We thank Caroline Bouchard from the animal facility for the rat work. A.S. holds a J.A. De S&#232;ve master fellowship, and B.P. a COPSE fellowship from the Universit&#233; de Montr&#233;al This work was funded by grants attributed to J.B. from FRQS-Pfizer and start-up funds from H&#244;pital du Sacr&#233;-Coeur de Montr&#233;al Research Center.

Etik bildirimi: Bu proje için hayvan protokolü Hayvan Bakımı Kanada Konseyi kurallarına uygun Hôpital du Sacre-Coeur de Montréal Hayvan Bakım Komitesi onay aldı. Stereotaksik Cerrahi öncesi 1. Kateter Hazırlık <ol><li> Ozmotik pompalar ile birlikte kanül bağlamak için kullanılacak PE50 kateter (6 cm uzunluğunda) kesme (Şekil 1A bakınız). yapay serebrospinal akışkan (CSF) sahip PE50 kateterler doldurun ve kateter her iki ucu sızdırmaz. kullanılana kadar 4 ° C &#39;de kateter tutun. </li></ol> STEREOTAKSİ tarafından 2. Kanül İmplantasyonu <ol><li> steril şartlarda ameliyat. otoklav tüm cerrahi aletler ve malzemeler sterilize edin. stereotaksik aparatı ve iyice çalışma alanı temizleyin ve bir% 70 etanol çözeltisi ile dezenfekte. Bir cerrahi maske, saç kaputu ve steril eldiven giyin.</li><li> periton boşluğu içine (ip) ketamin ve ksilazin (100 mg / kg ve 10 mg / kg, sırası ile) enjekte edilerek sıçan anestezisi. nazik bir ayak tutam sonra hareketi kontrol ederek anestezi onaylayın. </li><li> en az 30 dakika önce cerrahi deri altından (sc) anestezi uygulandı-hayvana, bir steroid olmayan anti-enflamatuvar bir ilaç (1 mg / kg kadar meloksikam) enjekte edilir. </li><li> makası kullanarak hayvanın kafasını Tıraş ve bir klorheksidin glukonat solüsyonu% 2 ve izopropil alkol% 2 ile üç kez cildi dezenfekte edin. anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için gözleri veteriner oftalmik merhem sürün. </li><li> kulak çubukları ile bir stereotaksik çerçeve üzerinde hayvan yerleştirin. stereotaksik çerçeve sahibi koluna bir kanül düzeltmek. Enjekte (sc) başın üstünde bir lokal anestezik madde (bupivakain (1.5 mg / kg) ve lidokain (1.5 mg / kg). Anestezi% 3 izofluran teslim burun konisi koyarak bütün prosedür sırasında korur. Bütününü cerrahi alan olmalıdırkapalı dökümlü, ama daha iyi tekniği göstermek için burada yapılmadı. </li><li> Bir neşter ile başın üstünde 3 cm bir kesi yapmak. açık kafatası bırakmak kesi yaklaşık 4 kelepçelerini takın. Yuvarlak uçlu makas kullanılarak, hayvanın kürek kemikleri arasında derinin altına bir cep (2 x 2 cm 2) yapmak. </li><li> Bir bıçak ile kafatası periosta kazıyın. Kanama varsa kafatası üzerinde bir gazlı bez uygulayın. </li><li> kafatası, düz ve iyi stereotaksik çerçeve üzerinde hizalanmış olduğundan emin olun. kafatası düz olduğundan emin olmak için, yükseklik bregma ve lambda koordinatları kontrol edin. referans noktası olarak kullanılacak bregma koordinatlarını alır. </li><li> Hipokampus bilateral implante edilecek iki kılavuz kanül koordinatlarını hesaplamak, bregma başlayarak (ön-arka: - 0.42 cm; mediyolateral: 0.30 cm ±; dorsoventral: - 0.28 cm Paxinos ve Watson sıçan beyin atlası göre) 29 . belirtmekBir işaretleyici ile kanülün konumu. </li><li> Her iki kanül implantasyon noktasında kafatasında bir delik (0,5 mm) delin. yaklaşık 5 mm üzerinde ve bu puanın altına Matkap diğer iki delik diş çimento uygularken kanül pekiştireceğiz vidaları yerleştirin. </li><li> Daha önce bir neşter ile aCSF ile dolu kateterin bir ucunu kesin ve kanül açısı kolunda takın. diş çimento ile ilk kanül sabitleyin. İkinci kanül pozisyon etrafında diş çimento koyarak kaçının. </li><li> 2 diş çimento kurumaya bırakın - 3 dakika, daha sonra ilk kanül tutucu kolunu kaldırmak ve bunun ikinci kanül düzeltin. Tekrarlayın 2.11 ve 2.12 adımları. Her iki kılavuz kanül üzerinde kukla kanül koyun. kukla ve kılavuz kanül doku infiltrasyonu ve kanül engelleme önlemek için aynı uzunlukta olduğundan emin olun. </li><li> Daha önce hayvanın kürek kemikleri arasında yapılan cebinde her iki kateter serbest ucunu takın. kelepçeleri çıkartın ve cilde dikişdikiş ipliği 4-0. NOT: Üst kılavuz kanül yaklaşan Aβo infüzyon için erişilebilir olması gerekir. </li><li> stereotaksik çerçeve hayvan çıkarın ve kafesine geri koyun. Hayvan uyanır kadar ameliyat sonrası iyileşme döneminde, bir ısıtma suyu battaniye kafes yerleştirin. Gerekirse sıçan ısıdan uzak hareket böylece kafes yastığı kısmen olmalıdır. sternal yatma korumak için yeterli bilinç kavuşur kadar sürekli hayvan izleyin. </li><li> yakın izlemedeki 10 gün boyunca ameliyat kurtarmak için hayvan tesisine sıçan dönün. NOT: Tamamen iyileşene kadar diğer hayvanların şirkete ameliyat geçirmiş bir hayvan iade etmeyin. Meloksikam (1 mg / kg) ağrı tedavisinde cerrahi sonraki iki gün günde bir kez verilir. </li></ol> 3. Osmotik Pompa Montaj <ol><li> ve kontrol IgG1, bir gün montajdan önce, 6E10 antikoru (100 ul 1 mg / ml) ile ozmotik pompalar dolguantikoru (1 mg / ml; 100 ul) steril koşullar altında üreticinin talimatlarına göre yöntem. pompaları etkinleştirmeye gece boyunca 37 ° C&#39;de steril damıtılmış su içinde pompalar tutun. </li><li> ozmotik pompalar (7 gün boyunca 0.5 ul / saat) yüklemek için izofluran% 3 ile sıçan anestezisi. kürek kemikleri arasında Tıraş ve bir klorheksidin glukonat solüsyonu% 2 ve izopropil alkol% 2 ile cildi dezenfekte edin. kılavuz kanül bağlı PE50 kateterler bulmak için kürek kemikleri arasında bir neşter ile 2 cm bir kesi yapmak. </li><li> Bir neşter ile diş çimento içeren PE50 kateter ucunu kesin. PE50 kateteri ozmotik pompalar bağlayın ve bağlantıyı sabitlemek için pompa ve kateter kavşakta bazı diş çimento ekleyin. </li><li> Bir dikiş ipliği 4-0 sıkıca cilde dikiş. ısıtma suyu yastığı kafeste hayvan geri koyun. Bir izofluran anestezisi (yaklaşık 5 dakika) hızla hayvan uyanmak gözlemleyin. NOT: Ameliyat beğenme alırximately 5 ile 10 dakika. </li></ol> 4. Aβo Uyanık olarak İnfüzyonları ve Serbestçe Hareketli Sıçanlar <ol><li> Daha önce rapor edildiği gibi Aβo çözeltisi (0.2 ug / ul) hazırlayın. 28,30 Aβo enfüzyon önce oda sıcaklığında 1 st için dinamik ve kendiliğinden agrega izin verin. </li><li> bir infüzyon pompası iki 10 ul şırınga takın. Steril damıtık su 5 ul şırınga doldurun. Bir neşter ile uzunluğu yaklaşık 60 cm iki PE50 kateterleri kesin. 1 ml&#39;lik şırınga ve 21G iğneler kullanılarak steril distile su ile her iki kateterler doldurun. </li><li> Kateterin bir ucunda 1 ml şırınga ve Devam Et Hamilton şırınga diğer ucunu. 1 ml&#39;lik şırınga çıkarın ve kateter içinde herhangi bir hava kabarcığı olup olmadığını kontrol edin. </li><li> PE50 kateter sonunda iç kanül yerleştirin. Hamilton şırınga ul arasında 1&#39;e kadar steril distile su kullanılarak PE50 kateter bağlı iç kanül doldurun. p tarafından bir hava kabarcığı olun2 ul kadar pistonları geri ulling. </li><li> yukarı pipetleme ve bağlılık en az bir ucu kullanarak aşağı Aβo çözüm karıştırın. Karıştırma sırasında kabarcıklar oluşturan kaçının. 3.5 ul kadar pistonlar geri çekerek Aβo çözeltisi 1.5 ul hem iç kanül doldurun. </li><li> önce ve her iki kateter yapılan hava kabarcığı sonra işaretleyici ile çizgiler yapmak. Bu devam eden bir infüzyon bir kontrol noktası olarak hizmet vermektedir. infüzyon için, infüzyon pompası yakın kafesi getirmek ve kapağı çıkarın. </li><li> Bir sokulmayla sıçan yerleştirin ve sıkıca sıçan başını hareketsiz olan boynuna sokulmayla kolunu kazıyın. iki kılavuz kanül gelen kukla kanül çıkarın. Daha önce kılavuz kanül hazırlanan iç kanül yerleştirin. tam yerleştiğinden ve kılavuz kanül tabanına iyi sabit olduğundan emin olun. </li><li> sokulmayla gelen sıçan bırakın ve çekişme stres sınırlamak için kendi kafesine geri koyun. kateterler toget bükmeden sağlamak için yakından takipOnu ve infüzyon düzgün yapılır. </li><li> infüzyon pompası açın. 0.1 ul / dk (10 dk) bir hızda Aβo çözeltisi 1 ul enjekte edilir. infüzyon sırasında, 2.5 ul 3.5 ul şırınga pistonu hareket olduğunu kontrol edin ve her iki PE50 kateter hava kabarcığı sürekli hareket ettiğini. </li><li> Aβo çözeltisinin etkili bir difüzyon izin vermek için infüzyon sonra başka bir 5 dakika için yerinde iç kanül bırakın. enjekte çözüm reflü önlemek için, iç kanül ve şapkalı kılavuz kanül kaldırmak için geri sokulmayla sıçan getirin. sadece kanül açısı kolu önce durdurmak kukla kanül kullanın. kafesine hayvan dönün. </li><li> 6 ardışık gün boyunca günde bir kez Aβo infüzyon tekrarlayın. boyunları vurularak hayvan Euthanize. </li></ol>

<ol>
	<li>Hardy, J. A., Higgins, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alzheimer's+disease:+the+amyloid+cascade+hypothesis.">Alzheimer's disease: the amyloid cascade hypothesis.</a> Science. 256, 184-185 (1992).</li><li>Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+comprehensive+theory+for+Alzheimer's+disease.+Hypothesis:+Alzheimer's+disease+is+caused+by+the+cerebral+accumulation+and+cytotoxicity+of+amyloid+beta-protein.">Toward a comprehensive theory for Alzheimer's disease. Hypothesis: Alzheimer's disease is caused by the cerebral accumulation and cytotoxicity of amyloid beta-protein.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 924, 17-25 (2000).</li><li>Terry, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+basis+of+cognitive+alterations+in+Alzheimer's+disease:+synapse+loss+is+the+major+correlate+of+cognitive+impairment.">Physical basis of cognitive alterations in Alzheimer's disease: synapse loss is the major correlate of cognitive impairment.</a> Ann. Neurol. 30, 572-580 (1991).</li><li>Giannakopoulos, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tangle+and+neuron+numbers,+but+not+amyloid+load,+predict+cognitive+status+in+Alzheimer's+disease.">Tangle and neuron numbers, but not amyloid load, predict cognitive status in Alzheimer's disease.</a> Neurology. 60, 1495-1500 (2003).</li><li>Price, J. L., Morris, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tangles+and+plaques+in+nondemented+aging+and+"preclinical"+Alzheimer's+disease.">Tangles and plaques in nondemented aging and "preclinical" Alzheimer's disease.</a> Ann. Neurol. 45, 358-368 (1999).</li><li>Reiman, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrillar+amyloid-beta+burden+in+cognitively+normal+people+at+3+levels+of+genetic+risk+for+Alzheimer's+disease.">Fibrillar amyloid-beta burden in cognitively normal people at 3 levels of genetic risk for Alzheimer's disease.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 6820-6825 (2009).</li><li>Aizenstein, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frequent+amyloid+deposition+without+significant+cognitive+impairment+among+the+elderly.">Frequent amyloid deposition without significant cognitive impairment among the elderly.</a> Arch. Neurol. 65, 1509-1517 (2008).</li><li>Mc Donald, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+presence+of+sodium+dodecyl+sulphate-stable+Abeta+dimers+is+strongly+associated+with+Alzheimer-type+dementia.">The presence of sodium dodecyl sulphate-stable Abeta dimers is strongly associated with Alzheimer-type dementia.</a> Brain. 133, 1328-1341 (2010).</li><li>Tomic, J. L., Pensalfini, A., Head, E., Glabe, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+fibrillar+oligomer+levels+are+elevated+in+Alzheimer's+disease+brain+and+correlate+with+cognitive+dysfunction.">Soluble fibrillar oligomer levels are elevated in Alzheimer's disease brain and correlate with cognitive dysfunction.</a> Neurobiol. Dis. 35, 352-358 (2009).</li><li>Naslund, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+elevated+levels+of+amyloid+beta-peptide+in+the+brain+and+cognitive+decline.">Correlation between elevated levels of amyloid beta-peptide in the brain and cognitive decline.</a> JAMA. 283, 1571-1577 (2000).</li><li>Hardy, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+double+trouble.">Amyloid double trouble.</a> Nat. Genet. 38, 11-12 (2006).</li><li>Hardy, J., Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+amyloid+hypothesis+of+Alzheimer's+disease:+progress+and+problems+on+the+road+to+therapeutics.">The amyloid hypothesis of Alzheimer's disease: progress and problems on the road to therapeutics.</a> Science. 297, 353-356 (2002).</li><li>Haass, C., Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+protein+oligomers+in+neurodegeneration:+lessons+from+the+Alzheimer's+amyloid+beta-peptide.">Soluble protein oligomers in neurodegeneration: lessons from the Alzheimer's amyloid beta-peptide.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 8, 101-112 (2007).</li><li>McLean, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+pool+of+Abeta+amyloid+as+a+determinant+of+severity+of+neurodegeneration+in+Alzheimer's+disease.">Soluble pool of Abeta amyloid as a determinant of severity of neurodegeneration in Alzheimer's disease.</a> Ann. Neurol. 46, 860-866 (1999).</li><li>Hepler, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solution+state+characterization+of+amyloid+beta-derived+diffusible+ligands.">Solution state characterization of amyloid beta-derived diffusible ligands.</a> Biochemistry. 45, 15157-15167 (2006).</li><li>Martins, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipids+revert+inert+Abeta+amyloid+fibrils+to+neurotoxic+protofibrils+that+affect+learning+in+mice.">Lipids revert inert Abeta amyloid fibrils to neurotoxic protofibrils that affect learning in mice.</a> EMBO J. 27, 224-233 (2008).</li><li>Lesne, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+specific+amyloid-beta+protein+assembly+in+the+brain+impairs+memory.">A specific amyloid-beta protein assembly in the brain impairs memory.</a> Nature. 440, 352-357 (2006).</li><li>Hung, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid-beta+peptide+(Abeta)+neurotoxicity+is+modulated+by+the+rate+of+peptide+aggregation:+Abeta+dimers+and+trimers+correlate+with+neurotoxicity.">Amyloid-beta peptide (Abeta) neurotoxicity is modulated by the rate of peptide aggregation: Abeta dimers and trimers correlate with neurotoxicity.</a> J. Neurosci. 28, 11950-11958 (2008).</li><li>Ono, K., Condron, M. M., Teplow, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure-neurotoxicity+relationships+of+amyloid+beta-protein+oligomers.">Structure-neurotoxicity relationships of amyloid beta-protein oligomers.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 14745-14750 (2009).</li><li>Lambert, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusible,+nonfibrillar+ligands+derived+from+Abeta1-42+are+potent+central+nervous+system+neurotoxins.">Diffusible, nonfibrillar ligands derived from Abeta1-42 are potent central nervous system neurotoxins.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95, 6448-6453 (1998).</li><li>Shankar, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid-beta+protein+dimers+isolated+directly+from+Alzheimer's+brains+impair+synaptic+plasticity+and+memory.">Amyloid-beta protein dimers isolated directly from Alzheimer's brains impair synaptic plasticity and memory.</a> Nat. Med. 14, 837-842 (2008).</li><li>Shankar, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+oligomers+of+the+Alzheimer+amyloid-beta+protein+induce+reversible+synapse+loss+by+modulating+an+NMDA-type+glutamate+receptor-dependent+signaling+pathway.">Natural oligomers of the Alzheimer amyloid-beta protein induce reversible synapse loss by modulating an NMDA-type glutamate receptor-dependent signaling pathway.</a> J. Neurosci. 27, 2866-2875 (2007).</li><li>Cleary, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+oligomers+of+the+amyloid-beta+protein+specifically+disrupt+cognitive+function.">Natural oligomers of the amyloid-beta protein specifically disrupt cognitive function.</a> Nat. Neurosci. 8, 79-84 (2005).</li><li>Townsend, M., Shankar, G. M., Mehta, T., Walsh, D. M., Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+secreted+oligomers+of+amyloid+beta-protein+on+hippocampal+synaptic+plasticity:+a+potent+role+for+trimers.">Effects of secreted oligomers of amyloid beta-protein on hippocampal synaptic plasticity: a potent role for trimers.</a> J. Physiol. 572, 477-492 (2006).</li><li>Gomez-Isla, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Profound+loss+of+layer+II+entorhinal+cortex+neurons+occurs+in+very+mild+Alzheimer's+disease.">Profound loss of layer II entorhinal cortex neurons occurs in very mild Alzheimer's disease.</a> J. Neurosci. 16, 4491-4500 (1996).</li><li>DeKosky, S. T., Scheff, S. W., Styren, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+correlates+of+cognition+in+dementia:+quantification+and+assessment+of+synapse+change.">Structural correlates of cognition in dementia: quantification and assessment of synapse change.</a> Neurodegeneration. 5, 417-421 (1996).</li><li>Brouillette, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effects+of+Soluble+Abeta+Oligomers+on+Neurodegeneration+in+Alzheimer's+Disease.">The Effects of Soluble Abeta Oligomers on Neurodegeneration in Alzheimer's Disease.</a> Curr. Pharm. Des. 20, 2506-2519 (2014).</li><li>Brouillette, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotoxicity+and+memory+deficits+induced+by+soluble+low-molecular-weight+amyloid-beta1-42+oligomers+are+revealed+in+vivo+by+using+a+novel+animal+model.">Neurotoxicity and memory deficits induced by soluble low-molecular-weight amyloid-beta1-42 oligomers are revealed in vivo by using a novel animal model.</a> J. Neurosci. 32, 7852-7861 (2012).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The rat brain in stereotaxic coordinates. , (1998).</li><li>Broersen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+and+biocompatible+preparation+of+aggregate-free+amyloid+beta+peptide+for+biophysical+and+biological+studies+of+Alzheimer's+disease.">A standardized and biocompatible preparation of aggregate-free amyloid beta peptide for biophysical and biological studies of Alzheimer's disease.</a> PEDS. 24, 743-750 (2011).</li><li>Thakker, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebroventricular+amyloid-beta+antibodies+reduce+cerebral+amyloid+angiopathy+and+associated+micro-hemorrhages+in+aged+Tg2576+mice.">Intracerebroventricular amyloid-beta antibodies reduce cerebral amyloid angiopathy and associated micro-hemorrhages in aged Tg2576 mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 4501-4506 (2009).</li><li>Papon, M. A., Whittington, R. A., El-Khoury, N. B., Planel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alzheimer's+disease+and+anesthesia.">Alzheimer's disease and anesthesia.</a> Front. Neurosci. 4, 272 (2011).</li><li>Le Freche, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tau+phosphorylation+and+sevoflurane+anesthesia:+an+association+to+postoperative+cognitive+impairment.">Tau phosphorylation and sevoflurane anesthesia: an association to postoperative cognitive impairment.</a> Anesthesiology. 116, 779-787 (2012).</li></ol>

Publication of this video-article is sponsored by ALZET Osmotic Pumps.

özel dikkat gereklidir, bu protokol kapsamında kritik adımlar vardır. kanül implante zaman, ikinci kanül delik engelleme önlemek için çok sıvı diş çimento koymaktan kaçınmak. Tahrişe ve olası bir enflamatuar tepkiyi önlemek için pompaya bağlı P50 kateterin serbest ucunda diş çimento yerleştirilmesi önemlidir. stereotaksik cerrahi gün, kanül engellenmesini önlemek için kılavuz kanül olarak aynı uzunlukta kukla kanül kullanın. Ancak, kurduktan sonra pompalar kanül açısı kolu hipokampus için pompa çözümün doğru infüzyon izin önce durdurmak kısa kukla kanül kullanın. yakından Aβo infüzyon Monitör ve kateter yapılan hava kabarcığı infüzyon sırasında sürekli hareket olduğundan emin olun. Her zaman enjekte kanül tamamen infüzyon sırasında kılavuz kanül takılı olduğundan emin olun. Sorun karşılaşma Aβ infüzyon sırasında iseIç kanül bloke olmadığından emin olun. Böyle bir durumda, iç kanül yoluyla steril distile su yıkayın. kılavuz kanül engellenirse, kılavuz kanül içine iç kanül açın. Aksi takdirde yukarı ve aşağı iç kanül taşıyın. sokulmayla içinde çekişme özellikle ilk gününde, sıçanlar için stresli olabilir. hayvan stresi azaltmak için, biz işlemek ve stereotaksik ameliyat öncesi sokulmayla için sıçan alıştırmak için önerilir. Birçok avantajı bu romanı atfedilen ve in vivo yaklaşımı esnek olabilir. Gerçekten de, Aβo doğası doğru infüzyonundan önce bir kontrol edilebilir enjekte edilir ve Aβ preparatlar değişik türü (beyin türevli Aβ çözeltiler vs örneğin sentetik için) bunların in vivo nörotoksisiteyi değerlendirmek için enjekte edilebilir. Bu model aynı zamanda, çeşitli ol Aβ türleri (örneğin, monomer, düşük-mekanizmalar ve yüksek molekül ağırlığı araştırmak için kullanılabilirigomers, Ap protofibrillerinin) in vivo olarak nörotoksik etkileri olabilir ve immünoterapi gibi tedaviler beyinde bunların zararlı etkilerini karşı nasıl. Infüzyon uyanık, serbestçe hareket eden hayvanlar gerçekleştirmek beri daha önceki çalışmalarda gösterildiği gibi, anestezik ajanların ve sinyal yolları üzerinde Aβo solüsyonu arasında karıştırıcı etkileri vardır. Özgürce hayvan hareketli 32,33 İnfüzyonları olan da davranış testi ile uyumlu herhangi bir zaman önce ve infüzyon sonrası. Aβo ve pompa montaj enfüzyonları yaşlanma sırasında Aβo etkisini ve tedaviler belirlemek için farklı yaşlardaki hayvanda yapılabilir. nörodejenerasyon infüzyon bölgesine yakın gerçekleştiğinden, sinaps ve nöronal kaybın farklıdır ve lokalize beyin bölgelerinde indüklenebilir. Teminat Aβo infüzyonu ve kontrol (araç veya karıştırmak Aβ) aynı hayvan içinde herhangi bir değişiklik için kontrol sağlar. Bunun aksine, Aβo veya kontrol Solutions sağ taraflı enjekte edilmiş ve davranış görevleri hayvanların test Örneğin, hipokampus bırakılabilir. Aβo ve tedavi İnfüzyon eş zamanlı olarak yapılan ya da alternatif tedavi Aβ birikimi sonra etkili olup olmadığını değerlendirmek için Aβo infüzyondan sonra monte edilebilir pompaları edilebilir. Aβo intraserebroventriküler infüzyon yaparken burada açıklanan aynı protokol de kullanılabilir. hücre içi sinyal yollarının üzerinde Aβo etkisi öncesi ve makul kısa bir zaman dilimi içinde nöronal kaybından sonra değerlendirilebilir. Aβ infüzyon dozu ve sayısı da daha çok ya da daha az ciddi Aβ patojenik elde etmek üzere ayarlanabilir. çok yönlü olmasına rağmen, bu tekniğin bazı sınırlamalar vardır. Kanül implantasyon ameliyatı takip eden ilk birkaç gün içinde doku ve nöro mekanik bozulması üretir. Bu nedenle, Aβo INFU başlamadan önce ameliyat sonrası en az bir hafta beklemek gereklidirsion ve bu olaylar dikkate almak uygun kontroller (araç veya inaktif karıştırmak Aβ enjeksiyonu) ekleyin. Ayrıca, Aβo sadece küçük bir hacmi, solüsyonun difüzyon sınırlama infüze edilebilir. ozmotik pompalar Aβ kaynaklı nörodejenerasyonu önlemek için tasarlanmış ajanlar klinik öncesi doğrulama için uygun ve özel dağıtım yöntemi temsil eder. 6E10 antikoru ile immünoterapi önce, beyinde 31 Aβ birikimi azalttığı gösterilmiştir beri biz yeni in vivo yaklaşım doğrulamak için bir proof-of-concept olarak 6E10 antikoru kullanılmıştır. Bu modelde ozmotik pompalar kullanılır artık klinik öncesi AD hastalarında Aβo birikmesini ve nörotoksisite önleyebilecek yeni hastalık modifiye tedavilerin geliştirilmesi için kullanılabilir.

Başlangıçta beyinde çözünmeyen Aβ türlerin bu birikimi AD patogenezinde merkezi oldu önerilmiştir. 1,2 Ancak, amiloid plaklar da yaşlı bazı bilişsel normal algılanır. 3-7 plak yeminli ve bilişsel bozukluklar arasındaki mevcut zayıf korelasyon üstesinden gelmek için AD, son raporlar, bu nörotoksisite çok dinamik öne sürüldü olduğu hastaların klinik durumu ile çok daha iyi. 8-14 Aβ oligomerization süreci yana ilişkili hastalığın başlangıcında toksik çözünür Aβo varlığını göstermiştir Bunun yerine oligomerin yalnızca belirli bir tipte çeşitli Aβo indüklenir. 14-16 birçok çalışma Aβo sinaps ve nöronal kaybın önce sinaps bozukluklarını başlatabilir göstermiştir için, 17-24 mevcut teoriler Aβ ilgili tedavi etkili olabileceğini ortaya koymaktadır klinik çalışmalarda şimdiye kadar test olarak değil ileriki aşamalarında daha erken AD. AD patogenezinde biri damgasını özelliği bellek açıkları klinik düzeyde saptanabilir olunca, lokalize beyin bölgelerinin görülen hastalığın geç evrelerinde gözlenen masif ve yaygın hücre ölümü ve önemli sinaps ve nöronal kayıptır. Entorhinal korteks kıvrımlarının (AK) (DG) çıkıntı perforant yolu AD erken başlangıcında belirgin rahatsız edilir. 25,26 AD prodromal devlet esnasında hafif kognitif bozukluk (MCI) belirgin önemli hücre ölümünü olduğunda DG sinaptik kayıp gibi AT saptanır. 25,26 Kanıt büyük bir gövde erken AD çözünür Aβo toksik eylemi kesin olarak belirlemiş olmasına rağmen, 8-14 Aβo kaynaklı nörodejenerasyon nöronal kültür veya Organotipik beyin kesit kültürü gözlenen hayvan modellerinde çoğaltmak daha zor olmuştur. 27 transgenik AD çoğu A aşırı ifade modelleriβ amiloid plaklar, Tau hiperfosforizasyon&#39;un, sinaptik eksikliği ve bellek kusuru var. 27 Bununla birlikte, bu modeller AD hastalarının hipokampus gözlenen modelleme hücre ölümü daha az başarılı olmuştur. Bu teknik sorunları aşmak için biz çözünür Aβo intraserebral infüzyon dayalı bir model geliştirdi. Biz çözünür Aβo hipokampal infüzyon kademeli nöron kaybı ve Tau hiperfosforizasyon&#39;un, MS bellek düşüş ile ilişkili iki patolojik işaretlerinden neden tekrarladı önce bildirmiştir. 28 Burada, özel Aβo eşzamanlı infüzyon için tasarım kanül kullanılarak AD tedavileri test etmek için yeni bir yöntem gösteriyor ve ozmotik pompalar ile Aβo antikoru (6E10) sürekli infüzyon. Ozmotik pompalar doğrudan Aβo enfüzyon yerinde in vivo Aβo kaynaklı nörodejenerasyona karşı bir antikor (ya da diğer bileşiklerin) etkinliğini test etmek için özel bir yol sağlar. Bu nedenle, bu repr pompalarkatı bir proof-of-concept AD potansiyel terapötik ajanların etki mekanizmaları ile ilgili kurmak için kullanışlı bir araç ESENT. son raporlar AD erken dönemlerinde çözünür Aβo kritik etkisini işaret beri, Aβo yöneliktir birçok tedavi aslında akademik ve farmasötik laboratuarlar tarafından test edilmektedir. Bu yeni bir hayvan modeli, erken AD gözlenen sinaptik ve nöronal kaybın taklit sağlar ve ozmotik pompalar Aβo infüzyon yerinde özel olarak, sürekli işleme maddeleri aşılamak için kullanılır. Önceden demans hastalarında denemeler başlatmak üzere araştırmacılar istendiğinde hastaları hafif-orta son birkaç yıldır test edilen AD tedavilerin tekrarlayan başarısızlıkları Aβo bolca birikir ve geriye dönüşümsüz beyin hasarı oluşturmak için başlamadan önce. Bu bağlamda, çökelmesini ve Aβo dolayısıyla nörotoksisiteyi önlemek yeni bileşikler test klinik öncesi hastalarda ilgi çekici olabilir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="792">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF)</td>
			<td style="width:167px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:147px;">59-7316</td>
			<td style="width:201px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">PE50 Catheter thin wall</td>
			<td style="width:167px;">Plastics one</td>
			<td style="width:147px;">C232CT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:279px;">Ketamine Hydrochloride (100 mg/mL)</td>
			<td style="width:167px;">Bioniche</td>
			<td style="width:147px;">1989529</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Xylaxine Hydrochloride (100 mg/mL)</td>
			<td style="width:167px;">Bimeda</td>
			<td style="width:147px;">8XYL004C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Meloxicam (5 mg/mL)</td>
			<td style="width:167px;">Norbrook</td>
			<td style="width:147px;">215670I01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Solution of chlorhexidine gluconate 2% and isopropyl alcohol 2%</td>
			<td style="width:167px;">Carefusion</td>
			<td style="width:147px;">260100C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lidocaine Hydrochloride</td>
			<td style="width:167px;">Alveda Pharma</td>
			<td style="width:147px;">0122AG01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bupivacaine Hydrochloride</td>
			<td style="width:167px;">Hospira</td>
			<td style="width:147px;">1559</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ophthalmic ointment</td>
			<td style="width:167px;">Baussh and Lomb inc.</td>
			<td style="width:147px;">2125706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">stereotaxic frame</td>
			<td style="width:167px;">Stoelting</td>
			<td style="width:147px;">51600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">stereotaxic cannula holder arm</td>
			<td style="width:167px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:147px;">72-4837</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Drill</td>
			<td style="width:167px;">Dremel</td>
			<td style="width:147px;">8050-N/18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Guide Cannula</td>
			<td style="width:167px;">Plastics one</td>
			<td style="width:147px;">326OPG/spc</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Injection Cannula</td>
			<td style="width:167px;">Plastics one</td>
			<td style="width:147px;">C315I/spc</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dummy Cannula</td>
			<td style="width:167px;">Plastics one</td>
			<td style="width:147px;">C315DC/spc</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Suture thread coated vicryl rapide 4-0</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:147px;">VR2297</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dental Acrylic Cement</td>
			<td style="width:167px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:147px;">72-6906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Screws</td>
			<td style="width:167px;">JI Morris Company</td>
			<td style="width:147px;">P0090CE125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">6E10 antibody (mouse IgG1 isotype)&#160;</td>
			<td style="width:167px;">BioLegend</td>
			<td style="width:147px;">803003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Mouse IgG1 isotype control antibody</td>
			<td style="width:167px;">Abcam</td>
			<td style="width:147px;">AB18447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Alzet osmotic pumps model 1007D</td>
			<td style="width:167px;">Durect corporation</td>
			<td style="width:147px;">290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:167px;">Baxter</td>
			<td style="width:147px;">CA2L9100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Amyloid-beta 1-42&#160;</td>
			<td style="width:167px;">rPeptide</td>
			<td style="width:147px;">A-1163-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Hamilton syringe (10 &#181;L)</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientique</td>
			<td style="width:147px;">14815279</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Infusion Syringe Pump CMA 402</td>
			<td style="width:167px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:147px;">CMA8003110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Syringe 1 mL</td>
			<td style="width:167px;">BD</td>
			<td style="width:147px;">309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">Needle 21G</td>
			<td style="width:167px;">Terumo</td>
			<td style="width:147px;">NN-2125R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Snuggle</td>
			<td style="width:167px;">Lomir Biomedical</td>
			<td style="width:147px;">RTS04</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

neurodegeneration in an animal model of chronic amyloid-beta oligomer infusion is counteracted by antibody treatment infused with osmotic pumps

(Gerçekler ve olaylarla ilgili hafıza) hipokampus bağımlı açık bellek düşüş Alzheimer hastalığı (AH) erken klinik belirti biridir. İyi sinaps kaybı ve ardından gelen nörodejenerasyon AD bellek bozuklukları için en iyi göstergesi olduğu bilinmektedir. Son çalışmalar klinik semptomlar belirgin hale gelmeden önce yaklaşık 10 ila 15 yr insan beyninde birikmeye başlar çözünür amiloid beta oligomerler (Aβo) nörotoksik rolünü vurguladı. Birçok rapor çözünür Aβo AD modelleri ve insanlarda hafıza açıkları ile ilişkili olduğunu göstermektedir. nöronal ve beyin kesit kültürlerinde görülen Aβo kaynaklı nörodejeneratif hastalıklar, birçok hayvan modellerinde çoğaltmak daha zor olmuştur. Burada gösterilen tekrarlanan Aβo infüzyon modeli bu sorunu aşmak ve yeni hastalık modifiye tedaviler geliştirmek için iki önemli etki ele izin: Erken AD teşhis etmek için biyolojik belirteçler tanımlamak ve moleküler mekanizmalarını belirlemeklog mekanizmaları AD başlangıcında Aβo indüklenen hafıza kaybı destek. çözünebilir Aβo agrega nispeten hızlı olarak hastaların klinik durumu ile zayıf korelasyon çözünmeyen Aβ fibrilleri için, çözünebilir Aβo taze hazırlanmış ve hipokampus belirgin hücre ölümünü üretilmesi için, altı gün boyunca günde bir kez enjekte edilir. Biz özel Aβo eşzamanlı haşlama ve ozmotik pompalar kullanılarak hipokampus Aβo antikoru (6E10) sürekli infüzyon için tasarım kanül kullanılır. In vivo yönteminde yenilikçi Bu şimdi ön-demans hastalarında Aβo birikmesini ve nörotoksisite engelleyebilecek yeni bir AD tedavilerin etkinliği gösterildi klinik öncesi çalışmalarda kullanılabilir.

Aβo nörotoksik etkisi, kanülün implante Long-Evans sıçanlarda araştırılmıştır hipokampus DG. Çözünür Aβo altı ardışık gün boyunca her gün enjekte edildi. Biz özel Aβo eşzamanlı haşlama ve ozmotik pompalar (Şekil 1A) kullanarak hipokampus içinde 6E10 veya kontrol IgG1 antikorunun sürekli infüzyon için tasarım kanül kullanılır. immünohistokimya sıçanlar anestezi yapıldı için,% 0.9 NaCl ile transkardiyal perfüze ve beyinleri, 24 saat boyunca 48 saat ve% 15 sukroz çözeltisi% 4 paraformaldehit solüsyonunda daldırılmış. Yüzer koronal kesit (40 um), 1 saat boyunca% 1 keçi serumu bloke 30 dakika boyunca% 0.3 H2O 2 ile muamele edilmiş ve bir anti-pan-Aβ antikor ile 4 ° C&#39;de gece boyunca inkübe edildi. Bölümler antikor uygulamadan önce 3 dakika% 70 formik asit ile muamele edildi. Tespit ABC kompleksi ve bir 0 kullanılarak gerçekleştirilmiştir.% 05 3,3-diaminobenzidin çözeltisi. Bölümler tolüen 5 dakika inkübe jelatin kaplı cam suyu alınmış slaytlar, hava ile kurutuldu, 2 saat, (30, 70, 95, ve% 100 alkol), üzerine monte edilmiş ve kaplandı. kresil violet lekelemesi için, bölümler,% 0.5 kresil violet solüsyonu içinde 10 dakika inkübe edildi, toluen, 5 dakika daldırılır 1 renkten% 0.5 asetik asit solüsyonu içinde dakika, (70, 95, ve% 100 alkol), kuluçkalanmış ve kaplanmıştır cam lamel. Burada sunulan sonuçlar, bu birikimi ile ilişkili infüzyon sitenin yakınında dg içinde Aβo birikimi ve hücre ölümüne göstermektedir. Biz düzey Aβo ölçüde 6E10 antikoru tedavisi (Şekil 1B) tarafından azaldığını buldular. İşaretli nörodejenerasyon Aβo enjekte etme yeri yakınlarında gözlendi ve 6E10 antikoru tedavisi (Şekil 1B) zayıflatılmıştır. Bu sonuçlar, DG gözlenen Aβo birikimi ile tutarlıdırBurada gösterilen 6E10 antikoru immüno- amiloid birikiminin farelerde tekrar Aβo infüzyonları takip. 28 nolu bir transgenik AD fare modelinde yapılan bir rapor ile uyumludur. 31 <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/54215/54215fig1.jpg" /> Aβo İnfüzyon sırasında ikili kanülle Animal Şekil 1. Resim Aβo bir çözeltisi. (0.2 ug / ul; 1 ul), iç hortuma bağlanmış PE50 kateterler kullanılarak (6 gün boyunca günde bir kez) uyanık ve serbest hareket eden sıçanlarda enjekte edilmiştir kanülleri içine yerleştirildi. Kontrol (CTL) IgG1 veya 6E10 antikoru ile tedavi hayvanın kürek kemikleri arasında deri altından bulunan ozmotik pompalar kullanılarak Aβo infüzyon yerinde doğrudan infüze edildi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54215/54215fig1large.jpg" target="_blank">Th büyük halini görmek için tıklayınız</a>rakamdır. <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/54215/54215fig2.jpg" /> . CTL (IgG1) ile 6 ardışık gün boyunca günde bir kez enjekte ve tedavi edildi ya da 6E10 antikoru; Aβo Biriktirme Bağlı Şekil 2. nöronal Kaybı 6E10 Antikor Tedavisi A, Aβo (1 ul / ul 0.2 ug) tarafından zayıflatılmış olan hücre kaybını gösteren cresyl menekşe ile infüzyon ozmotik pompalar kullanılarak. B, hemen yanındaki kanül yerleştirilmesi için bir bölüme dg içinde Aβo temsilcisi birikimi ve temsili boyama sitesi. Ölçek çubukları: 50 mikron (n = 4) <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54215/54215fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps at JoVE.com

Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

To study the effects of A&#946;o in vivo, we developed a model based on repeated hippocampal infusions of soluble A&#946;o coupled with continuous infusion of A&#946;o antibody (6E10) in the hippocampus using osmotic pumps to counteract the neurotoxic effect of A&#946;o.

Kronik Amiloid beta Oligomer İnfüzyon bir hayvan Modelinde Nörodejenerasyon Osmotik Pompalar ile Antikor Tedavisi infüzyon ile giderilir

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It ...

neurodegeneration-an-animal-model-chronic-amyloid-beta-oligomer

Research

JoVE Journal

Medicine

9.2K Görüntüleme.  Université de Montréal. To study the effects of Aβo in vivo, we developed a model based on repeated hippocampal infusions of soluble Aβo coupled with continuous infusion of Aβo antibody (6E10) in the hippocampus using osmotic pumps to counteract the neurotoxic effect of Aβo.

Video: Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to affect the function of several organs and tissues and to contribute to the development of the many complications associated with obesity and the metabolic syndrome, including type 2 diabetes. To study the mechanisms by which excessive levels of glucose and fatty acids affect the pancreatic beta-cell and the secretion of insulin, we have established a chronic nutrient infusion model in the rat. The procedure consists of catheterizing the right jugular vein and left carotid artery under general anesthesia; allowing a 7-day recuperation period; connecting the catheters to the pumps using a swivel and counterweight system that enables the animal to move freely in the cage; and infusing glucose and/or Intralipid (a soybean oil emulsion which generates a mixture of approximately 80% unsaturated/20% saturated fatty acids when infused with heparin) for 72 hr. This model offers several advantages, including the possibility to finely modulate the target levels of circulating glucose and fatty acids; the option to co-infuse pharmacological compounds; and the relatively short time frame as opposed to dietary models. It can be used to examine the mechanisms of nutrient-induced dysfunction in a variety of organs and to test the effectiveness of drugs in this context.

A protocol for chronic infusions of glucose and Intralipid in rats is described. This model can be used to study the impact of nutrient excess on organ function and physiological parameters.

Sıçan Kronik Besin İnfüzyon Bir Model

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Tıp

Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals. This article introduces a standard protocol used to induce aortic aneurysms via subcutaneous infusion of angiotensin II (AngII) from implanted osmotic pumps. This protocol includes calculation of AngII amount and dissolution, osmotic pump filling, implantation of osmotic pumps subcutaneously, observation after pump implantation, and harvest of aortas to visualize aortic aneurysms in mice. Subcutaneous infusion of AngII through osmotic pumps following this protocol is a reliable and reproducible technique to induce both abdominal and thoracic aortic aneurysms in mice. Infusion durations range from a few days to several months based on the purpose of the study. AngII 1,000 ng/kg/min is sufficient to provide maximal effects on abdominal aortic aneurysmal formation in male hypercholesterolemic mouse models such as apolipoprotein E deficient or low-density lipoprotein receptor deficient mice. Incidence of abdominal aortic aneurysms induced by AngII infusion via osmotic pumps is 5 - 10 times lower in female hypercholesterolemic mice and also lower in both genders of normocholesterolemic mice. In contrast, AngII-induced thoracic aortic aneurysms in mice are not hypercholesterolemia or gender-dependent. Importantly, multiple features of this mouse model recapitulate those of human aortic aneurysms.

Subcutaneous implantation of osmotic pumps provides a convenient approach for prolonged and consistent delivery of compounds. This approach has been used extensively to study both abdominal and thoracic aortic aneurysms in mice.

Ozmotik kullanarak Subkutan Anjiotensin II İnfüzyon Farelerde İndükler Aort anevrizmaları Pompalar

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

Bioluminescence Imaging of an Immunocompetent Animal Model for Glioblastoma

In contrast to commonly reported human glioma xenograft animal models, GL261 murine glioma xenografts recapitulate nearly all relevant clinical and histopathologic features of the human disease. When GL261 cells are implanted intracranially in syngeneic C57BL/6 mice, the model has the added advantage of maintaining an intact immune microenvironment. Stable expression of luciferase in GL261 cells allows non-invasive cost effective bioluminescence monitoring of intracranial tumor growth. We have recently demonstrated that luciferase expression in GL261 cells does not affect the tumor growth properties, tumor cell immunomodulatory cytokine expression, infiltration of immune cells into the tumor, or overall survival of animals bearing the intracranial tumor. Therefore, it appears that the GL261 luciferase glioma model can be useful in the study of novel chemotherapeutic and immunotherapeutic modalities. Here we report the technique for generating stable luciferase expression in GL261 cells and how to study the in vitro and in vivo growth of the tumor cells by bioluminescence imaging.

GL261 glioma cells provide a useful immunocompetent animal model of glioblastoma. The goals of this protocol are to demonstrate proper techniques for monitoring intracranial tumor growth using in vivo bioluminescence imaging, and to verify the utility of luciferase-modified GL261 cells for studying tumor immunology and immunotherapeutic approaches for treating glioblastoma.

Glioblastoma&#39;nın için bir Immünkompetan Hayvan Modeli Biyoparlaklık Görüntüleme

In contrast to commonly reported human glioma xenograft animal models, GL261 murine glioma xenografts recapitulate nearly all relevant clinical and ...

Quantitative 3D In Silico Modeling (q3DISM) of Cerebral Amyloid-beta Phagocytosis in Rodent Models of Alzheimer's Disease

Neuroinflammation is now recognized as a major etiological factor in neurodegenerative disease. Mononuclear phagocytes are innate immune cells responsible for phagocytosis and clearance of debris and detritus. These cells include CNS-resident macrophages known as microglia, and mononuclear phagocytes infiltrating from the periphery. Light microscopy has generally been used to visualize phagocytosis in rodent or human brain specimens. However, qualitative methods have not provided definitive evidence of in vivo phagocytosis. Here, we describe quantitative 3D in silico modeling (q3DISM), a robust method allowing for true 3D quantitation of amyloid-&#946; (A&#946;) phagocytosis by mononuclear phagocytes in rodent Alzheimer&#39;s Disease (AD) models. The method involves fluorescently visualizing A&#946; encapsulated within phagolysosomes in rodent brain sections. Large z-dimensional confocal datasets are then 3D reconstructed for quantitation of A&#946; spatially colocalized within the phagolysosome. We demonstrate the successful application of q3DISM to mouse and rat brains, but this methodology can be extended to virtually any phagocytic event in any tissue.

Quantitative 3D In Silico Modeling q3DISM of Cerebral Amyloid-beta Phagocytosis in Rodent Models of Alzheimer's Disease

We developed a methodology for quantitative 3D in silico modeling (q3DISM) of cerebral amyloid-&#946; (A&#946;) phagocytosis by mononuclear phagocytes in rodent models of Alzheimer&#39;s disease. This method can be generalized for the quantitation of virtually any phagocytic event in vivo.

kantitatif 3D<em&gt; Siliko</emAlzheimer Hastalığının Kemirgen Modelleri Serebral Amiloid-beta Fagositoz&gt; Modelleme (q3DISM)

Neuroinflammation is now recognized as a major etiological factor in neurodegenerative disease. Mononuclear phagocytes are innate immune cells responsible ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but regardless of the approach, an in vivo model is needed to test each treatment. The pig is one of the most used large animal models for cardiovascular disease. Its heart is very similar in anatomy and function to that of a human. The ameroid placement technique creates an ischemic area of the heart, which has many useful applications in studying myocardial infarction. This model has been used for surgical research, pharmaceutical studies, imaging techniques, and cell therapies.
There are several ways of inducing an ischemic area in the heart. Each has its advantages and disadvantages, but the placement of an ameroid constrictor remains the most widely used technique. The main advantages to using the ameroid are its prevalence in existing research, its availability in various sizes to accommodate the anatomy and size of the vessel to be constricted, the surgery is a relatively simple procedure, and the post-operative monitoring is minimal, since there are no external devices to maintain. This paper provides a detailed overview of the proper technique for the placement of the ameroid constrictor.

The purpose of this protocol is to demonstrate the placement of a delayed constricting device (an ameroid constrictor) around a coronary artery in a swine model. This device creates an ischemic area of the heart that is useful for studying new diagnostic imaging techniques and new methods of treatment.

Bir Ameroid yılanı kullanarak domuz kronik kalp iskemi modelinde

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Mouse Model for Chronic Pancreatitis via Bile Duct TNBS Infusion

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. Several rodent models have been developed to study CP, of which the bile duct 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) infusion model replicates the features of neuropathic pain seen in CP. However, bile duct drug infusion in mice is technically challenging. This protocol demonstrates the procedure of bile duct TNBS infusion for generation of a CP mouse model. TNBS was infused into the pancreas through the ampulla of Vater in the duodenum. This protocol optimized drug volume, surgical techniques, and drug handling during the procedure. TNBS-treated mice showed features of CP as reflected by bodyweight and pancreas weight reductions, changes in pain-associated behaviors, and abnormal pancreatic morphology. With these improvements, mortality associated with TNBS injection was minimal. This procedure is not only critical in generating pancreatic disease models but is also useful in local pancreatic drug delivery.

Chronic pancreatitis (CP) is a disease characterized by inflammation and fibrosis of the pancreas, often associated with intractable abdominal pain. This article focuses on refining the technique to generate a mouse model of CP via bile duct infusion with 2,4,6 -trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS).

Safra Kanalı TNBS infüzyonu ile Kronik Pankreatit için Bir Fare Modeli

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. ...

The Miniature Pig: A Large Animal Model for Cochlear Implant Research

Cochlear implants (CI) are the most effective method to treat people with severe-to-profound sensorineural hearing loss. Although CIs are used worldwide, no standard model exists for investigating the electrophysiology and histopathology in patients or animal models with a CI or for evaluating new models of electrode arrays. A large animal model with cochlea characteristics similar to those of humans may provide a research and evaluation platform for advanced and modified arrays before their use in humans. 
To this end, we established standard CI methods with Bama mini-pigs, whose inner ear anatomy is highly similar to that of humans. Arrays designed for human use were implanted into the mini pig cochlea through a round window membrane, and a surgical approach followed that was similar to that used for human CI recipients. Array insertion was followed by evoked compound action potential (ECAP) measurements to evaluate the function of the auditory nerve. This study describes the preparation of the animal, surgical steps, array insertion, and intraoperative electrophysiological measurements. 
The results indicated that the same CI used for humans could be easily implanted in mini-pigs via a standardized surgical approach and yielded similar electrophysiological outcomes as measured in human CI recipients. Mini-pigs could be a valuable animal model to provide initial evidence of the safety and potential performance of novel electrode arrays and surgical approaches before applying them to human beings.

Miniature pigs (mini-pigs) are an ideal large animal model for research into cochlear implants. Cochlear implantation surgery in mini-pigs can be utilized to provide initial evidence of the safety and potential performance of novel electrode arrays and surgical approaches in a living system similar to human beings.

Minyatür Domuz: Koklear İmplant Araştırması için Büyük Bir Hayvan Modeli

Cochlear implants (CI) are the most effective method to treat people with severe-to-profound sensorineural hearing loss. Although CIs are used worldwide, ...

Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving patients' eye health. Historically, corneal healing has been studied in rodents such as mice and rats, but these models might not completely mimic human disorders. However, information on other rodents such as Mongolian gerbils (Meriones unguiculatus) is scant in corneal research.
Here, we describe a technique to develop a novel animal model for studying corneal healing after photorefractive keratectomy. Due to the limited literature available on the cornea of M. unguiculatus, we also describe a histological analysis of the normal cornea. These research techniques can also be employed in the study of eye diseases because of the similarity between the corneas of Mongolian gerbils and humans in terms of genetics, anatomy, and physiology.

This article describes a new animal model developed to study the anatomy and histology of the cornea and its healing processes. This new animal model uses the Mongolian gerbil, which has a cornea with many similarities to the human cornea.

Yara İyileşmesinin Bir Hayvan Modeli Olarak Moğol Gerbilleri

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving ...

Pulmoner Nodüllerin Tanı ve Tedavisi için 3D Rekonstrüksiyon

A 3D Digital Model for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Nodules

The three-dimensional (3D) reconstruction of pulmonary nodules using medical images has introduced new technical approaches for diagnosing and treating pulmonary nodules, and these approaches are progressively being acknowledged and adopted by physicians and patients. Nonetheless, constructing a relatively universal 3D digital model of pulmonary nodules for diagnosis and treatment is challenging due to device differences, shooting times, and nodule types. The objective of this study is to propose a new 3D digital model of pulmonary nodules that serves as a bridge between physicians and patients and is also a cutting-edge tool for pre-diagnosis and prognostic evaluation. Many AI-driven pulmonary nodule detection and recognition methods employ deep learning techniques to capture the radiological features of pulmonary nodules, and these methods can achieve a good area under-the-curve (AUC) performance. However, false positives and false negatives remain a challenge for radiologists and clinicians. The interpretation and expression of features from the perspective of pulmonary nodule classification and examination are still unsatisfactory. In this study, a method of continuous 3D reconstruction of the whole lung in horizontal and coronal positions is proposed by combining existing medical image processing technologies. Compared with other applicable methods, this method allows users to rapidly locate pulmonary nodules and identify their fundamental properties while also observing pulmonary nodules from multiple perspectives, thereby providing a more effective clinical tool for diagnosing and treating pulmonary nodules.

Yazar Spotlight: Pulmoner Nodüllerin Tanı ve Tedavisi için Bir 3D Dijital Model  

The objective of this study is to develop a novel 3D digital model of pulmonary nodules that serves as a communication bridge between physicians and patients and is also a cutting-edge tool for pre-diagnosis and prognostic evaluation.

Pulmoner nodüllerin tanı ve tedavisi için 3D dijital model

The three-dimensional (3D) reconstruction of pulmonary nodules using medical images has introduced new technical approaches for diagnosing and treating ...