Yazarlar, Nico Zantl Klaus Pfeffer, ve Bernhard Holzmann teşekkür ederim. Bu çalışmada, Deutsche Forschungsgemeinschaft, Bonn-Bad Godesberg, Almanya (Vo 450/10-1 GRK-840) tarafından desteklenmiştir.

1. Fare hazırlanması <ol><li> Intraperitoneal enjeksiyon yoluyla uyuşturucu sıvı fare anestezi (reaktiflerin tabloya bakınız) ve yatar pozisyonda yerleştirin. </li><li> Fare ayakları, operasyon sırasında hayvan istikrarlı bir pozisyon sağlamak için plaka üzerinde bant ile sabit olması gerekir. </li></ol> 2. Operasyon <ol><li> Insanlarda yaygın olarak iv enjeksiyon için kullanılan bir iv kanül, alın ve ucu plastik tüp dairesel 2mm bölmek. Biz ölüm oranları (16GA (1,7 x45mm, 180 ml / dk) 14GA (2,0 x45mm, 270 ml / dak) BD Venflon 18GA (1,2 x45mm, 80 ml / dk)) kontrol etmek için üç farklı boyutta kanüller kullanırız. </li><li> Karın cildi derinlemesine dezenfeksiyon sonra, 15mm, orta hat boyunca sarın. Linea alba boyunca karın kasları ve periton incising tarafından periton mağara açın. </li><li> Çekal kutup belirlenmesi ve çekum, terminal ileum ve pamuklu kullanımı ile karın dışına çıkan kolon dikkatle çekin. </li><li> 15mm ileoçekal valf distal, bir delmek için 7 / 0 dikiş ile artan kolon duvarı vardır. Böylece, bağırsak damarlarının lezyonları kaçınılması gerekir. Sütür iki cerrahi knot kolon duvarı üzerine monte edilmiştir. </li><li> Şimdi 7 / 0 dikiş proksimal hazırlanan kanül 1-2 mm ile çıkan kolon ponksiyon. Plastik tüp karık seroza ile bir seviyeye kadar kolon içine kanül dikkatlice yerleştirin. </li><li> Kanül etrafında 7 / 0 dikiş serbest uçları tam plastik tüp hazırlanan karık içine koyun ve iki kat düğüm. </li><li> Şimdi, kolon antimezenterik duvarı ile 7 / 0 dikiş ve dikiş bu iğne alır. Ardışık iki cerrahi knot ayrıca kolon duvarındaki plastik tüp düzeltmek için yapılması gereken. Sütür uçları kesin. </li><li> Kanül küçük bir demir parçası Al ve sabitleme 7 / 0 dikiş plastik tüp yakın kapalı (1mm) kesmek. </li><li> Şimdi bir dışkı küçük bir ucu stent üstüne çıkana kadar dikkatlice pamuklu çekum, kolon stent doğru dışkı süt vardır. </li><li> Gut 0.5 mL salin solüsyonu intraperitoneal idaresi tarafından periton mağara ve performe sıvı resüsitasyon içine koyun. </li><li> Periton sürekli sütür (4 / 0) ile kapatın. </li><li> Tekil dikişler (4 / 0) ile cilt kapatın. </li></ol> 3. Ameliyat Sonrası Bakım <ol><li> Yeterli yiyecek ve su içermelidir, kafeste hayvan geri koyun. Analjezi için, güçlü bir analjezik madde (biz buprenorfin kullanan) intraperitoneal bir yönetim düzenli olarak yapılmalıdır. </li><li> Ameliyat sonrası ilk iki gün içinde, hayvanlar her 6 saatte bir kontrol etmek için vardır. </li></ol> 4. Şam CASP <ol><li> Adımları 1,1-2,4 gerçekleştirin. </li><li> Ponksiyon kolon etmeyin. Sadece adımları 2,6-2,8 gerçekleştirmek. </li><li> Adımları 2,10-3,2 gerçekleştirin. </li></ol> 5. Caspi <ol><li> 14G kanül aşağıdaki adımları 1,1-3,1 kullanarak CASP gerçekleştirin </li><li> 5h CASP sonra, bir hayvan tekrar çalıştırmak için. Adımları 1.1-1.2 göre fare tekrar hazırlayın ve uyutmak </li><li> Karın duvarına dikişlerle açın. </li><li> Çıkan kolon takılan stent ile dışarı çekin. </li><li> Dikkatlice stent sabitleme sütür kesme ve stent kaldırmak. </li><li> Tek tersini dikişler (7 / 0) ile kolon defekti kapatın. </li><li> Bağırsak karın boşluğuna geri koyun ve sonraki iki kez 10 ml serum fizyolojik solüsyonu ile yıkayın. </li><li> Periton sürekli sütür (4 / 0) ile kapatın. </li><li> Tekil dikişler (4 / 0) ile cilt kapatın. </li><li> Adımları 3,1-3,2 izleyin </li></ol> 6. Temsilcisi Sonuçlar Ameliyatı takip eden birkaç saat içinde, hayvanların başında sepsis klinik bulguları göstermektedir. Hastalığın tipik belirtileri terleme, hareketlilik, horrent kat azalır, gıda alımı, kilo kaybı ve daha küçük bir kaçamak davranış azalmıştır. Ardışık sistemik enfeksiyon ciddi bir peritonit gelişmekte hayvanlar normalde 48 saat içinde ölmektedir. Takılan stent büyüklüğüne bağlı olarak, farklı ölüm oranları oluşturulabilir. % 100 mortalite, 14G stent sonuçlar, 16G% 70 mortalite verir ve mortalite oranları% 50, 18G bir stent (Şekil 1a) kullanarak ulaşılabilir. Bir hayatta kalma oranı% 100 sham sonuçları. Genellikle, bütün hayvanların CASP sonra ilk 48 saat inbetween ölmektedir. Dolayısıyla, bu noktada hayatta olan bütün hayvanlar, geride kalanlar olarak kabul edilebilir. Ancak, nadir &quot;geç ölümler&quot; CASP sonra algılamak için en az 72 saatlik bir ek gözlem süresi önerilir. Caspi sonucu stent kaldırılır CASP sonra zaman dönemi bağlıdır. Bir müdahale 3h bir hayatta kalma oranı% 45 CASP sonuçları. Stent, sadece% 10 CASP sonra 5h kaldırılırsahayvanlar prosedürü hayatta. % 100 (Şekil 1b) mortalite 9h sonuçlar sonra bir stent çıkartılması. Şam Caspi% 100 hayatta kalma yol açar. Caspi ayarları genellikle CASP sonra 48 saat daha sonra ölür hayvanlar olduğundan, 10 günlük bir gözlem süresi önerilir. Ödem, vazodilatasyon, erythematic barsak duvarı, Peyer Kullanıcı yamalar keskin sınır, gut felç, serbest sıvı, ve septik sekresyon (Şekil 2): ​​CASP sonra karın situs 24 saat makroskopik muayene peritonit tipik belirtileri gösterir. Sistemik enfeksiyon bakteriyolojik analizi ile gösterilebilir. CASP 12 saat sonra, masif bakteriyel miktarda peritoneal lavaj tespit edilebilir, kan, karaciğer, akciğer, dalak ve böbrekler. Bakteri Kalitatif analiz, E. gibi tipik bağırsak bakterileri tarafından sistemik enfeksiyon ortaya koymaktadır. coli, Bacteroides türleri, enterokok türleri, vb (Şekil 3). CASP indüklenen sepsis yanlısı ve anti-inflamatuar sitokinler ve kemokinlerin yerel ve sistemik serbest tezahür eder. CASP, önemli miktarda TNF, IL-1β, IL-6, IL-10, MCP-1 ve diğerleri takip eden 12 saat, ama aynı zamanda organ süspansiyonlar, örneğin karaciğer, akciğer, dalak, böbrek Süpernatantları kan ELISA ile ölçülebilir (Şekil 4). Laboratuvar, sağkalım oranları, bakteriyoloji ve sitokin salınımı CASP kurarken CASP doğru performans için kontrol parametreleri olarak alınmalıdır. Daha sonra tüm deneysel ayarları için standart sistem okumak, bu parametreler alınabilir. <img src="/files/ftp_upload/2299/2299fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1a: CASP sonra Survival. CASP cerrahisi sonrası sağkalım oranları takılan stent çapı bağlıdır. Mortalite oranı% 100,% 70 mortalite 16G CASP sonuçları, 18G CASP 14G CASP sonuçları% 50 ölüm yol açar. Şam CASP% 100 sağkalım ile ilişkilidir. n = 20/group B: Caspi cerrahi stent kaldırma bağlı sağ kalım oranları. 14G CASP sonra 3h stent çıkartılması mortalite oranı% 55 yol açar. % 100 ölüm 14G CASP sonra 9h stent çıkartılması ise% 90 mortalite oranı 14G CASP sonra 5h Stent kaldırılması. % 100 bir hayatta kalma Şam Caspi (5h) sonuçları. n = 10/group (Şam Caspi Caspi 9h), n = 20/group (3h Caspi 5h Caspi). <img src="/files/ftp_upload/2299/2299fig2.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2: CASP sonra karın situs 24 saat. Karın duvarı sırasıyla, 16G CASP veya sahte CASP 24 saat sonra çıkarıldı. Sahte çalışan fare situs fizyolojik görünüyor. Buna karşılık, ödem, hiperemi, dilatated bağırsakları ve Peyer Kullanıcı yamaları sınırlandırılması CASP sonuçları ciddi peritonit göstermektedir. <img src="/files/ftp_upload/2299/2299fig3.jpg" alt="Şekil 3" /> Şekil 3: Bakteriyoloji. CASP ameliyat sonrası 12 saat içinde birkaç bölmeleri ve bağırsak bakterileri tarafından organları ciddi enfeksiyona yol açar. Bakteriyel numaraları koloni oluşturan birim (kob) başına ml, sırasıyla verilmiştir. Sahte çalışan fareler alınan bakteri kültürleri (gösterilmemiştir) tamamen sterildir. 16G CASP, n = 5/group. <img src="/files/ftp_upload/2299/2299fig4.jpg" alt="Şekil 4" /> Şekil 4: Sitokinler. CASP çeşitli sitokinler ve kemokinleri organ Süpernatantları plazmada saptanabilir ve sistemik bir immün yanıtı tetikler. Rakam Örnek olarak pro-inflamatuar sitokinler, tümör nekroz faktörü (TNF) ve interlökin-6 (IL-6) yanı sıra ağırlıklı olarak anti-inflamatuar IL-10 gösterir. CASP sonrası 12 saat içinde, olağanüstü düzeyleri, plazma, karaciğer, akciğer ve dalak tespit edilebilir. Ancak, IL-10 CASP sonra, akciğer ve dalak tespit edemez. Sham herhangi bir sitokin sekresyon (gösterilmemiştir) yol açmaz. 16G CASP, n = 5/group.

<ol>
	<li>Maier, S., Traeger, T., Entleutner, M., Westerholt, A., Kleist, B., Huser, N., Holzmann, B., Stier, A., Pfeffer, K., Heidecke, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cecal+ligation+and+puncture+versus+colon+ascendens+stent+peritonitis:+two+distinct+animal+models+for+polymicrobial+sepsis.">Cecal ligation and puncture versus colon ascendens stent peritonitis: two distinct animal models for polymicrobial sepsis.</a> Shock. 21, 505-511 (2004).</li><li>Bougaki, M., Searles, R. J., Kida, K., Yu, J. D. e., Buys, E. S., Ichinose, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOS3+protects+against+systemic+inflammation+and+myocardial+dysfunction+in+murine+polymicrobial+sepsis.">NOS3 protects against systemic inflammation and myocardial dysfunction in murine polymicrobial sepsis.</a> Shock. , (2009).</li><li>Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+sepsis:+setting+the+stage.">Animal models of sepsis: setting the stage.</a> Nat Rev Drug Discov. 4, 854-865 (2005).</li><li>Busse, M., Traeger, T., Potschke, C., Billing, A., Dummer, A., Friebe, E., Kiank, C., Grunwald, U., Jack, R. S., Schutt, C., Heidecke, C. D., Maier, S., Broker, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detrimental+role+for+CD4++T+lymphocytes+in+murine+diffuse+peritonitis+due+to+inhibition+of+local+bacterial+elimination.">Detrimental role for CD4+ T lymphocytes in murine diffuse peritonitis due to inhibition of local bacterial elimination.</a> Gut. 57, 188-195 (2008).</li><li>Daubeuf, B., Mathison, J., Spiller, S., Hugues, S., Herren, S., Ferlin, W., Kosco-Vilbois, M., Wagner, H., Kirschning, C. J., Ulevitch, R., Elson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TLR4/MD-2+monoclonal+antibody+therapy+affords+protection+in+experimental+models+of+septic+shock.">TLR4/MD-2 monoclonal antibody therapy affords protection in experimental models of septic shock.</a> J Immunol. 179, 6107-6114 (2007).</li><li>Entleutner, M., Traeger, T., Westerholt, A., Holzmann, B., Stier, A., Pfeffer, K., Maier, S., Heidecke, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+interleukin-12,+oxidative+burst,+and+iNOS+on+the+survival+of+murine+fecal+peritonitis.">Impact of interleukin-12, oxidative burst, and iNOS on the survival of murine fecal peritonitis.</a> Int J Colorectal Dis. 21, 64-70 (2006).</li><li>Kerschen, E. J., Fernandez, J. A., Cooley, B. C., Yang, X. V., Sood, R., Mosnier, L. O., Castellino, F. J., Mackman, N., Griffin, J. H., Weiler, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endotoxemia+and+sepsis+mortality+reduction+by+non-anticoagulant+activated+protein.">Endotoxemia and sepsis mortality reduction by non-anticoagulant activated protein.</a> C. J Exp Med. 204, 2439-2448 (2007).</li><li>Kiank, C., Koerner, P., Kessler, W., Traeger, T., Maier, S., Heidecke, C. D., Schuett, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seasonal+variations+in+inflammatory+responses+to+sepsis+and+stress+in+mice.">Seasonal variations in inflammatory responses to sepsis and stress in mice.</a> Crit Care Med. 35, 2352-2358 (2007).</li><li>Lustig, M. K., Bac, V. H., Pavlovic, D., Maier, S., Grundling, M., Grisk, O., Wendt, M., Heidecke, C. D., Lehmann, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colon+ascendens+stent+peritonitis--a+model+of+sepsis+adopted+to+the+rat:+physiological,+microcirculatory+and+laboratory+changes.">Colon ascendens stent peritonitis--a model of sepsis adopted to the rat: physiological, microcirculatory and laboratory changes.</a> Shock. 28, 59-64 (2007).</li><li>Traeger, T., Kessler, W., Assfalg, V., Cziupka, K., Koerner, P., Dassow, C., Breitbach, K., Mikulcak, M., Steinmetz, I., Pfeffer, K., Heidecke, C. D., Maier, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detrimental+role+of+CC+chemokine+receptor+4+in+murine+polymicrobial+sepsis.">Detrimental role of CC chemokine receptor 4 in murine polymicrobial sepsis.</a> Infect Immun. 76, 5285-5293 (2008).</li><li>Traeger, T., Kessler, W., Hilpert, A., Mikulcak, M., Entleutner, M., Koerner, P., Westerholt, A., Cziupka, K., Rooijen, N. v. a. n., Heidecke, C. D., Maier, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+depletion+of+alveolar+macrophages+in+polymicrobial+sepsis+increases+lung+injury,+bacterial+load+and+mortality+but+does+not+affect+cytokine+release.">Selective depletion of alveolar macrophages in polymicrobial sepsis increases lung injury, bacterial load and mortality but does not affect cytokine release.</a> Respiration. 77, 203-213 (2009).</li><li>Traeger, T., Mikulcak, M., Eipel, C., Abshagen, K., Diedrich, S., Heidecke, C. D., Maier, S., Vollmar, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kupffer+cell+depletion+reduces+hepatic+inflammation+and+apoptosis+but+decreases+survival+in+abdominal+sepsis.">Kupffer cell depletion reduces hepatic inflammation and apoptosis but decreases survival in abdominal sepsis.</a> Eur J Gastroenterol Hepatol. , (2010).</li><li>Weighardt, H., Kaiser-Moore, S., Schlautkotter, S., Rossmann-Bloeck, T., Schleicher, U., Bogdan, C., Holzmann, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Type+I+IFN+modulates+host+defense+and+late+hyperinflammation+in+septic+peritonitis.">Type I IFN modulates host defense and late hyperinflammation in septic peritonitis.</a> J Immunol. 177, 5623-5630 (2006).</li><li>Zantl, N., Uebe, A., Neumann, B., Wagner, H., Siewert, J. R., Holzmann, B., Heidecke, C. D., Pfeffer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+of+gamma+interferon+in+survival+of+colon+ascendens+stent+peritonitis,+a+novel+murine+model+of+abdominal+sepsis.">Essential role of gamma interferon in survival of colon ascendens stent peritonitis, a novel murine model of abdominal sepsis.</a> Infect Immun. 66, 2300-2309 (1998).</li></ol>

CASP küçük hayvanlar yapılabilir standart parametreler göre kolayca izlemek için, yüksek tekrarlanabilir, iyi olanakları dışında okumak sağlar ve klinik ayarları yakından taklit eder: CASP değerli bir sepsis modeli için öne en kriterleri karşılayan abdominal sepsis polimikrobiyal bir model. abdominal sepsis. Karşılaştırmalı bir çalışmada çekal ligasyon ve ponksiyon (CLP) ile intra-abdominal abse oluşumu bir model ortaya koymaktadır ise CASP peritonit diffüz, erken ve giderek artan sistemik bir enfeksiyon ve inflamasyon (sistemik enflamatuvar yanıt sendromu) yol açtığını gösteriyor olabilir sürekli ve küçük sistemik inflamasyon belirtileri (1). Caspi tekniği, insanlarda görülen en önemli tedavi prensibi ardışık cerrahi odak sanitasyon, peritonit klinik seyri simüle etmek için bir olasılık sunar. CASP sepsis veya peritonit çevresindeki tüm sorular için uygulanan ve bu nedenle sepsis araştırma ile ilgili tüm disiplinler için yararlıdır, örneğin immünoloji, farmakoloji, cerrahi, yoğun bakım tıp, vb sepsis CASP modeli kullanarak farklı konularla ilgili yayınların bir seçim olabilir (1-14) aşağıda verilmiştir. CASP ile başlarken, bazı uygulama tam olarak ve hızlı bir şekilde işlemi gerçekleştirmek için gerekli olduğunun bilincinde olmalıdır. Cerrahi deneyim yararlı olabilir, ancak gerekli değildir. Biz CASP doğru performans için bir parametre olarak letality tespit tavsiye ederiz. Büyük bir stent tiner daha bir daha kolaydır Bir 14G CASP ile başlamalıdır. Eğitimli bir CASP cerrah 10 dakika içinde bir fare çalıştırmak mümkün. Herhangi bir deney başlamadan önce, o dönemde yakın olduğundan emin olun. Cerrahi işlem ile biraz tecrübe kazanmış, yeteneklerinizi kontrol etmek için bir hayatta kalma kinetik yapmalıdır. 14G CASP% 100 öldürücülüğü neden olacaktır. Yeni Başlayanlar laboratuvarda deneylere başlamadan önce 14G CASP ile% 100 öldürücü oluşturmak mümkün olduğunu kanıtlamak zorunda. Ayrıca, bakteriyoloji ve sitokin ölçümleri sepsis doğrulamak için yapılmalıdır. CASP mikrocerrahi adımları başında sorun varsa, büyüteç ya da cerrahi mikroskop kullanımı yararlı olabilir. Ama prensip olarak, CASP de bu araçlar olmadan olabilir. Sağkalım oranları çoğaltılması için, aynı malzeme, özellikle stent (BD Venflon, aşağıya bakınız), alışık olduğumuz kesinlikle gereklidir. Aksi halde, sonuçları önemli farklılıklar mümkündür. Buna ek olarak, sonuçların, örneğin, cerrah, bireysellik bağlı farklılıklar var olabileceğini düşündürmektedir. Ancak, bu gibi faktörlerin etkisi küçük olmalıdır. Özetle, CASP abdominal sepsis klinik durum yakından benzeyen bir uygulanabilir, basit, tekrarlanabilir ve değerli sepsis modeli. Bu nedenle, sepsis, araştırma tüm alanlar için uygundur.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Narcotic fluid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Mix 0.5 mL Rompun with 4.0 mL Ketanest, and add 5.5 mL of saline solution (0.9%). 
For complete anesthesia, inject intraperitoneally 10 &mu;L/g body weight</td>
</tr>
<tr>
<td>Rompun (20 mg/ml Xylazine)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bayer AG 51368 Leverkusen, Germany</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ketanest (25mg/ml Esketamine)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pfizer Pharma GmbH, 10785 Berlin, Germany</td>
<td>647028001E</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BD Venflon 18GA (1,2x45mm, 80ml/min)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417</td>
<td>391457</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BD Venflon 16GA (1,7x45mm, 180ml/min)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417</td>
<td>391455</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BD Venflon 14GA (2,0x45mm, 270ml/min)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417</td>
<td>391456</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Catgut Polyester 4/0 white, non absorbable</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany</td>
<td>17218113</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Mariderm black 7/0, non absorbable</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany</td>
<td>18104900</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

colon ascendens stent peritonitis (casp) - a standardized model for polymicrobial abdominal sepsis

Sepsis, tüm dünyada yoğun bakım ünitelerinde kalıcı bir sorun olmaya devam etmektedir. Sepsis kompleks mekanizmaların anlaşılması, bu alanda yeni tedavi yaklaşımları kurulması için olmazsa olmaz bir koşuldur. Bu nedenle, hayvan modelleri yakından insan hastalığı taklit edebilen ve aynı zamanda yeteri kadar bilimsel soruları ile başa çıkmak mümkün olduğunu gereklidir. Kolon Ascendens Peritonit Stent (CASP) kemirgenlerde polimikrobiyal abdominal sepsis için oldukça iyi standardize edilmiş bir model. Bu model, küçük bir stent cerrahi, periton boşluğuna bağırsak bakterileri sürekli bir sızıntı önde gelen fareler ya da sıçanlar çıkan kolon sokulur. Prosedür, sistemik bakteriyemi, peritonit, bağırsak bakterileri tarafından organ enfeksiyonu, ve çeşitli pro-ve anti-inflamatuar sitokinlerin sistemik değil, aynı zamanda yerel sürümü ile sonuçlanır. CASP öldürücülüğü takılan stent çapı ile kontrol edilebilir. Bu modelin bir varyant, girişim (Caspi) ile sözde CASP, ikinci bir operasyon ile klinik pratikte sık prosedürlere göre septik odak kaldırmak için fırsat ortaya çıkarmaktadır. CASP abdominal sepsis klinik seyri yakından taklit kolayca öğrenilebilir ve yüksek tekrarlanabilir bir model. Çeşitli bilimsel alanlarda örneğin, immünoloji, infectiology, ya da cerrahi soru üzerine çalışmaya yol açar.

Watch this Scientific Journal Video about Colon Ascendens Stent Peritonitis CASP - a Standardized Model for Polymicrobial Abdominal Sepsis at JoVE.com

Colon Ascendens Stent Peritonitis CASP - a Standardized Model for Polymicrobial Abdominal Sepsis

Kolon Ascendens Peritonit Stent (CASP) kemirgenlerde polimikrobiyal abdominal sepsis için oldukça iyi standardize edilmiş bir model. Bu makale CASP cerrahi prosedürü açıklar. CASP model ve türevleri, sepsis konu ile ilgili çeşitli sorunlar sistematik soruşturma izin verir.

Kolon Peritonit Stent Ascendens (CASP) - polimikrobik Abdominal Sepsis için bir Standart Model

Sepsis remains a persistent problem on intensive care units all over the world. Understanding the complex mechanisms of sepsis is the precondition for ...

colon-ascendens-stent-peritonitis-casp-standardized-model-for

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Colon Ascendens Stent Peritonitis (CASP) - a Standardized Model for Polymicrobial Abdominal Sepsis

19.4K Görüntüleme.  University of Greifswald. Kolon Ascendens Peritonit Stent (CASP) kemirgenlerde polimikrobiyal abdominal sepsis için oldukça iyi standardize edilmiş bir model. Bu makale CASP cerrahi prosedürü açıklar. CASP model ve türevleri, sepsis konu ile ilgili çeşitli sorunlar sistematik soruşturma izin verir.

Video: Colon Ascendens Stent Peritonitis CASP - a Standardized Model for Polymicrobial Abdominal Sepsis

Cecal Ligation and Puncture-induced Sepsis as a Model To Study Autophagy in Mice

Experimental sepsis can be induced in mice using the cecal ligation and puncture (CLP) method, which causes polymicrobial sepsis. Here, a protocol is provided to induce sepsis of varying severity in mice using the CLP technique. Autophagy is a fundamental tissue response to stress and pathogen invasion. Two current protocols to assess autophagy in vivo in the context of experimental sepsis are also presented here. (I) Transgenic mice expressing green fluorescence protein (GFP)-LC3 fusion protein are subjected to CLP. Localized enhancement of GFP signal (puncta), as assayed either by immunohistochemical or confocal assays, can be used to detect enhanced autophagosome formation and, thus, altered activation of the autophagy pathway. (II) Enhanced autophagic vacuole (autophagosome) formation per unit tissue area (as a marker of autophagy stimulation) can be quantified using electron microscopy. The study of autophagic responses to sepsis is a critical component of understanding the mechanisms by which tissues respond to infection. Research findings in this area may ultimately contribute towards understanding the pathogenesis of sepsis, which represents a major problem in critical care medicine.

Experimental sepsis can be induced in mice using the cecal ligation and puncture (CLP) method. Current protocols to assess autophagy in vivo in the context of CLP-induced sepsis are presented here: A protocol for measuring autophagy using (GFP)-LC3 mice, and a protocol for measuring autophagosome formation by electron microscopy.

Çekal ligasyon ve Farelerde Autophagy incelemek için bir model olarak Sepsis Patamaya kaynaklı

Experimental sepsis can be induced in mice using the cecal ligation and puncture (CLP) method, which causes polymicrobial sepsis. Here, a protocol is ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

A Controlled Mouse Model for Neonatal Polymicrobial Sepsis

Neonatal sepsis remains a global burden. A preclinical model to screen effective prophylactic or therapeutic interventions is needed. Neonatal mouse polymicrobial sepsis can be induced by injecting cecal slurry intraperitoneally into day of life 7 mice and monitoring them for the following week. Presented here are the detailed steps necessary for the implementation of this neonatal sepsis model. This includes making a homogeneous cecal slurry stock, diluting it to a weight- and litter-adjusted dose, an outline of the monitoring schedule, and a definition of observed health categories used to define humane endpoints. The generation of a homogeneous cecal slurry stock from pooled donors allows for the administration into many litters over time, reducing the variation between donors, and preventing the use of potentially toxic glycerol. The monitoring strategy used allows for the anticipation of survival outcome and the identification of mice that would later progress to death, allowing for an earlier identification of the humane endpoint. Two main behavioral features are used to define the health scores, namely, the ability of the neonatal mice to right themselves when placed on their back and their level of mobility. These criteria could potentially be applied to address humane endpoints in other studies of neonatal disease in mice, as long as a pilot study is performed to confirm accuracy. In conclusion, this approach provides a standardized method to model newborn sepsis in mice, while providing resources to assess animal welfare used to define early humane endpoints for challenged animals.

This protocol provides the necessary steps to establish and evaluate neonatal sepsis in 7-day-old mice.

Yenidoğan Polymicrobial Sepsis için kontrollü fare modeli

Neonatal sepsis remains a global burden. A preclinical model to screen effective prophylactic or therapeutic interventions is needed. Neonatal mouse ...

Design of Cecal Ligation and Puncture and Intranasal Infection Dual Model of Sepsis-Induced Immunosuppression

Sepsis, a severe and complicated life-threatening infection, is characterized by an imbalance between pro- and anti-inflammatory responses in multiple organs. With the development of therapies, most patients survive the hyperinflammatory phase but progress to an immunosuppressive phase, which increases the emergence of secondary infections. Therefore, improved understanding of the pathogenesis underlying secondary hospital-acquired infections in the immunosuppressive phase during sepsis is of tremendous importance. Reported here is a model to test infectious outcomes by creating double-hit infections in mice. A standard surgical procedure is used to induce polymicrobial peritonitis by cecal ligation and puncture (CLP) and followed by intranasal infection of Staphylococcus aureus to simulate pneumonia occurring in immune suppression that is frequently seen in septic patients. This dual model can reflect the immunosuppressive state occurring in patients with protracted sepsis and susceptibility to secondary infection from nosocomial pneumonia. Hence, this model provides a simple experimental approach to investigate the pathophysiology of sepsis-induced secondary bacterial pneumonia, which may be used for discovering novel treatments for sepsis and its complications.

This protocol describes techniques to measure infectious outcomes underlying secondary hospital-acquired infections in the immunosuppressive condition, first by establishing cecal ligation/puncture mice then challenging them with intranasal infection to create a clinically relevant model of immunosuppression sepsis.

Sepsis kaynaklı bağışıklık bastırma, çekal ligasyon ve delinme ve Intranasal enfeksiyon çift model tasarımı

Sepsis, a severe and complicated life-threatening infection, is characterized by an imbalance between pro- and anti-inflammatory responses in multiple ...

Measurement of Pulse Propagation Velocity, Distensibility and Strain in an Abdominal Aortic Aneurysm Mouse Model

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is defined as a localized dilation of the abdominal aorta that exceeds the maximal intraluminal diameter (MILD) by 1.5 times of its original size. Clinical and experimental studies have shown that small aneurysms may rupture, while a subpopulation of large aneurysms may remain stable. Thus, in addition to the measurement of intraluminal diameter of the aorta, knowledge of structural traits of the vessel wall may provide important information to assess the stability of the AAA. Aortic stiffening has recently emerged as a reliable tool to determine early changes in the vascular wall. Pulse propagation velocity (PPV) along with the distensibility and radial strain are highly useful ultrasound-based methods relevant for assessing aortic stiffness. The primary purpose of this protocol is to provide a comprehensive technique for the use of ultrasound imaging system to acquire images and analyze the structural and functional properties of the aorta as determined by MILD, PPV, distensibility and radial strain.

This manuscript describes a detailed protocol for using high frequency ultrasound imaging to measure luminal diameter, pulse propagation velocity, distensibility and radial strain on a mouse model of abdominal aortic aneurysm.

Abdominal Aort Anevrizması Fare Modelinde Nabız Yayılma Hızı, Şişkinlik ve GerinimÖlçümü

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is defined as a localized dilation of the abdominal aorta that exceeds the maximal intraluminal diameter (MILD) by 1.5 ...

A Neonatal Imaging Model of Gram-Negative Bacterial Sepsis

Neonates are at an increased risk of bacterial sepsis due to the unique immune profile they display in the first months of life. We have established a protocol for studying the pathogenesis of E. coli O1:K1:H7, a serotype responsible for high mortality rates in neonates. Our method utilizes intravital imaging of neonatal pups at different time points during the progression of infection. This imaging, paralleled by measurement of bacteria in the blood, inflammatory profiling, and tissue histopathology, signifies a rigorous approach to understanding infection dynamics during sepsis. In the current report, we model two infectious inoculums for comparison of bacterial burdens and severity of disease. We find that subscapular infection leads to disseminated infection by 10 h post-infection. By 24 h, infection of luminescent E. coli was abundant in the blood, lungs, and other peripheral tissues. Expression of inflammatory cytokines in the lungs is significant at 24 h, and this is followed by cellular infiltration and evidence of tissue damage that increases with infectious dose. Intravital imaging does have some limitations. This includes a luminescent signal threshold and some complications that can arise with neonates during anesthesia. Despite some limitations, we find that our infection model offers an insight for understanding longitudinal infection dynamics during neonatal murine sepsis, that has not been thoroughly examined to date. We expect this model can also be adapted to study other critical bacterial infections during early life.

Infection of neonatal mice with bioluminescent E. coli O1:K1:H7 results in a septic infection with significant pulmonary inflammation and lung pathology. Here, we describe procedures to model and further study neonatal sepsis using longitudinal intravital imaging in parallel with enumeration of systemic bacterial burdens, inflammatory profiling, and lung histopathology.

Gram-Negatif Bakteriyel Sepsisin Yenidoğan Görüntüleme Modeli

Neonates are at an increased risk of bacterial sepsis due to the unique immune profile they display in the first months of life. We have established a ...

Isolation of Adipogenic and Fibro-Inflammatory Stromal Cell Subpopulations from Murine Intra-Abdominal Adipose Depots

The stromal-vascular fraction (SVF) of white adipose tissue (WAT) is remarkably heterogeneous and consists of numerous cell types that contribute functionally to the expansion and remodeling of WAT in adulthood. A tremendous barrier to studying the implications of this cellular heterogeneity is the inability to readily isolate functionally distinct cell subpopulations from WAT SVF for in vitro and in vivo analyses. Single-cell sequencing technology has recently identified functionally distinct fibro-inflammatory and adipogenic PDGFR&#946;+ perivascular cell subpopulations in intra-abdominal WAT depots of adult mice. Fibro-inflammatory progenitors (termed, &#8220;FIPs&#8221;) are non-adipogenic collagen producing cells that can exert a pro-inflammatory phenotype. PDGFR&#946;+ adipocyte precursor cells (APCs) are highly adipogenic both in vitro and in vivo upon cell transplantation. Here, we describe multiple methods for the isolation of these stromal cell subpopulations from murine intra-abdominal WAT depots. FIPs and APCs can be isolated by fluorescence-activated cell sorting (FACS) or by taking advantage of biotinylated antibody-based immunomagnetic bead technology. Isolated cells can be used for molecular and functional analysis. Studying the functional properties of stromal cell subpopulation in isolation will expand our current knowledge of adipose tissue remodeling under physiological or pathological conditions on the cellular level.

This protocol describes the technical approach to isolate adipogenic and fibro-inflammatory stromal cell subpopulations from murine intra-abdominal white adipose tissue (WAT) depots by fluorescence-activated cell sorting or immunomagnetic bead separation.

Murin İntraabdominal Yağ Depolarından Adipojenik ve Fibroinflamatuar Stromal Hücre Alt Popülasyonlarının İzolasyonu

The stromal-vascular fraction (SVF) of white adipose tissue (WAT) is remarkably heterogeneous and consists of numerous cell types that contribute ...

A Contemporary Warming/Restraining Device for Efficient Tail Vein Injections in a Murine Fungal Sepsis Model

In rodent models, tail vein injections are important methods for intravenous administration of experimental agents. Tail vein injections typically involve warming of the animal to promote vasodilation, which aids in both the identification of the blood vessels and positioning of the needle into the vessel lumen while securely restraining the animal. Although tail vein injections are common procedures in many protocols and are not considered highly technical if performed correctly, accurate and consistent injections are crucial to obtain reproducible results and minimize variability. Conventional methods for inducing vasodilation prior to tail vein injections generally depend on the use of a heat source such as a heat lamp, electrical/rechargeable heat pads, or pre-heated water at 37 &#176;C. Despite being readily accessible in a standard laboratory setting, these tools evidently suffer from poor/limited thermo-regulatory capacity. Similarly, although various forms of restraining devices are commercially available, they must be used carefully to avoid trauma to the animals. These limitations of the current methods create unnecessary variables in experiments or result in varying outcomes between experiments and/or laboratories.
In this article, we demonstrate an improved protocol using an innovative device that combines an independent, thermally regulated, warming device with an adjustable restraining unit into one system for efficient streamlined tail vein injection. The example we use is an intravenous model of fungal bloodstream infection that results in sepsis. The warming apparatus consists of a heat-reflective acrylic box installed with an adjustable automatic thermostat to maintain the internal temperature at a pre-set threshold. Likewise, the width and height of the cone restraining apparatus can be adjusted to safely accommodate various rodent sizes. With the advanced and versatile features of the device, the technique shown here could become a useful tool across a range of research areas involving rodent models that employ tail vein injections.

Here, we present an effective and efficient method for rodent tail vein injections using a uniquely designed warming/restraining device. By streamlining the initiation of vasodilation and restraining processes, this protocol allows accurate and timely intravenous injections of large groups of animals with minimal distress.

Murine Mantar Sepsis Modelinde Verimli Kuyruk Damarı Enjeksiyonları için Çağdaş Isınma/Kısıtlama Cihazı

In rodent models, tail vein injections are important methods for intravenous administration of experimental agents. Tail vein injections typically involve ...

Functional Assessment of Intestinal Permeability and Neutrophil Transepithelial Migration in Mice using a Standardized Intestinal Loop Model

The intestinal mucosa is lined by a single layer of epithelial cells that forms a dynamic barrier allowing paracellular transport of nutrients and water while preventing passage of luminal bacteria and exogenous substances. A breach of this layer results in increased permeability to luminal contents and recruitment of immune cells, both of which are hallmarks of pathologic states in the gut including inflammatory bowel disease (IBD). 
Mechanisms regulating epithelial barrier function and transepithelial migration (TEpM) of polymorphonuclear neutrophils (PMN) are incompletely understood due to the lack of experimental in vivo methods allowing quantitative analyses. Here, we describe a robust murine experimental model that employs an exteriorized intestinal segment of either ileum or proximal colon. The exteriorized intestinal loop (iLoop) is fully vascularized and offers physiological advantages over ex vivo chamber-based approaches commonly used to study permeability and PMN migration across epithelial cell monolayers.
We demonstrate two applications of this model in detail: (1) quantitative measurement of intestinal permeability through detection of fluorescence-labeled dextrans in serum after intraluminal injection, (2) quantitative assessment of migrated PMN across the intestinal epithelium into the gut lumen after intraluminal introduction of chemoattractants. We demonstrate feasibility of this model and provide results utilizing the iLoop in mice lacking the epithelial tight junction-associated protein JAM-A compared to controls. JAM-A has been shown to regulate epithelial barrier function as well as PMN TEpM during inflammatory responses. Our results using the iLoop confirm previous studies and highlight the importance of JAM-A in regulation of intestinal permeability and PMN TEpM in vivo during homeostasis and disease. 
The iLoop model provides a highly standardized method for reproducible in vivo studies of intestinal homeostasis and inflammation and will significantly enhance understanding of intestinal barrier function and mucosal inflammation in diseases such as IBD.

Dysregulated intestinal epithelial barrier function and immune responses are hallmarks of inflammatory bowel disease that remain poorly investigated due to a lack of physiological models. Here, we describe a mouse intestinal loop model that employs a well-vascularized and exteriorized bowel segment to study mucosal permeability and leukocyte recruitment in vivo.

Standartlaştırılmış Bağırsak Döngüsü Modeli Kullanılarak Farelerde Bağırsak Geçirgenliği ve Nötrofil Transepithelial Göçün Fonksiyonel Değerlendirmesi

The intestinal mucosa is lined by a single layer of epithelial cells that forms a dynamic barrier allowing paracellular transport of nutrients and water ...

Characterizing Salmonella Typhimurium-induced Septic Peritonitis in Mice

Sepsis is a dysregulated host immune response to microbial invasion or tissue damage, leading to organ injury at a site distant from that of the infection or damage. Currently, the widely used mice models of sepsis include lipopolysaccharide (LPS)-induced endotoxemia, cecal ligation and puncture (CLP), and monobacterial infection model systems. This protocol describes a method to study the host responses during Salmonella Typhimurium infection-induced septic peritonitis in mice. S. Typhimurium, a Gram-negative intracellular pathogen, causes typhoid-like disease in mice.
This protocol elaborates the culture preparation, induction of septic peritonitis in mice through intraperitoneal injection, and methods to study systemic host responses. Furthermore, the assessment of bacterial burden in different organs and the flow cytometric analysis of increased neutrophil numbers in the peritoneal lavage is presented. Salmonella Typhimurium-induced sepsis in mice leads to an increase in proinflammatory cytokines and rapid infiltration of neutrophils in the peritoneal cavity, leading to lower survival.
Every step in this protocol has been optimized, resulting in high reproducibility of the pathogenesis of septic peritonitis. This model is useful for studying immunological responses during bacterial sepsis, the roles of different genes in disease progression, and the effects of drugs to attenuate sepsis.

Characterizing Salmonella Typhimurium-induced Septic Peritonitis in Mice

This protocol describes the induction of Gram-negative monobacterial sepsis in a mouse model system. The model is useful in investigating the inflammatory and lethal host responses during sepsis.

Farelerde Salmonella Typhimurium ile İndüklenen Septik Peritonitin Karakterizasyonu

Sepsis is a dysregulated host immune response to microbial invasion or tissue damage, leading to organ injury at a site distant from that of the infection ...

Evaluation of a Reliable Biomarker in a Cecal Ligation and Puncture-Induced Mouse Model of Sepsis

Sepsis is a severe life-threatening and rapidly developing disease that causes millions of deaths annually worldwide. Researchers have made tremendous efforts to elucidate the pathophysiology of sepsis using various animal models; the mouse model of sepsis induced by cecal ligation and puncture (CLP) is widely used in laboratories. The three technical aspects that affect the severity and replicability of the CLP model are the percentage of cecum ligated, the size of the needle used for cecal puncture, and the volume of feces squeezed into the abdominal cavity. The rapid and specific diagnosis of sepsis is a crucial factor that affects the outcome. The gold standard for sepsis diagnosis is microbial culture; however, this process is time-consuming and sometimes inaccurate. The detection of sepsis-specific biomarkers is fast, but the existing biomarkers are unsatisfactory due to a short half-life, non-specificity, and insufficient sensitivity. Therefore, there is an urgent need for a reliable biomarker of sepsis in the early stages. Previous publications suggest that excessive neutrophil extracellular traps (NETs) occur in sepsis. Citrullinated histone H3 (CitH3), as a NET component, is elevated both in septic animals and patients, and the presence of CitH3 is a reliable diagnostic biomarker of sepsis. The present study aimed to describe a standardized mouse model of CLP-induced sepsis and establish a reliable blood biomarker of sepsis. Our work may contribute to the early and accurate diagnosis of sepsis in the future.

This protocol presents the operative details of cecal ligation and puncture (CLP) in a mouse model of sepsis. CLP is one of the most widely used techniques to create an animal model of sepsis. Therefore, a standardized CLP protocol is required for the attainment of reliable research results.

Sepsisin Çekal Ligasyonu ve Delinmeye Bağlı Fare Modelinde Güvenilir Bir Biyobelirtecin Değerlendirilmesi

Sepsis is a severe life-threatening and rapidly developing disease that causes millions of deaths annually worldwide. Researchers have made tremendous ...

Kolon Peritonit Stent Ascendens (CASP) - polimikrobik Abdominal Sepsis için bir Standart Model

PLAYLIST