Yazarlar Curetis GmbH bu çalışmada destek için teşekkür etmek istiyorum.

Bu çalışmada (046/09, rev 3) yerel Etik Komitesi tarafından kabul edildi. Aydınlatılmış onam ve veri gizlilik bildirimi dahil tüm hastalardan elde edilmiştir.
1. ortak aspirasyon
Not: Yordam cerrahi bir tiyatro veya bir müdahale odası ile karşılaştırılabilir aseptik koşullar uygulanmalıdır. Yardım tarafından bir hemşire ya da doktor yardım yararlıdır ancak değil zorunlu değildir.
<ol><li>Hasta muayene yatakta sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Ortak ilgi giyim ücretsiz olduğundan emin olun. Yoğun veya uzun vücut saç elektrik makası kullanarak kısaltmak. Vücut saç bir ustura ile kaldırmaz. Kalça eklemi delinmiş ise hastanın yönde bir röntgen getirin. Diz delinmiş ise, dizden biraz bükük pozisyon13' te duruyor öyle ki diz roll hastanın diz altında yer.</li>
	<li>Bir aracı tablo aşağıdaki steril ekipmanları ile hazırlamak: steril temizleme bezi, delikli steril kapak örtüsü, bir tek kullanımlık steril neşter, sivri cerrahi bıçak (tip #11) ve steril 10 mL şırınga steril kanül (20 gauge, 80 mm) ile. Alkollü cilt dezenfektan, kan toplama tüpler ve pediatrik kan kültür şişesi ayrı ayrı ayarlayın.</li>
	<li>Elbise bir cerrahi önlük, kukuleta ve maske ve steril eldiven takmışım.</li>
	<li>Hastanın cilt cilt dezenfektan ile delik sitesinde (örneğin üstün recessus14 için kalça diz ve anterolateral portal alanı) iyice yıkayın. Not: gerekli çekim hızı kullanılan dezenfektan için Mind (genellikle 90 diz, 120 s hip alkollü Dezenfektanlar için s).</li>
	<li>
Delikli steril kapak örtüsü ponksiyon sitesiyle kapsar. Ponksiyon siteyi tanımlar. Not: diz için doğru 2 cm yukarıda üst kapağına kutup ve 2 cm lateral yan tarafı için bir sitedir. Kalça için anterior superior İliak omurga bulup caudally kadar üst symphysis doğrultusunda geçin. Hangi-ebilmek var olmak her zaman palpe15site femoral arter (yaklaşık 4 cm), yanal olduğundan emin olun.<ol>
<li>Ponksiyon sitesinde sivri neşter bıçak ile bir küçük bıçak kesi (3-4 mm geniş ve derin) deri yoluyla olun. Onlar yanlış negatifleri Mikrobiyolojik kültür, bakteriyostatik etkileri nedeniyle neden yerel anestezi geçerli değildir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Kanül şırınga radarı dekonta iliştirin. Bıçak kesi yoluyla kanül yerleştirin. Diz eklemi üstün tatil, dorsal ve medial, diz kapağı üst kutup altında teneffüs doğru 45 ° açıyla nişan al ve şırınga'nın piston çizerek eklem sıvısı iğne derinliğe, yaklaşık 5 cm. aspiratı ekleyin.
	<ol>
<li>Kalça eklemi delinme Fluoroskop rehberlik kullanın. Hemen bir 60 ° açıyla nişan ponksiyon yerinde iğne yerleştirin. Röntgen, iğne ucu protezi ensenden işaret emin olun. Eklem sıvısı elde kadar derinliğe kadar yaklaşık 8 cm (adipose hastalarda daha derin) kanül, süre alıyorum, ilerlemek. İğne pozisyonda iken alıyorum, protez yüzeyinin kazıma önlemek için tutmak. Not: İğne ucu protezi ile temas İntraartiküler konumlandırma sağlar. Genellikle, en fazla 5 mL sıvı bir Kalça eklemi emişli formu olabilir, bir diz eklemi daha--dan 10 mL verecektir.</li>
		<li>Kanül kaldırıldıktan sonra bıçak kesik bir steril yara pansuman uygulanır. Hematom oluşumu engellemek için hafif sıkıştırma ile bacak bir bandaj uygulanır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Toplanan ortak aspiratı örnek kapsayıcıların içine aktarın. Steril çalışma teknikleri boyunca olun.
	<ol>
<li>Pediatrik kan kültür şişeye emişli eklem sıvısı ile aşı için pediatrik kan kültür şişeye alkollü dezenfektan ile membran dezenfekte. Taze bir kanül şırınga koyun ve 1-3 mL emişli eklem sıvısı kan kültür şişesi enjekte. Nazik ajitasyon veya döndürme16ile karıştırın.</li>
		<li>Yerli ortak aspiratı numune hazırlanması için kanül şırıngadan çıkarın. Bir kan toplama tüp katkı olmadan açın ve 1 mL aspiratı, bu koleksiyon tüp içine enjekte. Eski yerine koymak ve PCR analysis kapağı tutturmak. Not: Gemi PCR analiz için gecikmeden Mikrobiyoloji lab için örnek. Aynı örnekten geleneksel Mikrobiyolojik aerobik ve anaerobik kültürler17kadar ayarlanabilir.</li>
		<li>Ortak aspiratı 1-4 mL EDTA içeren hücre sayısı ve farklılaşma2için bir kan toplama tüp içine aktarın. Gemi herhangi bir gecikme olmadan bir Biyokimya laboratuarı için örnek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. PCR tanılama
<ol><li>Tüm üç cihazlar (lysator, belgili tanımlık çözümlemek ve malzemeler tablo bkz: kokpit;) yukarıya ve koşma doğru olduğundan emin olun. Çalışma bankta (PCR kartuş, bir ana mix tüp, örnek tüp ve örnek tüp kap, bir 0 - 200 µL micropipette ve steril pipet ipuçları) testi gerçekleştirmek için gerekli tüm malzemeleri belirledi.</li>
	<li>Ana mix tüp oda sıcaklığında bu ayarlayarak yordama başlamadan önce defrost. Tüm sarf malzemeleri (ana mix tüp, kartuş ve örnek tüp) zaten bir barkod ile prelabeled.</li>
	<li>Örnek tüp kapağını çıkarın. Toplanan örnek (ortak aspiratı, bkz: Bölüm 1; veya sonication sıvı, bkz: 4) 180 µL almak bir pipet ve transferi ile örnek içine tüp. Protein kinaz K ve tüm iş akışı kalite kontrolü için bir iç kontrol gen içeren örnek tüp kap ile örnek tüp kapatın.</li>
	<li>Kokpit açık çalışma bilgisayar yazılımı "yeni test" dokunarak sol alt köşedeki düğme. Hastanın verileri veya bir örnek kimliği dokunmatik ekran girin. Örnek seçmek için ilk açılır, sonra "ortopedi" olarak uygulama modu, "ITI-kartuş" seçim ve son olarak "synovial sıvı" veya "sonication sıvı" örnek türü olarak seçin. Başlat düğmesine basın.</li>
	<li>Örnek tüp altındaki barkod tarama. Örnek tüp lysator yerleştirin. Not: Lizis işlemi otomatik olarak başlatmak ve bitirmek için yaklaşık 30 dakika al. Lizis tamamlandığında geri sayım süreölçer lysator ekranda gösterir.</li>
	<li>Örnek lysator örnek tüpünden kilidini kokpit ekran üzerinde seçin. Lysator örnek tüpü çıkarması ve lysator'ın üst kapağı kapatın. Örnek tüp PCR kartuş örnek tüp yuvaya aktarın. Fetişlerin mastermix tüp PCR kartuş mastermix yuvasına takın.</li>
	<li>PCR kartuş mastermix ve örnek tüp ile tarama kokpit ekrandaki yönergeleri izleyin.</li>
	<li>PCR kartuş çözümleyicisinin belirtilen kartuş yuvasına takın. Ne zaman bitmiş, belgili tanımlık çözümlemek kartuş serbest bırakır. Not: PCR koşulları üretici tarafından önceden ve kullanıcı tarafından değiştirilemez. Daha fazla bilgi için üreticinin Uygulama Kılavuzu'na bakın. PCR işlemi otomatik olarak başlar ve yaklaşık 4 saat 10 dk.</li>
	<li>Kaldırmak ve kartuş atın. Kokpit dokunmatik ekran, "geçerli" test"sol alt köşede seçin, daha sonra test sonuçlarını görüntülemek için doğru örnek kimliğini seçin. Makinenin bellek, sonuçları kaydetmek ve yazdırabilir veya daha fazla başvuru için (USB götürmek yolu ile) verebilirsiniz. Not: patojen kimlik ve direnç işaretlere, gecikmeden cerrah tespiti gibi PCR, sonuç raporu. Bakteriyel ve fungal patojenlerin 114 deoksiribonükleik asit (DNA) hedefleri olan bir panel genellikle implant enfeksiyonları ve yumuşak doku enfeksiyonları, bulunan en yaygın antibiyotik direnci işaretleri ile birlikte analiz edilir.</li>
</ol>3. cerrahi işlem: İntraoperatif örnek koleksiyonu
Not: Gözden geçirme protezi cerrahisi uzman düzeyde beceri ve uzmanlık gerektirir; cerrahi işlemler hakkında kapsamlı bilgiler için lütfen cerrahın ders kitapları-18bakın. Cerrahi işlem tam ve ayrıntılı açıklaması, bu makalenin kapsamı dışındadır de olurdu. Burada örnek toplama ve öncesi analytics detaylarını üzerinde odaklanmıştır. Ameliyat sırasında elde edilen Mikrobiyolojik örnekleri sonuçlarını uzlaşmaya olarak değil bir tek atış antibiyotik profilaksisi, yönetim gözden geçirme artroplasti ameliyatta kaçınmaları. Bu uygulama tartışmalı19,20olsa bu kurala bağlı kalarak, önerilir. Varolan cerrahi yaklaşım ortak için mümkün olduğunda kullanın. Ek cerrahi yaklaşımlar yumuşak doku güvenliğini aşmasına ve yara oluşumu artırmak.
<ol><li>Ek kapsül de maruz kadar doku incelemek. Arthrotomy gerçekleştirmek hazır şırınga ile çok daha fazla eklem sıvısı toplanan daha fazla analiz (adımları 1.7.1-1.7.3) belirtildiği gibi steril enjektör içine. Not: Hiçbir antiseptik lavaj sıvıları implant kaldırılır ve doku örnekleri alınan kadar kullanılmalıdır.</li>
	<li>Eklem implantları kaldırın. Hemen kaldırıldıktan sonra implant parçaları bir hava ve su geçirmez kapaklı steril bir plastik kaba aktarın. Not: Ders kitabı literatürde implant temizlenmesine yönelik ayrıntılı yönergeler bulunabilir (diz, örneğin: Wirtz vd., Bölüm 16,421; Kalça, örneğin: Claes vd., Bölüm 14.5.122). Belirli aletleri-ebilmek var olmak gerekli, üreticilerin yönergeleri tarafından belirtildiği gibi. İmplant kaldırma tekniği önemli ölçüde farklı implant türleri ve fiksasyon yöntemleri arasında değişir. Keskiler ve matkaplar, sürgülü bir çekiç ve bir evrensel intramedüller çivi Temizleme kümesi kümesi kemikli entegre implantlar23,24giderilmesinde yararlı.</li>
	<li>Steril keskin küret, forseps ve rongeur membran doku kemik implant arabiriminden kaldırmak için kullanın. Doku temsil edici bir örnek olarak numuneler Mikrobiyoloji ve histoloji için vidalı kapaklı, steril bir plastik kaba aktarın. Not: Bir rayba medüller kanal tüm yumuşak dokuların temizlemek için kullanılabilir. Ayrıca, sinovyal doku ve muayene için artiküler kapsül örnekleri almak ve onları steril kaplarda saklayın. Toplamda en az dört numuneler toplanan gerekir.</li>
	<li>Tüm örnekleri ve explanted parçaları Mikrobiyoloji lab anında gönderin. Not: O zaman antibiyotik verilebilir. Doğru antibiyotik seçimi çok önemlidir ve bireyselleştirilmiş karar25,26olması gerekir. Terapötik kavramları üzerinde cerrahlar ve microbiologists oluşan disiplinler arası bir panel tarafından önceden karar vermesi gerekir.</li>
	<li>Eski implant bölgesi debridman enkaz belirtileri gösterir herhangi bir doku kaldırarak tamamlamak (polietilen aşınma gibi metal veya çimento parçacıklar) ya da enfeksiyon ve nekroz (pürülan, avasküler, fibrin kaplı, membranöz veya "çamurlu" doku). Herhangi bir ölü ya da osteitic kemik kaldırın. Vidalar, teller, cerclages, kemik çimento enkaz veya -tekrar Emilebilen dikiş (Claes vd., Bölüm 14.5.322bakınız) gibi tüm yabancı malzeme çıkarmak.</li>
	<li>Bir yara dezenfektan 50 mL şırınga kullanarak seçim kullanarak cerrahi sitesi sulamak. Zil çözüm pulsed lavaj sistemi ile yeterli miktarda (en az 3 L) ile sulamak. Ayırıcı ortak27dengelemek gerekli olabilir.</li>
	<li>Yarayı tekrar Emilebilen derin dikiş antimikrobiyal kaplı kapsül veya Şerit (örgülü polyglactin dikiş, triclosan kaplı, USP 2) ve subkutan doku (örgülü polyglactin dikiş, triclosan kaplı, USP 0) için kullanarak kapatın. Deri kesintiye uğramış dikiş (monofilic polipropilen, USP 0 veya USP 2-0) sigara resorbing kullanarak kapatın.</li>
</ol>4. sonication
Not: kesinlikle aseptik çalışmaya dikkat edin. Bir sınıf II Biyogüvenlik Bank Laminer hava akımı ile daha da explanted malzeme işlemek için kullanın.
<ol><li>Ameliyathane üzerinden explanted protez tutan plastik konteyner açın (bkz. Adım 3.2) Laminer hava akış çalışma tezgah altında ve explanted yabancı cisim kadar steril % 0,9 Sodyum Klorür çözüm kaplı en az % 80 (yaklaşık 500-800 mL) ekleyin.</li>
	<li>Plastik konteyner kapatın. İyice sallayın veya 30 s. Transfer plastik konteyner içine sonication banyo için yüksek yoğunluklu bir girdap Mikser kullanarak plastik konteyner kışkırtmak. Sıvı sonication banyoda kontrol. Not: Sonication banyo sıvı düzeyi içinde plastik konteyner ile aynı olmalıdır. Plastik kap su basmış olamaz ve gerekli eklemek veya sıvı sonication banyodan kaldırmak emin olun.</li>
	<li>Numune frekans 40 ± 2 kHz ve güç yoğunluğu 0.22 ± 0,04 W/cm2ile 5 min için solüsyon içeren temizleyicide. Sallamak ya da girdap numune iyice için 30 s. Not: Sonication kez 1-5 dk arasında biyofilmler, bakteriyel canlılığı28üzerinde herhangi bir etkisi olmadan çözülmesi için en iyisidir.</li>
	<li>Laminar akış tezgah içinde 50 mL sıvı sonication toplamak ve steril, sıkı kapalı tüp için transfer.</li>
	<li>Bir konsantre sonication sıvı oluşturmak için tüp 10 mL kalan hacmi bırakarak 4200 x g., 10 dk santrifüj kapasitesi, kalan süpernatant bir pipet ile atın. Pelet pipetting ve vortexing tarafından resuspend.</li>
	<li>Uygun kültür ortamı (örneğin kan agar, çikolata agar, Sabouraud agar, Schaedler'ın agar, sefaloridin Vankomisin agar veya thioglycolate suyu) 0.5 mL sıvı konsantre sonication her ile aşılamak. Pediatrik kan kültür şişeye 2 mL ile yukarıda açıklandığı gibi aşılamak (bkz. Adım 1.7.1). Konsantre sonication sıvı 1 mL PCR analiz için katkı olmadan bir kan toplama tüp içine aktarın.</li>
	<li>İnoculated kültür medya da kuluçka (35 ° C, % 5 CO2) aktarın. Kültürler için 14 gün kuluçkaya ve büyüme için her gün kontrol edin.</li>
	<li>14 gün sonra hiçbir büyüme ve negatif olarak rapor kültürlerle atmak. Büyüme algılanırsa, standart kimlik teknikleri ve duyarlılık testi kullanılarak patojen kimlik taşımak. Sonuç cerrah gecikmeden rapor. Not: Burada, patojenler tanımlaması matris yardımlı lazer desorbtion/iyonlaşma kullanılarak gerçekleştirilmiştir - uçuş (MALDI-TOF) spektroskopisi, zaman. Antimikrobiyal duyarlılık test bir semiautomated analyzer29,30,31ile gerçekleştirildi.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Wimmer, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+an+interdisciplinary+therapy+algorithm+in+patients+with+prosthetic+joint+infections.">Evaluation of an interdisciplinary therapy algorithm in patients with prosthetic joint infections.</a> Int Orthop. 37 (11), 2271-2278 (2013).</li><li>Trampuz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+fluid+leukocyte+count+and+differential+for+the+diagnosis+of+prosthetic+knee+infection.">Synovial fluid leukocyte count and differential for the diagnosis of prosthetic knee infection.</a> Am J Med. 117 (8), 556-562 (2004).</li><li>Randau, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+in+serum+and+in+synovial+fluid+enhances+the+differentiation+between+periprosthetic+joint+infection+and+aseptic+loosening.">Interleukin-6 in serum and in synovial fluid enhances the differentiation between periprosthetic joint infection and aseptic loosening.</a> PLoS One. 9 (2), e89045 (2014).</li><li>Deirmengian, C. A., Wongworawat, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Editor's+spotlight/take+5:+diagnosing+periprosthetic+joint+infection:+has+the+era+of+the+biomarker+arrived.">Editor's spotlight/take 5: diagnosing periprosthetic joint infection: has the era of the biomarker arrived.</a> Clin Orthop Relat Res. 472 (111), 3250-3253 (2014).</li><li>Gollwitzer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+peptides+and+proinflammatory+cytokines+in+periprosthetic+joint+infection.">Antimicrobial peptides and proinflammatory cytokines in periprosthetic joint infection.</a> J Bone Joint Surg Am. 95 (7), 644-651 (2013).</li><li>Trampuz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonication+of+removed+hip+and+knee+prostheses+for+diagnosis+of+infection.">Sonication of removed hip and knee prostheses for diagnosis of infection.</a> N Engl J Med. 357 (7), 654-663 (2007).</li><li>Achermann, Y., Vogt, M., Leunig, M., Wust, J., Trampuz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+diagnosis+of+periprosthetic+joint+infection+by+multiplex+PCR+of+sonication+fluid+from+removed+implants.">Improved diagnosis of periprosthetic joint infection by multiplex PCR of sonication fluid from removed implants.</a> J Clin Microbiol. 48 (40), 1208-1214 (2010).</li><li>Portillo, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplex+PCR+of+sonication+fluid+accurately+differentiates+between+prosthetic+joint+infection+and+aseptic+failure.">Multiplex PCR of sonication fluid accurately differentiates between prosthetic joint infection and aseptic failure.</a> J Infect. 65 (6), 541-548 (2012).</li><li>Qu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PCR-based+diagnosis+of+prosthetic+joint+infection.">PCR-based diagnosis of prosthetic joint infection.</a> J Clin Microbiol. 51 (8), 2742-2746 (2013).</li><li>Borde, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+prosthetic+joint+infections+using+UMD-Universal+Kit+and+the+automated+multiplex-PCR+Unyvero+i60+ITI((R))+cartridge+system:+a+pilot+study.">Diagnosis of prosthetic joint infections using UMD-Universal Kit and the automated multiplex-PCR Unyvero i60 ITI((R)) cartridge system: a pilot study.</a> Infection. 43 (5), 551-560 (2015).</li><li>Hischebeth, G. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unyvero+i60+implant+and+tissue+infection+(ITI)+multiplex+PCR+system+in+diagnosing+periprosthetic+joint+infection.">Unyvero i60 implant and tissue infection (ITI) multiplex PCR system in diagnosing periprosthetic joint infection.</a> J Microbiol Methods. 121, 27-32 (2016).</li><li>Prieto-Borja, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+commercial+multiplex+PCR+(Unyvero+i60(R))+designed+for+the+diagnosis+of+bone+and+joint+infections+using+prosthetic-joint+sonication.">Evaluation of a commercial multiplex PCR (Unyvero i60(R)) designed for the diagnosis of bone and joint infections using prosthetic-joint sonication.</a> Enferm Infecc Microbiol Clin. , (2016).</li><li>Bernau, A., Heeg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraarticular+punctures+and+injections:+indications--prevention+of+infection--technique--complications.">Intraarticular punctures and injections: indications--prevention of infection--technique--complications.</a> Orthopade. 32 (6), 548-569 (2003).</li><li>Courtney, P., Doherty, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Joint+aspiration+and+injection+and+synovial+fluid+analysis.">Joint aspiration and injection and synovial fluid analysis.</a> Best Pract Res Clin Rheumatol. 27 (2), 137-169 (2013).</li><li>Arnold, S., Meurer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-articular+punctures+and+injections.">Intra-articular punctures and injections.</a> Orthopade. 42 (12), 1075-1086 (2013).</li><li>Geller, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospective+Comparison+of+Blood+Culture+Bottles+and+Conventional+Swabs+for+Microbial+Identification+of+Suspected+Periprosthetic+Joint+Infection.">Prospective Comparison of Blood Culture Bottles and Conventional Swabs for Microbial Identification of Suspected Periprosthetic Joint Infection.</a> J Arthroplasty. 31 (8), 1779-1783 (2016).</li><li>Cross, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+percutaneous+joint+aspiration+and+synovial+biopsy+in+identifying+culture-positive+infected+hip+arthroplasty.">Utility of percutaneous joint aspiration and synovial biopsy in identifying culture-positive infected hip arthroplasty.</a> Skeletal Radiol. 43 (2), 165-168 (2014).</li><li>Berry, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Revision total hip and knee arthroplasty. , (2012).</li><li>Parvizi, J., Gehrke, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+Consensus+Group+on+Periprosthetic+Joint,+I.+Definition+of+periprosthetic+joint+infection.">International Consensus Group on Periprosthetic Joint, I. Definition of periprosthetic joint infection.</a> J Arthroplasty. 29 (7), 1331 (2014).</li><li>Ghanem, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perioperative+antibiotics+should+not+be+withheld+in+proven+cases+of+periprosthetic+infection.">Perioperative antibiotics should not be withheld in proven cases of periprosthetic infection.</a> Clin Orthop Relat Res. 461, 44-47 (2007).</li><li>Wirtz, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> AE-Manual der Endoprothetik - Knie. , (2011).</li><li>Claes, L. K., Peter, , Perka, , Carsten, , Rudert, , Maximilian, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> AE-Manual der Endoprothetik - H&#252;fte und H&#252;ftrevision. , (2012).</li><li>Herrmann, P., Thoele, P., Heppert, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infected+knee+prostheses.+Part+2:+chronic+late+infections.">Infected knee prostheses. Part 2: chronic late infections.</a> Oper Orthop Traumatol. 25 (3), 242-250 (2013).</li><li>Zweymuller, K. A., Steindl, M., Melmer, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anterior+windowing+of+the+femur+diaphysis+for+cement+removal+in+revision+surgery.">Anterior windowing of the femur diaphysis for cement removal in revision surgery.</a> Clin Orthop Relat Res. 441, 227-236 (2005).</li><li>Osmon, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbiology+and+Antimicrobial+Challenges+of+Prosthetic+Joint+Infection.">Microbiology and Antimicrobial Challenges of Prosthetic Joint Infection.</a> J Am Acad Orthop Surg. 25, 17-19 (2017).</li><li>Renner, L., Perka, C., Trampuz, A., Renz, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+periprosthetic+infections.">Treatment of periprosthetic infections.</a> Chirurg. 87 (10), 831-838 (2016).</li><li>Kuzyk, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-stage+revision+arthroplasty+for+management+of+chronic+periprosthetic+hip+and+knee+infection:+techniques,+controversies,+and+outcomes.">Two-stage revision arthroplasty for management of chronic periprosthetic hip and knee infection: techniques, controversies, and outcomes.</a> J Am Acad Orthop Surg. 22 (3), 153-164 (2014).</li><li>Kobayashi, N., Bauer, T. W., Tuohy, M. J., Fujishiro, T., Procop, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brief+ultrasonication+improves+detection+of+biofilm-formative+bacteria+around+a+metal+implant.">Brief ultrasonication improves detection of biofilm-formative bacteria around a metal implant.</a> Clin Orthop Relat Res. 457, 210-213 (2007).</li><li>Dubois, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performances+of+the+Vitek+MS+matrix-assisted+laser+desorption+ionization-time+of+flight+mass+spectrometry+system+for+rapid+identification+of+bacteria+in+routine+clinical+microbiology.">Performances of the Vitek MS matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry system for rapid identification of bacteria in routine clinical microbiology.</a> J Clin Microbiol. 50 (8), 2568-2576 (2012).</li><li>Cherkaoui, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+two+matrix-assisted+laser+desorption+ionization-time+of+flight+mass+spectrometry+methods+with+conventional+phenotypic+identification+for+routine+identification+of+bacteria+to+the+species+level.">Comparison of two matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry methods with conventional phenotypic identification for routine identification of bacteria to the species level.</a> J Clin Microbiol. 48 (4), 1169-1175 (2010).</li><li>Barenfanger, J., Drake, C., Kacich, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+and+financial+benefits+of+rapid+bacterial+identification+and+antimicrobial+susceptibility+testing.">Clinical and financial benefits of rapid bacterial identification and antimicrobial susceptibility testing.</a> J Clin Microbiol. 37 (5), 1415-1418 (1999).</li><li>Tande, A. J., Patel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prosthetic+joint+infection.">Prosthetic joint infection.</a> Clin Microbiol Rev. 27 (2), 302-345 (2014).</li><li>Portillo, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advantages+of+sonication+fluid+culture+for+the+diagnosis+of+prosthetic+joint+infection.">Advantages of sonication fluid culture for the diagnosis of prosthetic joint infection.</a> J Infect. 69 (1), 35-41 (2014).</li><li>Scorzolini, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonication+technique+improves+microbiological+diagnosis+in+patients+treated+with+antibiotics+before+surgery+for+prosthetic+joint+infections.">Sonication technique improves microbiological diagnosis in patients treated with antibiotics before surgery for prosthetic joint infections.</a> New Microbiol. 37, 321-328 (2014).</li><li>Zhai, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meta-analysis+of+sonication+fluid+samples+from+prosthetic+components+for+diagnosis+of+infection+after+total+joint+arthroplasty.">Meta-analysis of sonication fluid samples from prosthetic components for diagnosis of infection after total joint arthroplasty.</a> J Clin Microbiol. 52 (5), 1730-1736 (2014).</li><li>Panousis, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poor+predictive+value+of+broad-range+PCR+for+the+detection+of+arthroplasty+infection+in+92+cases.">Poor predictive value of broad-range PCR for the detection of arthroplasty infection in 92 cases.</a> Acta Orthop. 76 (3), 341-346 (2005).</li><li>Rak, M., KavcIc, M., Trebse, R., Co, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+bacteria+with+molecular+methods+in+prosthetic+joint+infection:+sonication+fluid+better+than+periprosthetic+tissue.">Detection of bacteria with molecular methods in prosthetic joint infection: sonication fluid better than periprosthetic tissue.</a> Acta Orthop. 87 (4), 339-345 (2016).</li><li>Li, Z., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+value+of+a+PCR-based+technique+for+prosthetic+joint+infection.">Diagnostic value of a PCR-based technique for prosthetic joint infection.</a> J Clin Microbiol. 52 (6), 2281-2282 (2014).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Yabancı cisim enfeksiyondur ortopedik ortaya çıkan bir sorunu ve travma cerrahisi pahalı tedavi, uzun yatış ve etkilenen eklemlerin fonksiyonel eksikliği. Ayırıcı tanı meydan okuyor. Yabancı cisim tanılamak için güvenilir yöntemleri enfeksiyonlar ilgili ve birçok araştırmacılar ve klinisyenler dikkatini bu konuya daha kesin bulmak için çabalıyor veriyoruz. Bugüne kadar birçok farklı tanılama araçları olmak değerlendirildi ve tanı yolu32yılında uygulanan.
Sonication yordamı doku örnekleri6geleneksel kültürleri daha iyi hassasiyet gösteren çok değerli bir yöntemdir. Bizim çalışmada, sıvı sonication kültürler bir özgüllüğü %61.5 %88.9 bir hassasiyet var gösterdi. Doku örnekleri ve ortak boğulmadan geleneksel kültürler sırasıyla % 66,7 bir duyarlılık ve %82.3 %84.6, özgüllük ile vardı. Diğer araştırmacılar bu geleneksel Mikrobiyolojik yordamlar6,33,34,35için benzer sonuçlar gösterir. Bu kez sonication yordam örnekleri işlemede özel bakım alınmalıdır kirlenme için eğilimli olduğunu eleştirdi.
Doku örnekleri veya sıvı DNA bir etken patojen algılama olasılığı merak uyandırıcı. NAT içinde birkaç saat, zaman alan Mikrobiyolojik kültür yöntemleri ile karşılaştırıldığında sonuçlar hızlı bir işlemdir. Şüphesiz, NAT içinde patojenler hafiye iyi bir duyarlılığa sahiptir ama kirleticiler, böylece özgüllük36eksik algılama riskini tutun. PJI teşhis bu PCR tekniği büyük yarar özellikle antibiyotik tedavisi cerrahi yakın ya da daha uzun bir dönem7,8için alınan hastalarda belgelenmiştir. Çalışmalar NAT sonication sıvı daha fazla duyarlılık ve özgüllük37artabilir öneririz. Ne yazık ki, bu teknik laboratuar, onun zaman alıcı iş akışı nedeniyle rutin olarak kullanılamaz.
Genel olarak bazı sınırlamalar PCR tekniği vardır: NAT ile kalıcı ve kalıcı olmayan bakteriler, sonuçların yorumlanması zor yapım arasındaki hiçbir farklılaşma DNA algılar. Geniş menzilli PCR patojenler37arasında ayırt değil 16S ribozomal ribonükleik asit (16S rRNA), yalnızca algılar. Daha belirli sistemlere antibiyotik direnci gen kodlanmış işaretleri rutin olarak algılamaz. Hedeflenen bir antibiyotik tedavisi bu nedenle daha fazla duyarlılık test olmadan sınırlı olabilir.
Bu çalışmada uygulanan sistem bazı belirli bakteriler arasında ayırt ve gen kodlanmış direnç işaretleri tanımlayan bu sınırlamalar üstesinden gelir. Genel olarak, NAT deneyleri PJI7,8,9,38onaylamak için hızlı ve yararlı tamamlayıcı düşünülebilir.
Önceden ortak aspirasyon ve cerrahi plan gereklidir: örnek kapları steril ve hazır olmalı ve komut istemi örnek taşıma kullanılabilir olması gerekir. Cerrahlar onların microbiologists planlanan yordamlar ve ne kısa bir örnek malzeme bekliyoruz. Ne zaman gerçekleştirme ortak aspirasyon, kesinlikle steril koşullar, eklem iyatrojenik enfeksiyonu önlemek için sağlanması gerekir. Adipose hastalarda eklem ponksiyon zor olabilir ve floroskopik rehberlik yardımcı olabilir. Gözden geçirme protezi ameliyatı çok yüksek bir seviyede uzmanlık gerektirir ve sadece yetenekli bir cerrah tarafından gerçekleştirilmelidir. Explanted malzeme gerekenden daha fazla ameliyat odasına tutulmalıdır değil ama mikrobiyolog için en kısa zamanda gönderilecektir. Bir çok önemli bu protokol içinde olası bulaşma riskini parçasıdır. Sadece örnekleri toplama iken, aynı zamanda Mikrobiyoloji laboratuarında örnekleri işleme sırasında tüm personel dahil (ortopedik cerrah, hemşire, teknisyen, microbiologists) gerekir hızlı ve doğru iş ve yordamlar, uygun eğitim var.
Sonication ve NAT implantı ilişkili enfeksiyonlar teşhis değerli araçlardır. Bununla birlikte, sonuçlar her zaman dikkatle sorguya. Ortopedik Cerrahlar, microbiologists ve enfeksiyon hastalıkları uzmanları ve patolog bireyselleştirilmiş tedavi stratejisi üzerinde anlaşmaya bir yuvarlak masa tartışma sonuçlarını tartışmak öneririz.
Tanı bu tekniği uygulamak için PJI yolunu birkaç avantajları olabilir. Bu saat içinde bir sonuç ile hızlı bir kontrol var. Birkaç kodlanmış gen direnç işaretleri analiz nedeniyle, bir hedefe yönelik antibiyotik tedavi klinik seyir içinde çok erken bir aşamada yer alabilir. Bir yan etki olarak geniş menzilli antibiyotik gerçekten gereken yerlere endikasyonlar için kaydedilebilir. Diğer örnek türleri (örneğin doku örnekleri, temizleme bezi, Hematom, vb) bizim protokole göre soruşturma olmaktır. PCR kartuş kapalı bir sistem olduğu için hiçbir sorun giderme gerekli veya kullanıcı tarafında mümkün. Herhangi bir uyum Protokolü'nün üretici tarafından uygulanması gerekir. Ayrıntı yok daha yeni sürümleri tam değişiklikler üzerinde genel yapılır ancak değişiklikler yazılım ve donanım (kartuş) sistemi geliştirmek için üretici tarafından sürekli olarak yapılır.

Acı arthroplasties ortopedik cerrahi tanı bir sorun vardır. Aseptik gevşeme sonra PJI implant başarısızlık çoğu ikinci nedeni ve yıkıcı bir komplikasyon artroplasti ameliyattan sonra sunuyor. PJI tedavi etmek zor ve teşhis etmek zor. Bir PJI olacak büyük olasılıkla sonucunda tekrarlayan enfeksiyon tanısında önemli morbidite, fonksiyon kaybı ve yaşam kalitesi kaybı ile özledim. Bu nedenle, enfeksiyon tedavi edici önlemler başlatılan önce acı protezi ile sunan tüm hastalarda ekarte.
Hasta Tarih, klinik muayene, kan sınav CRP ve beyaz küre sayısı, hem de Radyografi veya etkilenen eklem szintigraphy için temel tanılama1oluşturmaktadır. Preoperatif rutin de mümkün olan her yerde steril koşullar altında ortak bir aspirasyon içermelidir. Edinilen aspiratı daha fazla teşhis çok değerli bir malzemedir.
Hücre sayısı ve hücre farklılaşması ortak aspiratı içinde köklü deneyleri2olarak yanı sıra, protein biyolojik tespiti fark tanılama3,4,5' te yardımcı olabilir. Geleneksel Mikrobiyolojik kültür patojen algılama altın standart kalır. Gram pozitif ve gram-negatif bakteriler hem yapışık implant yüzeyler için neden biyofilmler, PJI önemli bir patojenik faktör vardır. Bu nedenle, 2007'de, patojen algılama izin vermek için kaldırılan implantlar üzerinde biyofilmler engellemeden yabancı vücut ilişkili enfeksiyonların ortopedik cerrahi, teşhis sonication prosedürü uygulanmıştır. Bakteri böylece dinlenme onların formundan etkin forma algılama kültüründe yapma, tekrar mümkün alınır. Kaldırılan implantlar sonication kültürler doku örnekleri (%78.5 %60.8 vs)6daha yüksek bir duyarlılık gösterdi.
Nükleik asit amplifikasyon test (NAT), PCR gibi son zamanlarda klinisyenler ve microbiologists PJI tanılamak için kapsamı taşındı. Ameliyat öncesi antibiyotik tedavisi alan özellikle hastalarda tanı PCR etken organizmalar7,8,9belirlenmesinde faydalıdır gösterildi. Son zamanlarda, implant ve doku enfeksiyonları (ITI) için özel olarak tasarlanmış yeni bir multiplex PCR sistemi, kullanılmaya başlandı. Bu kartuş tabanlı sistem patojenler tanımlanması için genomik işaretleri ve antibiyotik direnci işaretleri sunar. Uygulama yelpazesini arasında (protez eklem enfeksiyonları, cerrahi sitesi enfeksiyonlar, kardiyoloji ile ilgili enfeksiyonlar, kateter ilişkili enfeksiyonlar, Diyabetik ayak enfeksiyonları, derin cilt ve doku enfeksiyonları, implant enfeksiyonları, çok sayıda göstergeleridir ve yanık yara enfeksiyonları), ve örnek malzeme geniş bir panel-ebilmek var olmak kullanılmış için bu tekniği (sonication sıvı, sinovyal sıvı, temizleme bezi, doku, irin, Aspire edin/çıktı ve biyofilm)10,11,12.
Hız ile karşılaştırıldığında geleneksel Mikrobiyoloji, yordamın en büyük avantajdır: etken patojen saat içinde tanımlanabilir. Ayrıca, bu PCR sistemi geniş bir panel hedeflenen antibiyotik tedavisi inisiyasyon erken sağlayan gen kodlanmış direnç işaretlerinin algılar. PCR yardımı ile cerrahlar virüslü ve sigara-enfekte hastalarda tanı yordamı11çok erken bir aşamada birbirinden ayırt etmek mümkün olabilir. Burada, hızlı bir şekilde ortak aspiratı ve sonication sıvı PJI teşhis bu çoklu PCR gerçekleştirmek için iletişim kuralı mevcut.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="900">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">sterile plastic container&#160;</td>
			<td style="width:333px;">Lock &#38; Lock, Distributor ISI GmbH, Solingen, Germany</td>
			<td style="width:119px;">EAN 8803733184403</td>
			<td style="width:232px;">Transport container for implants</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bactosonic 14.2&#160;</td>
			<td>Bactosonic, Bandelin, Berlin, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">3290</td>
			<td>&#34;Sonication machine&#34;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">50ml Falcon tubes</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">352070</td>
			<td>Centrifugation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PEDS medium blood culture flasks&#160;</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">442194</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Columbia agar with 5% sheep blood</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">254071</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mac Conkey agar</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">254078</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">chocolate agar&#160;</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">254089</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">sabouraud agar&#160;</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">254096</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">thioglycolate bouillon&#160;</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">221788</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Schaedler agar</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">254084</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">kanamycin/vancomycin agar</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">254077</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bactec FX blood culture system&#160;</td>
			<td>Becton &#38; Dickinson, Heidelberg, Germany</td>
			<td style="width:119px;">441386/441385</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Unyvero A50 Analyzer</td>
			<td style="width:333px;">Curetis, Holzgerlingen, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">60001</td>
			<td>PCR machine</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Unyvero L4 Lysator</td>
			<td style="width:333px;">Curetis, Holzgerlingen, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">60002</td>
			<td>PCR machine</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Unyvero C8 Cockpit</td>
			<td style="width:333px;">Curetis, Holzgerlingen, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">60003</td>
			<td>PCR machine</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Unyvero M1 Masterix Tube</td>
			<td style="width:333px;">Curetis, Holzgerlingen, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">10002</td>
			<td>consumables PCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Unyvero i60 ITI Cartridge</td>
			<td style="width:333px;">Curetis, Holzgerlingen, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">10040</td>
			<td>consumables PCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Unyvero Sample Tube Cap</td>
			<td style="width:333px;">Curetis, Holzgerlingen, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">10004</td>
			<td>consumables PCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Unyvero Sample Tube</td>
			<td style="width:333px;">Curetis, Holzgerlingen, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">10003</td>
			<td>consumables PCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">S-Monovette 2.7ml</td>
			<td style="width:333px;">Sarstedt AG, N&#252;mbrecht, Germany</td>
			<td style="width:119px;">05.1729.001&#160;</td>
			<td>Transport container (aspirate)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">scalpel typ 11</td>
			<td style="width:333px;">pfm medical, Cologne, Germany</td>
			<td align="right">200130011</td>
			<td>scalpel for stab incision</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PP Container 70mL 55x45mm</td>
			<td style="width:333px;">Sarstedt AG, N&#252;mbrecht, Germany</td>
			<td align="right">759,922,721</td>
			<td>Transport container (tissue specimen)</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Vicryl Plus</td>
			<td style="width:333px;">Johnson&#38;Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany</td>
			<td>VCP247H</td>
			<td>surgical suture material</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Prolene 0</td>
			<td style="width:333px;">Johnson&#38;Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7920H</td>
			<td>surgical suture material</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Prolene 2/0</td>
			<td style="width:333px;">Johnson&#38;Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7697H</td>
			<td>surgical suture material</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Kodan&#160; Tinktur forte farblos</td>
			<td style="width:333px;">Sch&#252;lke &#38; Mayr GmbH, Norderstedt, Germany</td>
			<td align="right" style="width:119px;">104005</td>
			<td>alcoholic skin disinfectant</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

novel diagnostics in revision arthroplasty: implant sonication and multiplex polymerase chain reaction

Ortopedik hastalarda, yabancı vücut ilişkili enfeksiyonlar, özellikle periprosthetic eklem enfeksiyonları (PJIs), artroplasti yıkıcı bir komplikasyonu vardır. Enfeksiyon karmaşık tedavi gerektirir, uzun süre hastanede ve nedenleri önemli maliyeti içinde neden olabilir. Birden çok cerrahi revizyonlar yaşam kalitesi olduğu gibi bu hastalarda, gerekli işlevi de bir kaybı olabilir.
Rutin ameliyat öncesi tanılama kan sınav için C - reaktif protein (CRP) ve diğer biyolojik, yanı sıra ortak aspiratı analizi hücre sayısı, farklılaşma ve kültür içerir. Histoloji ve Mikrobiyoloji için intraoperatif örnekler de standart bir prosedür vardır. Kaldırılan sonication, mikrobiyoloji, moleküler biyoloji teknikleri uygulanması ile birlikte implantlarda Mikrobiyolojik inceleme iki roman teknik PJI fark tanılama geliştirmek için şu anda istihdam temsil eder.
Burada bir kartuş tabanlı multiplex Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) sistemi kullanarak ortak aspiratı ve sonication sıvı, analiz step-wise prosedürü mevcut. Sonuçları PJI için geleneksel kültür ve fikir birliği kriterleri karşı eşleştirilmiştir. Doku biyopsisi, geleneksel Mikrobiyolojik kültürler ortak aspiratı ve sonication sıvı sırasıyla % 66,7, % 66,7 ve %88.9, duyarlılığını gösterdi ve özgüllüğü %82.3 %54.6 ve % 61.5, anılan sıraya göre. PCR tanılama sonication sıvı ve sırasıyla %50.0 ve % 55.6, duyarlılığını gösterdi eklem sıvısı ve her iki bir özgüllüğü %100,0. Kombine hem PCR tanılama % 66,7 bir duyarlılık ve özgüllük %100,0 vardı. Multiplex PCR bu nedenle ılımlı duyarlılık ama PJI teşhis yüksek özgüllük ile hızlı bir tanı aracı sunar.

Fikir birliği kurul, kas-iskelet enfeksiyon toplum (MSIs), tarafından tanımlanan bir PJI varlığı bir önemli ölçüt veya en az üç beş küçük ölçüt dışarı ne zaman yoktu kanıtlanmış olarak kabul edildi. Önemli ölçütleri bir fistül varlığı veya algılama bir patojenin iki ayrı Mikrobiyolojik örnekleri içerir. Küçük ölçüt içerir pozitif hücre sayısı (> 3000 lökosit/µL) veya pozitif hücre farklılaşması (> % 85 nötrofil granülosit) ortak aspiratı içinde olumlu CRP ve sedimentasyon hızı kan örnekleri, doku örneklerinde olumlu Histoloji veya Algılama işlemi, bir patojenin bir Mikrobiyolojik örnek19. Duyarlılık ve özgüllük nükleik asit amplifikasyon test (NAT), MSI'LERİNİ altın standart göre hesaplanır. Hasta detayları tespit, patojenleri de dahil olmak üzere, Tablo 1' de verilmiştir.
Kendi sonuçlar ılımlı bir duyarlılık PCR için tanılama sonication sıvı ve ortak aspiratı (%50.0 ve % 55.6) ama çok güçlü bir özgüllüğü % 10011gösterdi. Ne zaman PCR tanılama (Toplam n 62 testleri =) olumlu bir bulgu ortak aspiratı gösterdi (n = 31) veya sonication sıvı (n = 31), aynı patojen daha sonra bir geleneksel Mikrobiyolojik kültürler içinde tespit edildi. Farklı örnekler PCR (bkz. şekil 1) hiçbir yanlış pozitif gösterdi-enfeksiyon vakaları neden.
PCR tanılama geleneksel Mikrobiyolojik kültür yöntemleri ile kanıtlanmış bazı patojenlerin algılamak başarısız oldu. 16 üzerinden 6 (%37.0) sonication sıvı örneklerini gerçek patojenler ve 13 üzerinden 5 (%38.0) patojenler ile ortak sıvı kültür PCR algılama tarafından cevapsız. Çoğunlukla, PCR tanılama Koagülaz-negatif stafilokoklar (8 dışarı-in 11) tespiti özledim. Her iki malzeme (eklem aspiratı ve sonication sıvısı, "PCR havuza alınmış") kombine PCR tanılama 12 dışarı-in 18 enfeksiyon durumlarda doğru tespit (duyarlılık % 66,7, % 95 CI: %41.0 %86,7 için bkz: Tablo 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55147/55147fig1.jpg"> Şekil 1: NAT Özeti sonuç. Grafik toplu hasta numuneleri özetlenen sonuçları gösterilmektedir. Sağ taraftaki hasta sol tarafında PJI ölçütlerle eşleşen grup vermedi grup olmasıdır. Çubuklar nükleik asit güçlendirme yöntemleri gösterir. Yanlış pozitif ve yanlış negatifleri kırmızıyla toplamın yüzdesi olarak gösterilir. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55147/55147fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody><tr><td>Ortak</td>
			<td>Gözden geçirme nedeni</td>
			<td>Maçlar MSI'LERİNİ kriterler?</td>
			<td>Önceki antibiyotik tedavisi?</td>
			<td>Sıvı sonication kültür</td>
			<td>Ortak aspiratı kültür</td>
			<td>NAT sonication kültür</td>
			<td>NAT ortak aspiratı</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Dermabacter hominis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Leifsonia Aquatica</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>istikrarsızlık</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik luksasyonu</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Stafilokok haemolyticus</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>istikrarsızlık</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Pseudomonas aeruginosa</td>
			<td>Pseudomonas aeruginosa</td>
			<td></td>
			<td>Pseudomonas aeruginosa</td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Escherichia coli</td>
			<td>Escherichia coli</td>
			<td>Escherichia coli</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Corynebakterium spp.</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>Stafilokok Aureus</td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Streptokok agalacticae</td>
			<td>Streptokok agalacticae</td>
			<td>Streptokok agalacticae</td>
			<td>Streptokok agalacticae</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Evet</td>
			<td></td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Staphlococcu epidermidis</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td></td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td></td>
			<td>Stafilokok Aureus</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Enterokok faecialis</td>
			<td>Enterokok faecialis</td>
			<td>Enterokok spp.</td>
			<td>Enterokok spp.</td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Enterocuccus faecalistir</td>
			<td>Enterocuccus faecalistir</td>
			<td>Enterokok spp.</td>
			<td>Enterokok spp.</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 1: hasta ayrıntıları ve algılanan patojenler. Sekmeli sonuçlar hasta ayrıntıları gözden geçirme cerrahi, neden eşleştirme MSI'LERİNİ ölçütü dahil, ve geleneksel Mikrobiyoloji ve NAAT analiz algılanan patojenler.
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td>Ölçüt</td>
			<td>PCR solüsyon içeren temizleyicide</td>
			<td>PCR aspiratı</td>
			<td>Havuza alınan PCR</td>
		</tr>
<tr>
<td>P değeri</td>
			<td>0.0036</td>
			<td>0.0013</td>
			<td>0,0001</td>
		</tr>
<tr>
<td>Duyarlılık</td>
			<td>%50.0</td>
			<td>%55.6</td>
			<td>% 66,7</td>
		</tr>
<tr>
<td>Özgüllük</td>
			<td>%100,0</td>
			<td>%100,0</td>
			<td>%100,0</td>
		</tr>
<tr>
<td>Pozitif öngörü değeri</td>
			<td>%100,0</td>
			<td>%100,0</td>
			<td>%100,0</td>
		</tr>
<tr>
<td>Negatif değeri</td>
			<td>%59.1</td>
			<td>%61.9</td>
			<td>%68,4</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 2: Mikrobiyolojik yöntemleri sonuçlarını. Sekmeli sonuçlar sonication sıvı, ortak aspiratı ve havuza alınan PCR tanılama PCR değerlendirilmesi. N sırasıyla 31 aspiratı ve sonication, numune = n = 62 havuza alınan PCR veriler için.

Watch this Scientific Journal Video about Novel Diagnostics in Revision Arthroplasty: Implant Sonication and Multiplex Polymerase Chain Reaction at JoVE.com

Novel Diagnostics in Revision Arthroplasty: Implant Sonication and Multiplex Polymerase Chain Reaction

Acı artroplasti ndaki fark teşhis tedavi başarı için çok önemlidir. Ortak aspirasyon preoperatively düzenli olarak gerçekleştirilir. Multiplex Polimeraz zincir reaksiyonu ortak aspiratı ve sonication sıvı hızlı patojen algılama bu örnekler için uygun bir araç tanımlanır.

Revizyon artroplastisi roman tanılama: Sonication ve Multiplex Polimeraz zincir reaksiyonu

In orthopedic patients, foreign body-associated infections, especially periprosthetic joint infections (PJIs), are a devastating complication of ...

novel-diagnostics-revision-arthroplasty-implant-sonication-multiplex

Research

JoVE Journal

Medicine

11.0K Görüntüleme.  University Hospital Bonn. Acı artroplasti ndaki fark teşhis tedavi başarı için çok önemlidir. Ortak aspirasyon preoperatively düzenli olarak gerçekleştirilir. Multiplex Polimeraz zincir reaksiyonu ortak aspiratı ve sonication sıvı hızlı patojen algılama bu örnekler için uygun bir araç tanımlanır.

Video: Novel Diagnostics in Revision Arthroplasty: Implant Sonication and Multiplex Polymerase Chain Reaction

Reverse Total Shoulder Arthroplasty

Reverse total shoulder arthroplasty was initially approved for use in rotator cuff arthropathy and well as chronic pseudoparalysis without arthritis in patients who were not appropriate for tendon transfer reconstructions. Traditional surgical options for these patients were limited and functional results were sub-optimal and at times catastrophic. The use of reverse shoulder arthroplasty has been found to effectively restore these patients function and relieve symptoms associated with their disease. The procedure can be done through two approaches, the deltopectoral or the superolateral. Complication rates associated with the use of the prosthesis have ranged from 8-60% with more recent reports trending lower as experienced is gained. Salvage options for a failed reverse shoulder prosthesis are limited and often have significant associated disability. Indications for the use of this prosthesis continue to be evaluated including its use for revision arthroplasty, proximal humeral fracture and tumor. Careful patient selection is essential because of the significant risks associated with the procedure.

Reverse total shoulder arthroplasty is indicated for the treatment of conditions that cannot be treated with conventional arthroplasty or other procedures. These primarily include degenerative and incapacitating conditions with irreparable rotator cuff and loss of the normal biomechanical coupling of the shoulder.

Ters Toplam Omuz Artroplasti

Reverse total shoulder arthroplasty was initially approved for use in rotator cuff arthropathy and well as chronic pseudoparalysis without arthritis in ...

Tıp

RNAscope for In situ Detection of Transcriptionally Active Human Papillomavirus in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

The &#39;gold standard&#39; for oncogenic HPV detection is the demonstration of transcriptionally active high-risk HPV in tumor tissue. However, detection of E6/E7 mRNA by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) requires RNA extraction which destroys the tumor tissue context critical for morphological correlation and has been difficult to be adopted in routine clinical practice. Our recently developed RNA in situ hybridization technology, RNAscope, permits direct visualization of RNA in formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tissue with single molecule sensitivity and single cell resolution, which enables highly sensitive and specific in situ analysis of any RNA biomarker in routine clinical specimens. The RNAscope HPV assay was designed to detect the E6/E7 mRNA of seven high-risk HPV genotypes (HPV16, 18, 31, 33, 35, 52, and 58) using a pool of genotype-specific probes. It has demonstrated excellent sensitivity and specificity against the current &#39;gold standard&#39; method of detecting E6/E7 mRNA by qRT-PCR. HPV status determined by RNAscope is strongly prognostic of clinical outcome in oropharyngeal cancer patients.

RNAscope for In situ Detection of Transcriptionally Active Human Papillomavirus in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

The presence of high-risk HPV in head and neck tumor tissue is associated with favorable outcomes. The recently developed RNA in situ hybridization technique called RNAscope allows direct visualization of HPV E6/E7 mRNA in FFPE tissue sections.

Için RNAscope<em&gt; In situ</em&gt; Head transkriptional Aktif Human Papilloma Virüs Tespiti ve Boyun Skuamöz Hücre Karsinomu

The &#39;gold standard&#39; for oncogenic HPV detection is the demonstration of transcriptionally active high-risk HPV in tumor tissue. However, detection ...

Combined In vivo Optical and &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in vivo optical and &#956;CT imaging allow the visualization of biological phenomena in an anatomical context. These imaging modalities may be especially useful to study conditions that impact bone. In particular, orthopaedic implant infections are an important problem in clinical orthopaedic surgery. These infections are difficult to treat because bacterial biofilms form on the foreign surgically implanted materials, leading to persistent inflammation, osteomyelitis and eventual osteolysis of the bone surrounding the implant, which ultimately results in implant loosening and failure. Here, a mouse model of an infected orthopaedic prosthetic implant was used that involved the surgical placement of a Kirschner-wire implant into an intramedullary canal in the femur in such a way that the end of the implant extended into the knee joint. In this model, LysEGFP mice, a mouse strain that has EGFP-fluorescent neutrophils, were employed in conjunction with a bioluminescent Staphylococcus aureus strain, which naturally emits light. The bacteria were inoculated into the knee joints of the mice prior to closing the surgical site. In vivo bioluminescent and fluorescent imaging was used to quantify the bacterial burden and neutrophil inflammatory response, respectively. In addition, &#956;CT imaging was performed on the same mice so that the 3D location of the bioluminescent and fluorescent optical signals could be co-registered with the anatomical &#956;CT images. To quantify the changes in the bone over time, the outer bone volume of the distal femurs were measured at specific time points using a semi-automated contour based segmentation process. Taken together, the combination of in vivo bioluminescent/fluorescent imaging with &#956;CT imaging may be especially useful for the noninvasive monitoring of the infection, inflammatory response and anatomical changes in bone over time.

Combined In vivo Optical and  &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Combined optical and &#956;CT imaging in a mouse model of orthopaedic implant infection, utilizing a bioluminescent engineered strain of Staphylococcus aureus, provided the capability to noninvasively and longitudinally monitor the dynamics of the bacterial infection, as well as the corresponding inflammatory response and anatomical changes in the bone.

Kombine<em&gt; In vivo</em&gt; Optik ve uCT Görüntüleme Farelerde bir Ortopedik İmplant Enfeksiyon Enfeksiyon, Enflamasyon ve Kemik Anatomisi Monitör

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in ...

Individualized Stem-positioning in Calcar-guided Short-stem Total Hip Arthroplasty

Bone- and soft-tissue sparing short stems are increasingly used in total hip arthroplasty (THA). However, there are a large variety of models of short stems, differing in design and function. Calcar-guided short stems provide an anatomical curvature in the medial calcar region, thus, positioning is done individually alongside the calcar in the "round-the-corner" technique. Depending on the level of the neck's osteotomy, stems can be aligned individually in a large bandwidth of varus- and valgus anatomies. This differs from conventional total hip arthroplasty and potentially includes a severe learning curve. Given that a great variety of caput-collum-diaphyseal (CCD)-angles can be retained, the reconstruction of femoro-acetabular offsets can be achieved precisely. However, particularly extensive varus- and valgus positioning has raised concerns in regard to stability and bone remodeling. The purpose of the present manuscript is to showcase the implantation technique in calcar-guided short-stem THA and to summarize short-term clinical and radiological results.

This protocol describes the round-the-corner technique and the individualized stem-positioning of calcar-guided short stems alongside the medial calcar, depending on the level of the osteotomy. This differs from conventional total hip arthroplasty and includes a learning curve.

Bireyselleştirilmiş kök-kısa-kök toplam kalça protezi Calcar güdümlü içinde konumlandırma

Bone- and soft-tissue sparing short stems are increasingly used in total hip arthroplasty (THA). However, there are a large variety of models of short ...

A Blood-based Test for the Detection of ROS1 and RET Fusion Transcripts from Circulating Ribonucleic Acid Using Digital Polymerase Chain Reaction

We have developed novel methods for the isolation and characterization of tumor-derived circulating ribonucleic acid (cRNA) for blood-based liquid biopsy. Robust detection of cRNA recovered from blood represents a solution to a critical unmet need in clinical diagnostics. The test begins with the collection of whole blood into blood collection tubes containing preservatives that stabilize cRNA. Cell-free, exosomal, and platelet-associated RNA is isolated from plasma in this test system. The cRNA is reverse transcribed to complementary DNA (cDNA) and amplified using digital polymerase chain reaction (dPCR). Samples are evaluated for both the target biomarker as well as a control gene. Test validation included limit of detection, accuracy, and robustness studies with analytic samples. The method developed as a result of these studies reproducibly detect multiple fusion variants for ROS1 (C-Ros proto-oncogene 1; 8 variants) and RET (rearranged during transfection proto-oncogene; 8 variants). The sample processing workflow has been optimized so that test results can consistently be generated within 72 hours of sample receipt.

Detection of circulating ribonucleic acid (cRNA) from blood is an unmet need in clinical diagnostics. Here we describe methods that characterize cRNA from non-small cell lung cancer patients using sensitive and specific digital polymerase chain reaction. The tests meet design requirements to detect fusion variants within 72 hours.

Kan tabanlı Test ROS1 tespiti için ve füzyon transkriptleri ribonükleik asit veya dijital Polimeraz zincir reaksiyonu kullanarak dolaşan gelen RET

We have developed novel methods for the isolation and characterization of tumor-derived circulating ribonucleic acid (cRNA) for blood-based liquid biopsy. ...

Remote Laboratory Management: Respiratory Virus Diagnostics

An uptick in recent pandemics (Ebola, Zika, MERS, influenza, etc.) underlines the need for a more 'nimble,' coordinated response that addresses a multitude of issues ranging from transportation, access, facilities, equipment, and communication to provider training. To address this need, we have developed an innovative, scalable, logistics-enhanced, mobile, laboratory facility for emergencies and epidemics in resource-constrained global settings. Utilizing a background in clinical operations as an academic medical center, we designed a rapidly-deployable, modular BSL-2 and BSL-3 facility with user-friendly software for tracking and management of drugs and supplies in remote regions during epidemics and outbreaks. Here, we present our intermodal, mobile, expandable shipping-container laboratory units. The design of the laboratory facilitates off-grid usage by minimizing power consumption and allowing alternate water sources. The unit's information communication technology (ICT) platform provides (i) user-friendly tablet-based documentation, (ii) enhanced tracking of patients and supplies, and (iii) integrated communication onsite with built-in telehealth capabilities. To ensure quality in remote environments, we have developed a checklist for a basic laboratory workflow and a protocol for respiratory viral diagnosis using reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). As described, this innovative and comprehensive approach allows for the provision of laboratory capability in resource-limited global environments.

A rapidly-deployable, off-grid laboratory has been designed and built for remote, resource-constrained global settings. The features and critical aspects of the logistically-enhanced, expandable, multifunctional laboratory modules are explored. A checklist for a basic laboratory workflow and a protocol for a respiratory viral diagnostic test are developed and presented.

Uzak Laboratuvar Yönetimi: Solunum virüs tanılama

An uptick in recent pandemics (Ebola, Zika, MERS, influenza, etc.) underlines the need for a more 'nimble,' coordinated response that addresses a ...

In Vivo Mouse Model of Spinal Implant Infection

Spine implant infections portend poor outcomes as diagnosis is challenging and surgical eradication is at odds with mechanical spinal stability. The purpose of this method is to describe a novel mouse model of spinal implant infection (SII) that was created to provide an inexpensive, rapid, and accurate in vivo tool to test potential therapeutics and treatment strategies for spinal implant infections.
In this method, we present a model of posterior-approach spinal surgery in which a stainless-steel k-wire is transfixed into the L4 spinous process of 12-week old C57BL/6J wild-type mice and inoculated with 1 x 103 CFU of a bioluminescent strain of Staphylococcus aureus Xen36 bacteria. Mice are then longitudinally imaged for bioluminescence in vivo on post-operative days 0, 1, 3, 5, 7, 10, 14, 18, 21, 25, 28, and 35. Bioluminescence imaging (BLI) signals from a standardized field of view are quantified to measure in vivo bacterial burden.
To quantify bacteria adhering to implants and peri-implant tissue, mice are euthanized and the implant and surrounding soft tissue are harvested. Bacteria are detached from the implant by sonication, cultured overnight and then colony forming units (CFUs) are counted. The results acquired from this method include longitudinal bacterial counts as measured by in vivo S. aureus bioluminescence (mean maximum flux) and CFU counts following euthanasia.
While prior animal models of instrumented spine infection have involved invasive, ex vivo tissue analysis, the mouse model of SII presented in this paper leverages noninvasive, real time in vivo optical imaging of bioluminescent bacteria to replace static tissue study. Applications of the model are broad and may include utilizing alternative bioluminescent bacterial strains, incorporating other types of genetically engineered mice to contemporaneously study host immune response, and evaluating current or investigating new diagnostic and therapeutic modalities such as antibiotics or implant coatings.

The protocol describes a novel in vivo mouse model of spinal implant infection where a stainless-steel k-wire implant is infected with bioluminescent Staphylococcus aureus Xen36. Bacterial burden is monitored longitudinally with bioluminescent imaging and confirmed with colony forming unit counts after euthanasia.

Spinal İmplant Enfeksiyonunun İn Vivo Fare Modeli

Spine implant infections portend poor outcomes as diagnosis is challenging and surgical eradication is at odds with mechanical spinal stability. The ...

Dynamic Navigation for Dental Implant Placement

In modern implantology, the application of surgical navigation systems is becoming increasingly important. In addition to static surgical navigation methods, a guide-independent dynamic navigation implant placement procedure is becoming more widespread. The procedure is based on computer-guided dental implant placement utilizing optical control. This work aims to demonstrate the technical steps of a new dynamic computer-aided implant surgery (DCAIS)&#160;system (design, calibration, surgery) and check the accuracy of the results. Based on cone-beam computed tomography (CBCT) scans, the exact positions of implants are determined with dedicated software. The first step of the operation is the calibration of the navigation system, which can be performed in two ways: 1) based on CBCT images taken with a marker or 2) based on CBCT images without markers. Implants are inserted with the aid of real-time navigation according to the preoperative plans. The accuracy of the interventions can be evaluated based on postoperative CBCT images. The preoperative images containing the planned positions of the implants and postoperative CBCT images were compared based on the angulation (degree), platform, and apical deviation (mm) of the implants. To evaluate the data, we calculated the standard deviation (SD), mean, and standard error of the mean (SEM) of deviations within planned and performed implant positions. Differences between the two calibration methods were compared based on this data. Based on the interventions performed so far, the use of DCAIS allows for high-precision implant placement. A calibration system that does not require labeled CBCT recording allows for surgical intervention with similar accuracy as a system that uses labeling. The accuracy of the intervention can be improved by training.

Dynamic computer-aided implant surgery (DCAIS) is a controlled implant surgical placement method performed without a surgical template using optical control. The real-time intraoperative control of movement and position of the surgical device simplifies the procedure and gives more freedom to the surgeon, providing similar precision as static navigation methods.

Dental İmplant Yerleşimi için Dinamik Navigasyon

In modern implantology, the application of surgical navigation systems is becoming increasingly important. In addition to static surgical navigation ...

The Use of Mixed Reality in Custom-Made Revision Hip Arthroplasty: A First Case Report

The technology of 3D printing and visualization of anatomical structures is rapidly growing in various fields of medicine. A custom-made implant and mixed reality were used to perform complex revision hip arthroplasty in January 2019. The use of mixed reality allowed for a very good visualization of the structures and resulted in precise implant fixation. According to the authors' knowledge, this is the first described case report of the combined use of these two innovations. The diagnosis preceding the qualification for the procedure was the loosening of the left hip's acetabular component. Mixed reality headset and holograms prepared by engineers were used during the surgery. The operation was successful, and it was followed by early verticalization and patient rehabilitation. The team sees opportunities for technology development in joint arthroplasty, trauma, and orthopedic oncology.

A complex revision hip arthroplasty was performed using a custom-made implant and mixed reality technology. According to the authors&#39; knowledge, this is the first report of such procedure described in the literature.

Ismarlama Revizyon Kalça Artroplastisinde Karma Gerçeklik Kullanımı: İlk Olgu Sunumu

The technology of 3D printing and visualization of anatomical structures is rapidly growing in various fields of medicine. A custom-made implant and mixed ...

Measuring Single-Cell Mitochondrial DNA Copy Number and Heteroplasmy Using Digital Droplet Polymerase Chain Reaction

The mammalian mitochondrial (mt)DNA is a small, circular, double-stranded, intra-mitochondrial DNA molecule, encoding 13 subunits of the electron transport chain. Unlike the diploid nuclear genome, most cells contain many more copies of mtDNA, ranging from less than 100 to over 200,000 copies depending on cell type. MtDNA copy number is increasingly used as a biomarker for a number of age-related degenerative conditions and diseases, and thus, accurate measurement of the mtDNA copy number is becoming a key tool in both research and diagnostic settings. Mutations in the mtDNA, often occurring as single nucleotide polymorphisms (SNPs) or deletions, can either exist in all copies of the mtDNA within the cell (termed homoplasmy) or as a mixture of mutated and WT mtDNA copies (termed heteroplasmy). Heteroplasmic mtDNA mutations are a major cause of clinical mitochondrial pathology, either in rare diseases or in a growing number of common late-onset diseases such as Parkinson's disease. Determining the level of heteroplasmy present in cells is a critical step in the diagnosis of rare mitochondrial diseases and in research aimed at understanding common late-onset disorders where mitochondria may play a role. MtDNA copy number and heteroplasmy have traditionally been measured by quantitative (q)PCR-based assays or deep sequencing. However, the recent introduction of ddPCR technology has provided an alternative method for measuring both parameters. It offers several advantages over existing methods, including the ability to measure absolute mtDNA copy number and sufficient sensitivity to make accurate measurements from single cells even at low copy numbers. Presented here is a detailed protocol describing the measurement of mtDNA copy number in single cells using ddPCR, referred to as droplet generation PCR henceforth, with the option for simultaneous measurement of heteroplasmy in cells with mtDNA deletions. The possibility of expanding this method to measure heteroplasmy in cells with mtDNA SNPs is also discussed.

Here we present a protocol for measuring absolute mitochondrial (mt)DNA copy number and mtDNA deletion heteroplasmy levels in single cells.