcus pluvialis için sekiz saat olmak üzere düzenli aralıklarla örnekleyin.
Numunenin 40 mililitresini plastik bir konik santrifüj tüpüne yerleştirin. Tüpü 3000 G'de 15 santigrat derecede 20 dakika santrifüjleyin. Süpernatanı boşaltın ve hücreleri yeniden süspanse etmek için üç mililitre% 90 saf aseton çözeltisi ekleyin, ardından oksidasyonu önlemek için hücreleri alüminyum folyo ile kaplı bir cam tüpe aktarın ve bir girdap kullanarak karıştırın.
Askıya alınmış numuneyi bir buz banyosunda her biri beş dakikalık iki döngü boyunca sonikasyon yapın ve numuneyi 16 saat boyunca dört santigrat derecede dinlendirin. Dinlendikten sonra, numuneyi aynı koşullar altında her biri beş dakikalık iki döngü boyunca tekrar sonikasyon yapın ve numuneyi 15 santigrat derecede 20 dakika boyunca 3000 G'de santrifüjleyin. Pigment ekstraktını bir Pasteur pipeti kullanarak ayırın ve ışıktan korunan başka bir temiz tüpe aktarın.
Daha sonra pigment ekstraktını bir kuvars hücresine yerleştirin ve 600, 647 ve 664 nanometrede bir spektrofotometrede okuyun. Denklemi kullanarak klorofil konsantrasyonlarını hesaplayın. Chlorella sorokiniana'nın klorofil içeriği, yüksek karbondioksit ilavesi, mor ışık ve yüksek ışık yoğunluğu koşulları altında dördüncü tedavide en yüksekti.
Ana etkiler grafiği, ışık yoğunluğunun karbondioksit ve mor ışık efektlerine kıyasla daha düşük bir etkiye sahip olduğunu gösterdi. Chlorella sorokiniana'da, deney boyunca klorofil A ve B'de tutarlı bir artış görüldü ve klorofil A, 50 saatte klorofil B'yi aştı. Haematococcus pluvialis'te 50 saat sonra klorofil konsantrasyonunda bir azalma gözlendi, klorofil B önemli ölçüde azalırken klorofil A daha yüksek kaldı.
