This work was supported by a grant from the Jan Kornelis de Cock foundation.

1. Tümör-simüle İçermelerin için Silikon Kalıplar oluştur <ol><li> Tümör-taklit kapanım, örneğin, boncuk veya mermerleri için model olarak hizmet edebilir istenilen şekil ve boyutta sağlam öğeleri toplayın. </li><li> İyice tümör modeli temizleyin. Silikon kalıptan kolay uzaklaştırılmasını sağlamak için, tümör modelleri, yapışma önleyici sprey püskürtme veya vazelin ya da balmumu ince bir tabaka ile kaplanabilir. </li><li> Pürüzsüz bir yüzeye sahip, ayrı bir ince duvarlı kare (plastik) kutusunda her modeli yerleştirin. Eğer gerekli ise, bir pozisyonda tutmak için kutunun altına modeli fikse. Silikon aşırı miktarda israfını önlemek için tümör modelinin kendisinde biraz daha büyük bir kutu kullanın. </li><li> Bir karıştırma kabına silikon bileşen A&#39;nın Gerekli miktarda ve 10 silikon bileşen B ekleyin: ağırlıkça 1 oranına sahiptir. Hem de iyice karıştırınız. İsteğe bağlı olarak, vakum pompası silikon karışımının hava kabarcıklarını çıkarmak için kullanılabilir. </li><li> Yavaşça po, hava kabarcığı engellemek için plastik bir kutu içinde silikon karışımı ur. Silikon karışımı, en iyi sonuçları elde etmek için 45 dakika içinde işleme tabi tutulmalıdır. </li><li> Silikon karışımı, kalıp kesme ve tümör modelini çıkarmak için en az 6 saat boyunca katılaşmaya edelim. İsteğe bağlı olarak, silikon kalıp o temiz bir araya için uyum sağlayıcı bir zik ​​zak usul içinde kesilebilir. Silikon maksimum gücü 3 gün sonra elde edilir. </li></ol> 2. Tris-tamponlu tuz çözeltisi oluşturma <ol><li> 6.1 g (50 mM) ile 8.8 g Tris ve 800 mi, deiyonize su (150 mM) NaCl eklenerek, Tris-tamponlu tuzlu su (TBS) çözeltisi oluşturur. </li><li> Hemoglobin (adım 3.3 ve 4.4) oksijen bloke etmek ve bakteri çoğalmasını önlemek için NaN 3 1.0 g (15 mmol) ekleyin. DİKKAT: NaN 3 şiddetli bir zehirdir. Bu cilt ile veya yutulduğunda temas ölümcül olabilir. Bu bileşiğin toksisitesi, bir yetişkin insan için, çözülebilir bir alkali siyanür veya öldürücü dozun ile karşılaştırılabiliryaklaşık 0.7 gramdır. Üretici tarafından sağlanan her zaman olduğu gibi güvenlik yönergelerini izleyin. </li><li> 7.4 &#39;e pH ayarlamak ve deiyonize su ile 1000 ml hacim getirmek. </li></ol> 3. Floresan kapsama alınan oluştur <ol><li> Eritilmesi ve eritilmiş jelatin yerleştirildiği zaman, floresan boya akmasını önleyecek kusurları 2. adımda jelatin (adım 4.2) ile karşılaştırıldığında, agaroz daha yüksek bir erime noktası 50 mi TBS 2 g agarozun ekleyin. İsteğe bağlı olarak, ilave agaroz miktarı, sırasıyla, yumuşak veya fark edilebilir tümör inklüzyon elde edilmesi için 1 ya da 3 g kadar değiştirilebilir. </li><li> Kaynama noktası elde edilene kadar, bir mikrodalga kullanarak agaroz çamurun ısıtılması. Agaroz tamamen eriyene kadar iyice karıştırınız. </li><li> 1.1 g (17 mmol) hemoglobin ve lipid içi% 20 çevreleyen meme eşdeğer dokusundan (aşama 4) optik özelliklerini benzemeye sabit karıştırma altında agaroz karışıma 50 ml TBS içinde eritildi 5 ml ilave edilir. </li><li> (25 mg, 20.0 ekleme83.8 ml deiyonize su için indosiyanin yeşili flüoresan boya .8 mmol). Boya tamamen çözülür emin olun. </li><li> Pipetle bu çözeltiden 5.0 mi ve agaroz karışıma ekleyin 14 uM bir nihai konsantrasyon elde edilmiştir. Kendi uygun konsantrasyonu ile, arzu edildiği takdirde, ICG dışında floresan boyalar kullanılabilir. </li><li> Yavaşça bir şırınga (Şekil 1A) kullanarak sıcak agaroz karışımı ile 1. adımda oluşturduğunuz silikon kalıpları doldurun. Tüm kalıplar dolana kadar bu işlemi tekrarlayın. </li><li> Floresan inklüzyonlar yaklaşık bir saat boyunca oda sıcaklığında katılaşmaya edelim. Alüminyum folyo ile tüm kalıp kaplayarak ışıktan kapanım koruyun. </li><li> Katılaşma sonra, yavaşça kalıp açın ve dahil (Şekil 1B) dışarı basın. İsteğe bağlı olarak, dahil yüzeyinde eritilmiş agaroz karışımın küçük damla uygulamak için şırınga ucunu kullanın. Küçük tu aynı yerde bu işlemi birkaç kez tekrarlayarakmor mahmuzlarım infiltratif tümörleri taklit için oluşturulabilir. </li><li> Alüminyum folyo ile sarılarak ışık ve dehidratasyon agaroz kusurları korumak ve 4 ° C de, nemlendirilmiş bir depolama kabı saklayın. Not: bilinen bir konsantrasyonu optimum daha düşük ya da daha yüksek bir floresan boya konsantrasyonlarının kullanımı azalmış olacaktır flüoresan sinyal şiddet olarak sonuçlanmaktadır. Uygun floresan boya konsantrasyonunun üstündeki boya artan konsantrasyonlarda sinyal yoğunluğundaki azalma görünüşte beklenenin aksine söndürülmesi olarak bilinen bir fenomen kaynaklanmaktadır. Optimal konsantrasyon kullanılarak, fantom bir floresan boya maksimum derinliği nüfuz değerlendirilirken zorunludur. </li></ol> Meme Phantom 4. Oluştur <ol><li> Istenen boyut ve miktar, örneğin, cam ya da plastik çanak meme hayaletleri oluşturmak için bir kupa şekilli bir kalıp elde edilir. Kalıp kalıbına yapışmasını jelatin formu önlemek için pürüzsüz bir yüzeye sahip olmalıdır. Bir kalıp volüm500 ml e yeterli büyüklükte meme hayaletleri yaratacaktır. </li><li> 500 ml&#39;lik bir hacme sahip bir göğüs hayalet oluşturmak için, 500 ml&#39;lik TBS (aşama 2) ila jelatin 250 blum 50 g ekleyin. Sabit karıştırma altında 50 ° C&#39;ye kadar jelatin çamurun ısıtılması. </li><li> Jelatin tamamen eriyene sonra, jelatin kanşım yavaş yavaş soğumaya bırakın ve bir sıcak su banyosu kullanılarak 35 ° C&#39;lik sabit bir sıcaklıkta muhafaza. </li><li> Sürekli karıştırma altında, sırası ile, dokuda fotonun absorpsiyonuna ve saçılması simüle etmek için 5.5 g (85 mmol), sığır hemoglobin ve 25 ml% 20 lipid içi ekleyin. </li><li> En az 1 saat boyunca 4 ° C&#39;de kupa şekilli kalıp Prechill. Daha sonra, agaroz tümör taklit dahil (Şekil 1C), önceden tanımlanmış derinliğine karşılık gelen bir seviyeye kadar kalıp içinde jelatin dökün. Jelatin karışım bir saat 30 dakika boyunca 4 ° C&#39;de katılaşmaya edelim. </li><li> Sertleştikten sonra, yüzeyi üzerinde bir tümörle taklit floresan agaroz dahil konumuna<html> fantom ve geçici bir küçük iğne ile dahil sabitleşmek. Üç tümör taklit floresan dahil olanlar en fazla tek bir meme hayali olarak dahil edilebilir. Yeterli boşluk (en az 5 cm) tek tek tümör-simüle inklüzyon (Şekil 1D) arasında tutulmalıdır. </li><li> Kırılma eserler yaratmadan her iki katmana bağlanması için izin veren, kalan kalıp hacmindeki sıcak jelatin karışımın geri kalan kısmı dökün. Kalıp üzerindeki floresan tümör taklit inklüzyon işaretleyin. Fantom 4 ° C&#39;de O / N katılaşmaya edelim. </li><li> Bir kez katılaşmış, kapanım geçici sabitlenmesi için kullanılan iğneleri çıkarmak ve yavaşça kalıbın (Şekil 1E) meme hayalet çıkarın. Alüminyum folyoyla sararak ışık ve dehidratasyon meme hayalet koruyun ve 4 ° C&#39;de nemlendirilmiş bir saklama kabı içinde saklayın. </li></ol><html> ure 1 &quot;fo: İçerik-width =&quot; 5in &quot;src =&quot; / files / ftp_upload / 51776 / 51776fig1highres.jpg &quot;width =&quot; 500 &quot;/&gt; Şekil floresan tümör taklit kusurları ihtiva eden meme hayaletleri oluşturma 1. Sıralı aşamaları. Arzu edilen şekil ve boyutta silikon kalıp oluşturulduktan sonra, kalıplar bir şırınga (A) ile eritilmiş agaroz karışımı ile doldurulur. Büyüklüğü ve şekli, farklı tümör-simüle inklüzyonlar çalışmada (B) &#39;de üretildi. Daha sonra, erimiş jelatin karışım ince bir tabaka halinde özel bir kaplanmış ahşap meme kalıbın (C) dökülür. Sertleştikten sonra, tümör taklit inklüzyonlar, geçici olarak sabitlenmiş bir konuma sahip ve erimiş jelatin karışımı (D) başka bir katman ile kaplıdır. Sertleştikten sonra, meme fantom yavaşça kalıbın (D) ilave edilir. Fantom sonra taklit çeşitli NIRF görüntüleme uygulamaları (F) için uygulanabilir.ref = &quot;/ files / ftp_upload / 51776 / 51776fig1highres.jpg&quot; target = &quot;_blank&quot;&gt; Bu rakamın büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. 5. NIRF Kamera Sistemi Seti <ol><li> Intraoperatif uygulama için NIRF kamera sistemi, meme kanseri cerrahisinde hedeflenen NIRF görüntüleme simülasyonu için gereklidir. Gerçek zamanlı ameliyat NIRF görüntülemesi için birkaç NIRF görüntüleme sistemleri araştırma kullanımı için şu anda kullanılabilir. Bu cihazlar arasında bazı farklılıklar olmasına rağmen, hepsi (floresan tümör inklüzyon uyarılması için) bir uyarı ışığı kaynağı ve fotonların tespiti için çok hassas bir görüntüleme cihazı içerir. </li><li> Yeterli bir dalga boyunda bir uyarım ışık kaynağı kullandığınızdan emin olun. ICG içeren tümör taklit kapanım için, 750 ve 800 nm arasında fotonlar yayar bir uyarım ışık kaynağı (örneğin, lazer) kullanın. Alternatif bir floresan boya kullanıldığında, emisyon dalga boyu ma uygun ayarlanmalıdır<html> nufacturer talimatları. </li><li> Durumda NIRF kamera sistemi, istenmeyen arka plan sinyallerini filtrelemek doğru filtre kullanıldığından emin olmak için bir emisyon filtre içerir. ICG içeren tümör taklit kapanım için, 800 ve 850 nm arasında bir emisyon filtresi kullanın. Alternatif floresan boyalar üreticinin talimatlarına bağlı olarak, farklı emisyon filtreleri gerektirebilir. NOT: uyarma ve aşırı doygun görüntüleri önlemek için emisyon dalga boyları arasında sıfır örtüşme vardır emin olun. Ayrıca, görüntü elde etme süresi optimal floresan görüntü elde etmek için ayarlanmalıdır gerekebilir. Derin yerleşimli floresan kapanım ya da zayıf floresan sinyalleri durumunda, görüntü alma süresi min için birkaç saniye kadar artmış olabilir. Yüzeysel katkılar ya da kuvvetli floresan sinyalleri durumunda, elde etme süresi gerçek zamanlı video hızı fluoresans görüntüsü sağlamak için bir kaç milisaniye azaltılabilir. </li></ol>Meme Kanseri Cerrahisinde NIRF Görüntüleme Uygulamaları E &quot;&gt; 6. Simülasyon <ol><li> Kendi kabından doku taklit meme hayalet alın ve düz bir nonfluorescent bir yüzeye yerleştirin. Sonraki, tümör taklit kapanım çıkarılması için yeterli bir çalışma mesafe bırakarak, meme fantom yukarıdaki NIRF görüntüleme cihazı yerleştirin. </li><li> NIRF görüntüleme ve / veya fantom meme palpasyonu kullanarak tümör taklit floresan dahil yerelleştirilmesine. Hiçbir floresan sinyal tespit edilebilir durumda, içerme ya algılama veya görüntü alma süresi artırılmalıdır için fantom çok derin konumlandırılmış. </li><li> Dahil lokalize sonra, fantom meme insizyon ve konvansiyonel cerrahi aletler kullanarak gerçek zamanlı NIRF-gözetiminde tümör taklit dahil kaldırın. Alternatif olarak, dahil standart-bakım simüle etmek için görsel denetim ve meme fantom palpasyonuyla sadece rehberlik kesilebilir. </li><li> Doğrudan uzaklaştırılmasından sonrayetersiz eksizyonu belirten kalan floresan faaliyet için tümör-simüle dahil, görüntü cerrahi kavite. </li><li> Hiçbir fluoresan sinyali kalana kadar kalan aktivite flüoresan durumda, doğrudan NIRF rehberliğinde dahil kalan kısmının kesip. </li><li> Eksize fantom fragmanları Görüntü NIRF güdümlü makroskopik sınır durumu değerlendirmesini simüle etmek. Plaklar buna göre 5 mm plaklar ve görüntü - soz, 3 hayalet doku dilim. Cerrahi sınır içine ulaşan floresan sinyali pozitif cerrahi sınır varlığını gösterir. </li></ol>

<ol>
	<li>Bellon, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACR+Appropriateness+Criteria&#174;+Conservative+Surgery+and+Radiation+-+Stage+I+and+II+Breast+Carcinoma.">ACR Appropriateness Criteria&#174; Conservative Surgery and Radiation - Stage I and II Breast Carcinoma.</a> The Breast Journal. 17 (5), 448-455 (2011).</li><li>Kaufmann, M., Morrow, M., Von Minckwitz, G., Harris, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Biedenkopf+Expert+Panel+Members.+Locoregional+treatment+of+primary+breast+cancer.">The Biedenkopf Expert Panel Members. Locoregional treatment of primary breast cancer.</a> Cancer. 116, 1184-1191 (2010).</li><li>Pleijhuis, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obtaining+adequate+surgical+margins+in+breast-conserving+therapy+for+patients+with+early-stage+breast+cancer:+current+modalities+and+future+directions.">Obtaining adequate surgical margins in breast-conserving therapy for patients with early-stage breast cancer: current modalities and future directions.</a> The Annals of Surgical Oncology. 16, 2717-2730 (2009).</li><li>Singletary, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+margins+in+patients+with+early-stage+breast+cancer+treated+with+breast+conservation+therapy.">Surgical margins in patients with early-stage breast cancer treated with breast conservation therapy.</a> American Journal of Surgery. 184 (5), 383-393 (2002).</li><li>Jacobs, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+margins:+the+challenge+continues+for+breast+surgeons.">Positive margins: the challenge continues for breast surgeons.</a> Annals of Surgical Oncology. 15 (5), 1271-1272 (2008).</li><li>Krekel, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excessive+resections+in+breast-conserving+surgery+a+retrospective+multicentre+study.">Excessive resections in breast-conserving surgery a retrospective multicentre study.</a> The Breast Journal. 17 (6), 602-609 (2011).</li><li>Wood, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Close/positive+margins+after+breast-conserving+therapy:+additional+resection+or+no+resection?.">Close/positive margins after breast-conserving therapy: additional resection or no resection?.</a> Breast. 22, 115-117 (2013).</li><li>Van Dam, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoperative+tumor-specific+fluorescence+imaging+in+ovarian+cancer+by+folate+receptor-&#945;+targeting:+first+in-human+results.">Intraoperative tumor-specific fluorescence imaging in ovarian cancer by folate receptor-&#945; targeting: first in-human results.</a> Nature Medicine. 17 (10), 1315-1319 (2011).</li><li>Pleijhuis, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescence+(NIRF)+imaging+in+breast-conserving+surgery:+assessing+intraoperative+techniques+in+tissue-simulating+breast+phantoms.">Near-infrared fluorescence (NIRF) imaging in breast-conserving surgery: assessing intraoperative techniques in tissue-simulating breast phantoms.</a> European Journal of Surgical Oncology. 37 (1), 32-39 (2011).</li><li>Baeten, J., Niedre, M., Dunham, J., Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+fluorescent+materials+for+Diffuse+Fluorescence+Tomography+standards+and+phantoms.">Development of fluorescent materials for Diffuse Fluorescence Tomography standards and phantoms.</a> Optics Express. 15 (14), 8681-8694 (2007).</li><li>Luker, G. D., Luker, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+imaging:+current+applications+and+future+directions.">Optical imaging: current applications and future directions.</a> Journal of Nuclear Medicine. 49 (1), 1-4 (2007).</li><li>Keereweer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+image-guided+surgery+-+Where+do+we+stand?.">Optical image-guided surgery - Where do we stand?.</a> Molecular Imaging Biology. 13 (2), 199-207 (2011).</li><li>Themelis, G., Yoo, J. S., Soh, K. S., Shulz, R., Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+intraoperative+fluorescence+imaging+system+using+light-absorption+correction.">Real-time intraoperative fluorescence imaging system using light-absorption correction.</a> Journal of Biomedical Optics. 14 (6), 064012 (2009).</li><li>Themelis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancing+surgical+vision+by+using+real-time+imaging+of+&#945;v&#946;3-integrin+targeted+near-infrared+fluorescent+agent.">Enhancing surgical vision by using real-time imaging of &#945;v&#946;3-integrin targeted near-infrared fluorescent agent.</a> Annals of Surgical Oncology. 18 (12), 3506-3513 (2011).</li><li>De Grand, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-like+phantoms+for+near-infrared+fluorescence+imaging+system+assessment+and+the+training+of+surgeons.">Tissue-like phantoms for near-infrared fluorescence imaging system assessment and the training of surgeons.</a> Journal of Biomedical Optics. 11 (1), 014007 (2006).</li><li>Intes, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time-domain+optical+mammography+SoftScan:+initial+results.">Time-domain optical mammography SoftScan: initial results.</a> Academic Radiology. 12 (10), 934-947 (2005).</li><li>Kirsch, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spatially+and+temporally+restricted+mouse+model+of+soft+tissue+sarcoma.">A spatially and temporally restricted mouse model of soft tissue sarcoma.</a> Nature Medicine. 13 (8), 992-997 (2007).</li><li>Tafreshi, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+detection+of+breast+cancer+lymph+node+metastasis+using+carbonic+anhydrases+IX+and+XII+targeted+imaging+probes.">Noninvasive detection of breast cancer lymph node metastasis using carbonic anhydrases IX and XII targeted imaging probes.</a> Clinical Cancer Research. 18 (1), 207-219 (2012).</li><li>Nguyen, Q. T., Tsien, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence-guided+surgery+with+live+molecular+navigation+-+a+new+cutting+edge.">Fluorescence-guided surgery with live molecular navigation - a new cutting edge.</a> Nature Reviews Cancer. 13 (9), 653-662 (2013).</li><li>Orosco, R. K., Tsien, R. Y., Nguyen, Q. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+imaging+in+surgery.">Fluorescence imaging in surgery.</a> IEEE Reviews in Biomedical Engineering. 6, 178-187 (2013).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Biz entegre tümör simüle kapanımlar ile meme şeklinde fantomlarda kullanımı yoluyla NIRF-güdümlü BCS potansiyel klinik uygulamaları simüle. İntraoperatif tümör lokalizasyonu, NIRF güdümlü tümör rezeksiyon, cerrahi ölçüde değerlendirme ve cerrahi sınırların postoperatif değerlendirme tüm özel-inşa NIRF kamera sistemi kullanılarak uygun bulunmuştur. Floresan tümör taklit kapanım noninvaziv tespiti 2 cm veya daha az bir derinlikte fantom dokudaki konumlandırılmış kapanım için tek u...

Radyoterapi ardından meme koruyucu cerrahi (MKC) T 1-T 2 meme kanserli 1,2 ile meme kanseri hastaları için standart tedavi yöntemidir. Ek cerrahi müdahale veya radyoterapi 3,4,5 gerektiren, BCS uygulanan 20 hastada% 40 pozitif cerrahi sınır ameliyat sonucu ölçüde intraoperatif değerlendirmede yanlışlıklar. Komşu sağlıklı göğüs dokusu rezeksiyonu pozitif cerrahi sınır sıklığını azaltmak olsa da, bu aynı zamanda bir kozmetik sonuç engel ve komorbidite 6,7 artacak. Roman teknikleri bu nedenle primer tümörün yeri ve cerrahi ölçüde intraoperatif geribildirim sağlamak gereklidir. Optik görüntüleme, özellikle yakın kızılötesi floresan (NIRF) görüntüleme, r öncesi ve intraoperatif tümör lokalizasyonu için bir araç ile cerraha sağlayarak BCS aşağıdaki pozitif cerrahi sınır sıklığını azaltabilireal-zamanı. Son zamanlarda, bizim grup yüksek hassasiyet 8 ile primer tümör ve periton metastaz bu tekniğin uygulanabilirliğini gösteren, yumurtalık kanseri hastalarında tümör hedefli floresan görüntüleme ilk-insan yargılanıyor bildirdi. Meme kanserli hastalarda klinik çalışmalara geçmeden önce, ancak, BCS çeşitli tümör hedefli NIRF görüntüleme uygulamaları fizibilite zaten klinik öncesi hayaletleri kullanılarak değerlendirilebilir. Aşağıdaki Araştırma protokolü floresan tümör taklit kusurları 9 ihtiva eden dokuya taklit meme fantom içinde NIRF görüntüleme kullanımını tarif etmektedir. Hayaletler ve ameliyat tümör lokalizasyonu, gerçek-zamanlı NIRF güdümlü tümör rezeksiyonu, cerrahi sınır durumu değerlendirmesi, ve rezidüel hastalığın tespiti simüle etmek için ucuz ve çok yönlü bir araç sağlar. Jelatinimsi hayalet insan dokusuna benzer elastik özelliklere sahip olan ve geleneksel s kullanılarak kesilebilirurgical aletleri. Simüle cerrahi prosedür sırasında, cerrah (aşikar inklüzyon durumunda) dokunsal bilgiler ve operatif alanın görsel muayene ile yönlendirilir. Buna ek olarak, NIRF görüntüleme cerrahi ölçüde gerçek zamanlı ameliyat bir geri besleme cerrahın uygulanır. Bu NIRF görüntüleme floresan boyaların kullanımını gerektirir vurgulanmalıdır. İdeal olarak, flüoresan boyalar yakın kızılötesi tayf aralığında fotonlar yayarlar kullanılabilir (650-900 nm) dokusu içinde fizyolojik olarak bol moleküller tarafından foton emilimine ve saçılması en aza indirmek için (örneğin hemoglobin, lipidler, elastin, kolajen, ve su) 10,11. Ayrıca, otofloresan (örneğin, canlı hücrelerin biyokimyasal reaksiyonları nedeniyle dokularda intrinsik aktivitesi flüoresan) en iyi tümör-zemin oranları 11 ile sonuçlanan, yakın kızıl ötesi tayf aralığında en aza indirilir. Eşleştirilmesiyle NIRF tümör küçük kalkan için boyarted kısımları (örneğin, monoklonal antikorlar), flüoresan boyalar hedefli dağıtım ameliyat görüntüleme uygulamaları için elde edilebilir. Insan gözü yakın kızılötesi tayf aralığında ışık duyarsız olduğu için, yüksek derecede duyarlı kamera cihaz NIRF görüntüleme için gereklidir. Intraoperatif kullanım için çeşitli NIRF görüntüleme sistemleri bugüne kadar 12 geliştirilmiştir. Bu çalışmada, biz özel bir Münih Teknik Üniversitesi ile işbirliği içinde intraoperatif uygulanması için geliştirilen NIRF görüntüleme sistemi kurmak kullanılır. Sistem renkli görüntüler ve floresan görüntülerin eş zamanlı olarak satın sağlar. Fluoresans görüntüleri doğruluğunu artırmak için, bir düzeltme sistemi dokusunda ışık yoğunluğundaki varyasyonlar için uygulanmaktadır. Ayrıntılı bir açıklama Themelis ve arkadaşları tarafından sağlanır. 13

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bovine hemoglobin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, The Netherlands</td>
			<td>H2500</td>
			<td>Simulates absorption of photons in tissue&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intralipid 20%</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, The Netherlands</td>
			<td>I141</td>
			<td>Simulates scattering of photons in tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone A translucent 40 (2-components poly-addition silicone)</td>
			<td>NedForm, Geleen, The Netherlands</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Package consists of components A and B, that should be mixed one on one (A:B=10:1).&#160; Link to manufacturers page: http://tinyurl.com/ncjq7jx</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatine 250 Bloom</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, The Netherlands</td>
			<td>48724</td>
			<td>Construction of breast-shaped phantoms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Hispanagar, Burgos, Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Construction of tumor-simulating inclusions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, The Netherlands</td>
			<td>T1503&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hcl</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, The Netherlands</td>
			<td>258148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, The Netherlands</td>
			<td>S9888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH3</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>822335</td>
			<td>CAUTION: severe poison. The toxicity of this compound is comparable to that of soluble alkali cyanides and the lethal dose for an adult human is about 0.7 grams.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Examples of NIRF imaging devices for intraoperative application:</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T2 NIRF imaging platform&#160;</td>
			<td>SurgVision BV, Heerenveen, The Netherlands</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Customized NIRF imaging system used in the current study. More details available at www.surgvision.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photodynamic Eye</td>
			<td>Hamamatsu Photonics Deutschland GmbH, Herrsching am Ammersee, Germany</td>
			<td>PC6100</td>
			<td>www.iht-ltd.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLARE imaging system kit</td>
			<td>The FLARE Foundation Inc, Wayland, MA, USA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>www.theflarefoundation.org</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluobeam</td>
			<td>Fluoptics, Grenoble, France</td>
			<td>N/A</td>
			<td>www.fluoptics.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artemis handheld camera</td>
			<td>Quest Medical Imaging BV, Middenmeer, the Netherlands</td>
			<td>N/A</td>
			<td>www.quest-mi.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Examples of NIRF fluorescent dyes for intraoperative application:</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Indocyanine green</td>
			<td>ICG-PULSION,&#160; Feldkirchen, Germany</td>
			<td>PICG0025DE&#160;&#160;</td>
			<td>Clinical grade fluorescent dye for NIRF imaging used in the current study. More details available at www.pulsion.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IRDye 800CW NHS Ester</td>
			<td>LI-COR Biosciences, Lincoln, NE, USA</td>
			<td>929-70021</td>
			<td>www.licor.com</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tissue-simulating phantoms for assessing potential near-infrared fluorescence imaging applications in breast cancer surgery

Intraoperatif tümör lokalizasyonu ve meme koruyucu cerrahi (BCS) yetersiz bir sonuç cerrahi sınır durumu sonuç değerlendirilmesinde yanlışlıklar. Optik görüntüleme, özellikle yakın kızılötesi floresan (NIRF) görüntüleme, gerçek-zamanlı ve ameliyat tümör lokalizasyonu için bir araç ile cerraha sağlayarak BCS aşağıdaki pozitif cerrahi sınır sıklığını azaltabilir. Bu çalışmada, NIRF güdümlü BCS potansiyel standardizasyon ve eğitim amaçlı nedenlerle doku taklit meme hayaletleri kullanılarak değerlendirilir. Normal meme dokusunun kıyaslanabilir optik özellikleri ile meme hayalet meme koruyucu cerrahi simüle etmek için kullanılmıştır. Tümör-taklit floresan boya indosiyanin yeşil (ICG) içeren kapanımlarını önceden tanımlanmış yerlerde fantomlara dahil öncesi ve intraoperatif tümör lokalizasyonu, gerçek-zamanlı NIRF güdümlü tümör rezeksiyonu, NIRF güdümlü için görüntülendicerrahi ölçüde değerlendirme ve cerrahi sınırların postoperatif değerlendirilmesi. Özelleştirilmiş bir NIRF kamera görüntüleme amaçları için olan klinik bir prototip olarak kullanılmıştır. Tümör-taklit kapanım içeren Meme hayalet taklit ve intraoperatif tümör görüntüleme değerlendirmek için basit, ucuz ve çok yönlü aracı sunuyoruz. Jelatinimsi hayalet insan dokusuna benzer elastik özelliklere sahip olan ve geleneksel cerrahi aletler kullanılarak kesilebilir. Ayrıca, hayalet, sırasıyla, fotonların emilimi ve saçılmasını taklit insan meme dokusuna benzer üniforma optik özelliklerini oluşturmak için hemoglobin ve intralipid içerir. Epi-aydınlatma stratejileri ile derin yerleşimli tümörlerin (girişimsel olmayan) görüntüleme engellemektedir doku, yayıldıklarında zaman NIRF görüntülemenin ana dezavantajı fotonların sınırlı penetrasyon derinliği.

Bu çalışmanın sonuçları, daha önceden başka bir yerde 9 bildirilmiştir. Bizim veri NIRF görüntüleme meme kanseri hastalarında NIRF rehberliğinde meme koruyucu cerrahi simüle, doku taklit meme fantomlarda floresan tümör-simüle kalıntıları tespit uygulanabilir olduğunu göstermektedir. Bizim hayalet modeli kullanarak, uygulanabilir olması (Şekil 2) intraoperatif tümör lokalizasyonu, NIRF güdümlü tümör rezeksiyonu, cerrahi kavite kenarl...

Watch this Scientific Journal Video about Tissue-simulating Phantoms for Assessing Potential Near-infrared Fluorescence Imaging Applications in Breast Cancer Surgery at JoVE.com

Tissue-simulating Phantoms for Assessing Potential Near-infrared Fluorescence Imaging Applications in Breast Cancer Surgery

Near-infrared fluorescence (NIRF) imaging may improve therapeutic outcome of breast cancer surgery by enabling intraoperative tumor localization and evaluation of surgical margin status. Using tissue-simulating breast phantoms containing fluorescent tumor-simulating inclusions, potential clinical applications of NIRF imaging in breast cancer patients can be assessed for standardization and training purposes.

Meme Kanseri Cerrahisinde Potansiyel Yakın kızılötesi Floresans Görüntüleme Uygulamaları değerlendirilmesi için Phantom Doku-simüle

Inaccuracies in intraoperative tumor localization and evaluation of surgical margin status result in suboptimal outcome of breast-conserving surgery ...

tissue-simulating-phantoms-for-assessing-potential-near-infrared

Research

JoVE Journal

Medicine

12.0K Görüntüleme.  University Medical Center Groningen. Near-infrared fluorescence (NIRF) imaging may improve therapeutic outcome of breast cancer surgery by enabling intraoperative tumor localization and evaluation of surgical margin status. Using tissue-simulating breast phantoms containing fluorescent tumor-simulating inclusions, potential clinical applications of NIRF imaging in breast cancer patients can be assessed for standardization and training purposes. 

Video: Tissue-simulating Phantoms for Assessing Potential Near-infrared Fluorescence Imaging Applications in Breast Cancer Surgery

In vivo Near Infrared Fluorescence (NIRF) Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading to an accumulation of lipid-laden intra-luminal plaque, smooth muscle cell proliferation and progressive narrowing of the vessel lumen. The formation of such vulnerable plaques prone to rupture underlies the majority of cases of acute myocardial infarction. The complex molecular and cellular inflammatory cascade is orchestrated by the recruitment of T lymphocytes and macrophages and their paracrine effects on endothelial and smooth muscle cells.1
Molecular imaging in atherosclerosis has evolved into an important clinical and research tool that allows in vivo visualization of inflammation and other biological processes. Several recent examples demonstrate the ability to detect high-risk plaques in patients, and assess the effects of pharmacotherapeutics in atherosclerosis.4 While a number of molecular imaging approaches (in particular MRI and PET) can image biological aspects of large vessels such as the carotid arteries, scant options exist for imaging of coronary arteries.2 The advent of high-resolution optical imaging strategies, in particular near-infrared fluorescence (NIRF), coupled with activatable fluorescent probes, have enhanced sensitivity and led to the development of new intravascular strategies to improve biological imaging of human coronary atherosclerosis.
Near infrared fluorescence (NIRF) molecular imaging utilizes excitation light with a defined band width (650-900 nm) as a source of photons that, when delivered to an optical contrast agent or fluorescent probe, emits fluorescence in the NIR window that can be detected using an appropriate emission filter and a high sensitivity charge-coupled camera. As opposed to visible light, NIR light penetrates deeply into tissue, is markedly less attenuated by endogenous photon absorbers such as hemoglobin, lipid and water, and enables high target-to-background ratios due to reduced autofluorescence in the NIR window. Imaging within the NIR 'window' can substantially improve the potential for in vivo imaging.2,5
Inflammatory cysteine proteases have been well studied using activatable NIRF probes10, and play important roles in atherogenesis. Via degradation of the extracellular matrix, cysteine proteases contribute importantly to the progression and complications of atherosclerosis8. In particular, the cysteine protease, cathepsin B, is highly expressed and colocalizes with macrophages in experimental murine, rabbit, and human atheromata.3,6,7 In addition, cathepsin B activity in plaques can be sensed in vivo utilizing a previously described 1-D intravascular near-infrared fluorescence technology6, in conjunction with an injectable nanosensor agent that consists of a poly-lysine polymer backbone derivatized with multiple NIR fluorochromes (VM110/Prosense750, ex/em 750/780nm, VisEn Medical, Woburn, MA) that results in strong intramolecular quenching at baseline.10 Following targeted enzymatic cleavage by cysteine proteases such as cathepsin B (known to colocalize with plaque macrophages), the fluorochromes separate, resulting in substantial amplification of the NIRF signal. Intravascular detection of NIR fluorescence signal by the utilized novel 2D intravascular NIRF catheter now enables high-resolution, geometrically accurate in vivo detection of cathepsin B activity in inflamed plaque.
In vivo molecular imaging of atherosclerosis using catheter-based 2D NIRF imaging, as opposed to a prior 1-D spectroscopic approach,6 is a novel and promising tool that utilizes augmented protease activity in macrophage-rich plaque to detect vascular inflammation.11,12 The following research protocol describes the use of an intravascular 2-dimensional NIRF catheter to image and characterize plaque structure utilizing key aspects of plaque biology. It is a translatable platform that when integrated with existing clinical imaging technologies including angiography and intravascular ultrasound (IVUS), offers a unique and novel integrated multimodal molecular imaging technique that distinguishes inflammatory atheromata, and allows detection of intravascular NIRF signals in human-sized coronary arteries.

In vivo Near Infrared Fluorescence NIRF Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

We detail a new near-infrared fluorescence (NIRF) catheter for 2-dimensional intravascular molecular imaging of plaque biology in vivo. The NIRF catheter can visualize key biological processes such as inflammation by reporting on the presence of plaque-avid activatable and targeted NIR fluorochromes. The catheter utilizes clinical engineering and power requirements and is targeted for application in human coronary arteries. The following research study describes a multimodal imaging strategy that utilizes a novel in vivo intravascular NIRF catheter to image and quantify inflammatory plaque in proteolytically active inflamed rabbit atheromata.

İnflamatuar Plak Kızılötesi Floresans (NIRF) İntravasküler Moleküler Görüntüleme, Multimodal Yaklaşım civarında in vivo Ateroskleroz Görüntüleme

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading ...

Tıp

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell proliferation in the bone marrow cavity as well as for interaction of tumor and bone cells resulting in local bone destruction. Our aim was to develop a model of experimental bone metastasis that allows in vivo assessment of angiogenesis in skeletal lesions using non-invasive imaging techniques.
For this purpose, we injected 105 MDA-MB-231 human breast cancer cells into the superficial epigastric artery, which precludes the growth of metastases in body areas other than the respective hind leg1. Following 25-30 days after tumor cell inoculation, site-specific bone metastases develop, restricted to the distal femur, proximal tibia and proximal fibula1. Morphological and functional aspects of angiogenesis can be investigated longitudinally in bone metastases using magnetic resonance imaging (MRI), volumetric computed tomography (VCT) and ultrasound (US).
MRI displays morphologic information on the soft tissue part of bone metastases that is initially confined to the bone marrow cavity and subsequently exceeds cortical bone while progressing. Using dynamic contrast-enhanced MRI (DCE-MRI) functional data including regional blood volume, perfusion and vessel permeability can be obtained and quantified2-4. Bone destruction is captured in high resolution using morphological VCT imaging. Complementary to MRI findings, osteolytic lesions can be located adjacent to sites of intramedullary tumor growth. After contrast agent application, VCT angiography reveals the macrovessel architecture in bone metastases in high resolution, and DCE-VCT enables insight in the microcirculation of these lesions5,6. US is applicable to assess morphological and functional features from skeletal lesions due to local osteolysis of cortical bone. Using B-mode and Doppler techniques, structure and perfusion of the soft tissue metastases can be evaluated, respectively. DCE-US allows for real-time imaging of vascularization in bone metastases after injection of microbubbles7.
In conclusion, in a model of site-specific breast cancer bone metastases multi-modal imaging techniques including MRI, VCT and US offer complementary information on morphology and functional parameters of angiogenesis in these skeletal lesions.

In the pathogenesis of bone metastasis, angiogenesis is a crucial process and therefore represents a target for imaging and therapy. Here, we present a rat model of site-specific breast cancer bone metastasis and describe strategies to non-invasively image angiogenesis in vivo using magnetic resonance imaging, volumetric computed tomography and ultrasound.

Manyetik Rezonans Görüntüleme, Volumetrik Bilgisayarlı Tomografi ve Ultrason Kullanımı Meme Kanseri Kemik metastazı bir Nude Rat Model Angiogenezis Multi-modal Görüntüleme

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

Profiling of Estrogen-regulated MicroRNAs in Breast Cancer Cells

Estrogen plays vital roles in mammary gland development and breast cancer progression. It mediates its function by binding to and activating the estrogen receptors (ERs), ER&#945;, and ER&#946;. ER&#945; is frequently upregulated in breast cancer and drives the proliferation of breast cancer cells. The ERs function as transcription factors and regulate gene expression. Whereas ER&#945;&#39;s regulation of protein-coding genes is well established, its regulation of noncoding microRNA (miRNA) is less explored. miRNAs play a major role in the post-transcriptional regulation of genes, inhibiting their translation or degrading their mRNA. miRNAs can function as oncogenes or tumor suppressors&#160;and are also promising biomarkers. Among the miRNA assays available, microarray and quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) have been extensively used to detect and quantify miRNA levels. To identify miRNAs regulated by estrogen signaling in breast cancer, their expression in ER&#945;-positive breast cancer cell lines were compared before and after estrogen-activation using both the &#181;Paraflo-microfluidic microarrays and Dual Labeled Probes-low density arrays. Results were validated using specific qPCR assays, applying both Cyanine dye-based and Dual Labeled Probes-based chemistry. Furthermore, a time-point assay was used to identify regulations over time. Advantages of the miRNA assay approach used in this study is that it enables a fast screening of mature miRNA regulations in numerous samples, even with limited sample amounts. The layout, including the specific conditions for cell culture and estrogen treatment, biological and technical replicates, and large-scale screening followed by in-depth confirmations using separate techniques, ensures a robust detection of miRNA regulations,&#160;and eliminates false positives and other artifacts. However, mutated or unknown miRNAs, or regulations at the primary and precursor transcript level, will not be detected. The method presented here represents a thorough investigation of estrogen-mediated miRNA regulation.

Molecular signaling through both estrogen and microRNAs are critical in breast cancer development and growth. Estrogen activates the estrogen receptors, which are transcription factors. Many transcription factors can regulate the expression of microRNAs, and estrogen-regulated microRNAs can be profiled using different large-scale techniques.

Meme Kanseri Hücrelerinde östrojen düzenlenmiş microRNA profil

Estrogen plays vital roles in mammary gland development and breast cancer progression. It mediates its function by binding to and activating the estrogen ...

Voluntary Breath-hold Technique for Reducing Heart Dose in Left Breast Radiotherapy

Breath-holding techniques reduce the amount of radiation received by cardiac structures during tangential-field left breast radiotherapy. With these techniques, patients hold their breath while radiotherapy is delivered, pushing the heart down and away from the radiotherapy field. Despite clear dosimetric benefits, these techniques are not yet in widespread use. One reason for this is that commercially available solutions require specialist equipment, necessitating not only significant capital investment, but often also incurring ongoing costs such as a need for daily disposable mouthpieces. The voluntary breath-hold technique described here does not require any additional specialist equipment. All breath-holding techniques require a surrogate to monitor breath-hold consistency and whether breath-hold is maintained. Voluntary breath-hold uses the distance moved by the anterior and lateral reference marks (tattoos) away from the treatment room lasers in breath-hold to monitor consistency at CT-planning and treatment setup. Light fields are then used to monitor breath-hold consistency prior to and during radiotherapy delivery.

The current priority in breast cancer radiotherapy is to reduce cardiac doses without compromising target tissue coverage. The voluntary breath-hold technique described here is a simple, inexpensive solution to this problem and capable of being instituted widely without the need for specialized equipment.

Sol Meme Radyoterapi Kalp Doz azaltılması için gönüllü Nefes tutma Tekniği

Breath-holding techniques reduce the amount of radiation received by cardiac structures during tangential-field left breast radiotherapy. With these ...

In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

High-grade serous ovarian cancer (HGSC), the cause of widespread peritoneal metastases, continues to have an extremely poor prognosis; fewer than 30% of women are alive 5 years after diagnosis. The omentum is a preferred site of HGSC metastasis formation. Despite the clinical importance of this microenvironment, the contribution of omental adipose tissue to ovarian cancer progression remains understudied. Omental adipose is unusual in that it contains structures known as milky spots, which are comprised of B, T, and NK cells, macrophages, and progenitor cells surrounding dense nests of vasculature. Milky spots play a key role in the physiologic functions of the omentum, which are required for peritoneal homeostasis. We have shown that milky spots also promote ovarian cancer metastatic colonization of peritoneal adipose, a key step in the development of peritoneal metastases. Here we describe the approaches we developed to evaluate and quantify milky spots in peritoneal adipose and study their functional contribution to ovarian cancer cell metastatic colonization of omental tissues both in vivo and ex vivo. These approaches are generalizable to additional mouse models and cell lines, thus enabling the study of ovarian cancer metastasis formation from initial localization of cells to milky spot structures to the development of widespread peritoneal metastases.

In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

We outline a protocol that implements both in vivo and ex vivo approaches to study ovarian cancer colonization of peritoneal adipose tissues, particularly the omentum. Furthermore, we present a protocol to quantitate and analyze immune cell-structures in the omentum known as milky spots, which promote metastases of peritoneal adipose.

Vivo ve Ex Vivo Periton yağ içinde Samanyolu Nokta Yapıların Yumurtalık Kanseri Metastatik Kolonizasyon Eğitim Yaklaşımlar içinde

High-grade serous ovarian cancer (HGSC), the cause of widespread peritoneal metastases, continues to have an extremely poor prognosis; fewer than 30% of ...

Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior

Breast cancer preferentially metastasizes to the lymph node, bone, lung, brain and liver in breast cancer patients. Previous research efforts have focused on identifying factors inherent to breast cancer cells that are responsible for this observed metastatic pattern (termed organ tropism), however much less is known about factors present within specific organs that contribute to this process. This is in part because of a lack of in vitro model systems that accurately recapitulate the organ microenvironment. To address this, an ex vivo model system has been established that allows for the study of soluble factors present within different organ microenvironments. This model consists of generating conditioned media from organs (lymph node, bone, lung, and brain) isolated from normal athymic nude mice. The model system has been validated by demonstrating that different breast cancer cell lines display cell-line specific and organ-specific malignant behavior in response to organ-conditioned media that corresponds to their in vivo metastatic potential. This model system can be used to identify and evaluate specific organ-derived soluble factors that may play a role in the metastatic behavior of breast and other types of cancer cells, including influences on growth, migration, stem-like behavior, and gene expression, as well as the identification of potential new therapeutic targets for cancer. This is the first ex vivo model system that can be used to study organ-specific metastatic behavior in detail and evaluate the role of specific organ-derived soluble factors in driving the process of cancer metastasis.

This manuscript describes an ex vivo model system comprised of organ-conditioned media derived from the lymph node, bone, lung, and brain of mice. This model system can be used to identify and study organ-derived soluble factors and their effects on the organ tropism and metastatic behavior of cancer cells.

Meme Kanseri Metastatik Davran Organ spesifik Etkiler incelenmesi için Organ klimalı Medya ve Uygulamaları Üretimi

Breast cancer preferentially metastasizes to the lymph node, bone, lung, brain and liver in breast cancer patients. Previous research efforts have focused ...

Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli

Direct thrombus imaging visualizes the root cause of thromboembolic infarction. Being able to image thrombus directly allows far better investigation of stroke than relying on indirect measurements, and will be a potent and robust vascular research tool. We use an optical imaging approach that labels thrombi with a molecular imaging thrombus marker&#160;&#8212; a Cy5.5 near-infrared fluorescent (NIRF) probe that is covalently linked to the fibrin strands of the thrombus by the fibrin-crosslinking enzymatic action of activated coagulation factor XIIIa during the process of clot maturation. A micro-computed tomography (microCT)-based approach uses thrombus-seeking gold nanoparticles (AuNPs) functionalized to target the major component of the clot: fibrin. This paper describes a detailed protocol for the combined in vivo microCT and ex vivo NIRF imaging of thromboemboli in a mouse model of embolic stroke. We show that in vivo microCT and fibrin-targeted glycol-chitosan AuNPs (fib-GC-AuNPs) can be used for visualizing both in situ thrombi and cerebral embolic thrombi. We also describe the use of in vivo microCT-based direct thrombus imaging to serially monitor the therapeutic effects of tissue plasminogen activator-mediated thrombolysis. After the last imaging session, we demonstrate by ex vivo NIRF imaging the extent and the distribution of residual thromboemboli in the brain. Finally, we describe quantitative image analyses of microCT and NIRF imaging data. The combined technique of direct thrombus imaging allows two independent methods of thrombus visualization to be compared: the area of thrombus-related fluorescent signal on ex vivo NIRF imaging vs. the volume of hyperdense microCT thrombi in vivo.

This protocol describes the application of combined near-infrared fluorescent (NIRF) imaging and micro-computed tomography (microCT) for visualizing cerebral thromboemboli. This technique allows the quantification of thrombus burden and evolution. The NIRF imaging technique visualizes fluorescently labeled thrombus in excised brain, while the microCT technique visualizes thrombus inside living animals using gold-nanoparticles.

Doğrudan Serebral emboli görselleştirme için Kombine Yakın kızılötesi Floresan Görüntüleme ve Mikro bilgisayarlı Tomografi

Direct thrombus imaging visualizes the root cause of thromboembolic infarction. Being able to image thrombus directly allows far better investigation of ...

Studying the Role of Alveolar Macrophages in Breast Cancer Metastasis

This paper describes the application of the syngeneic model of breast cancer (4T1) to the studies on a role of pulmonary alveolar macrophages in cancer metastasis. The 4T1 cells expressing GFP in combination with imaging and confocal microscopy are used to monitor tumor growth, track metastasizing tumor cells, and quantify the metastatic burden. These approaches are supplemented by digital histopathology that allows the automated and unbiased quantification of metastases. In this method the routinely prepared histological lung sections, which are stained with hematoxylin and eosin, are scanned and converted to the digital slides that are then analyzed by the self-trained pattern recognition software. In addition, we describe the flow cytometry approaches with the use of multiple cell surface markers to identify alveolar macrophages in the lungs. To determine impact of alveolar macrophages on metastases and antitumor immunity these cells are depleted with the clodronate-containing liposomes administrated intranasally to tumor-bearing mice. This approach leads to the specific and efficient depletion of this cell population as confirmed by flow cytometry. Tumor volumes and lung metastases are evaluated in mice depleted of alveolar macrophages, to determine the role of these cells in the metastatic progression of breast cancer.

Here we describe the model and approach to study functions of pulmonary alveolar macrophages in cancer metastasis. To demonstrate the role of these cells in metastasis, the syngeneic (4T1) model of breast cancer in conjunction with the depletion of alveolar macrophage with clodronate liposomes was used.

Meme Kanseri Metastaz alveoler makrofajlar Rolü incelenmesi

This paper describes the application of the syngeneic model of breast cancer (4T1) to the studies on a role of pulmonary alveolar macrophages in cancer ...

A Quantitative Sensory Testing Paradigm to Obtain Measures of Pain Processing in Patients Undergoing Breast Cancer Surgery

Chronic pain following surgery, persistent postsurgical pain, is an important highly prevalent condition contributing to significant symptom burden and lower quality of life. Persistent postsurgical pain is relatively refractory to treatment hence generating a high need for preventive strategies and treatments. Therefore, the identification of patients at risk of developing persistent pain is an area of active ongoing research. Recently it was demonstrated that peri-operative disruptions in central pain processing may be able to predict persistent postsurgical pain at long term follow-up in breast cancer patients. The aim of the current report is to present a short protocol to obtain pain thresholds to different stimuli at multiple sites and a measure of endogenous analgesia in breast cancer patients. We have used this method successfully in a clinical context and detail some representative results from a clinical study.

Persistent postsurgical pain may be related to changes in pain processing. By assessing pain in response to standardized stimuli, changes in pain processing can be elucidated. We present methods to obtain pain thresholds to different stimuli and a measure of endogenous analgesia in patients undergoing breast cancer surgery.

Ağrı meme kanseri cerrahisi uygulanan hastalarda işleme tedbirlerinin elde etmek için bir nicel duyusal test paradigma

Chronic pain following surgery, persistent postsurgical pain, is an important highly prevalent condition contributing to significant symptom burden and ...

Skeletal Muscle Neurovascular Coupling, Oxidative Capacity, and Microvascular Function with 'One Stop Shop' Near-infrared Spectroscopy

Exercise represents a major hemodynamic stress that demands a highly coordinated neurovascular response in order to match oxygen delivery to metabolic demand. Reactive hyperemia (in response to a brief period of tissue ischemia) is an independent predictor of cardiovascular events and provides important insight into vascular health and vasodilatory capacity. Skeletal muscle oxidative capacity is equally important in health and disease, as it determines the energy supply for myocellular processes. Here, we describe a simple, non-invasive approach using near-infrared spectroscopy to assess each of these major clinical endpoints (reactive hyperemia, neurovascular coupling, and muscle oxidative capacity) during a single clinic or laboratory visit. Unlike Doppler ultrasound, magnetic resonance images/spectroscopy, or invasive catheter-based flow measurements or muscle biopsies, our approach is less operator-dependent, low-cost, and completely non-invasive. Representative data from our lab taken together with summary data from previously published literature illustrate the utility of each of these end-points. Once this technique is mastered, application to clinical populations will provide important mechanistic insight into exercise intolerance and cardiovascular dysfunction.

Skeletal Muscle Neurovascular Coupling, Oxidative Capacity, and Microvascular Function with &#039;One Stop Shop&#039; Near-infrared Spectroscopy

Here, we describe a simple, non-invasive approach using near-infrared spectroscopy to assess reactive hyperemia, neurovascular coupling and skeletal muscle oxidative capacity in a single clinic or laboratory visit.

Kas iskelet nörovasküler kaplin, oksidatif kapasite ve mikrovasküler işlevi 'One Stop Shop' yakın kızılötesi spektroskopi ile

Exercise represents a major hemodynamic stress that demands a highly coordinated neurovascular response in order to match oxygen delivery to metabolic ...