Name: novel diagnostics in revision arthroplasty: implant sonication and multiplex polymerase chain reaction
Uploaded: 2017-12-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 35 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Novel Diagnostics in Revision Arthroplasty: Implant Sonication and Multiplex Polymerase Chain Reaction at JoVE.com

Yazarlar Curetis GmbH bu çalışmada destek için teşekkür etmek istiyorum.

Bu çalışmada (046/09, rev 3) yerel Etik Komitesi tarafından kabul edildi. Aydınlatılmış onam ve veri gizlilik bildirimi dahil tüm hastalardan elde edilmiştir.
1. ortak aspirasyon
Not: Yordam cerrahi bir tiyatro veya bir müdahale odası ile karşılaştırılabilir aseptik koşullar uygulanmalıdır. Yardım tarafından bir hemşire ya da doktor yardım yararlıdır ancak değil zorunlu değildir.
<ol><li>Hasta muayene yatakta sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Ortak ilgi giyim ücretsiz olduğundan emin olun. Yoğun veya uzun vücut saç elektrik makası kullanarak kısaltmak. Vücut saç bir ustura ile kaldırmaz. Kalça eklemi delinmiş ise hastanın yönde bir röntgen getirin. Diz delinmiş ise, dizden biraz bükük pozisyon13' te duruyor öyle ki diz roll hastanın diz altında yer.</li>
	<li>Bir aracı tablo aşağıdaki steril ekipmanları ile hazırlamak: steril temizleme bezi, delikli steril kapak örtüsü, bir tek kullanımlık steril neşter, sivri cerrahi bıçak (tip #11) ve steril 10 mL şırınga steril kanül (20 gauge, 80 mm) ile. Alkollü cilt dezenfektan, kan toplama tüpler ve pediatrik kan kültür şişesi ayrı ayrı ayarlayın.</li>
	<li>Elbise bir cerrahi önlük, kukuleta ve maske ve steril eldiven takmışım.</li>
	<li>Hastanın cilt cilt dezenfektan ile delik sitesinde (örneğin üstün recessus14 için kalça diz ve anterolateral portal alanı) iyice yıkayın. Not: gerekli çekim hızı kullanılan dezenfektan için Mind (genellikle 90 diz, 120 s hip alkollü Dezenfektanlar için s).</li>
	<li>
Delikli steril kapak örtüsü ponksiyon sitesiyle kapsar. Ponksiyon siteyi tanımlar. Not: diz için doğru 2 cm yukarıda üst kapağına kutup ve 2 cm lateral yan tarafı için bir sitedir. Kalça için anterior superior İliak omurga bulup caudally kadar üst symphysis doğrultusunda geçin. Hangi-ebilmek var olmak her zaman palpe15site femoral arter (yaklaşık 4 cm), yanal olduğundan emin olun.<ol>
<li>Ponksiyon sitesinde sivri neşter bıçak ile bir küçük bıçak kesi (3-4 mm geniş ve derin) deri yoluyla olun. Onlar yanlış negatifleri Mikrobiyolojik kültür, bakteriyostatik etkileri nedeniyle neden yerel anestezi geçerli değildir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Kanül şırınga radarı dekonta iliştirin. Bıçak kesi yoluyla kanül yerleştirin. Diz eklemi üstün tatil, dorsal ve medial, diz kapağı üst kutup altında teneffüs doğru 45 ° açıyla nişan al ve şırınga'nın piston çizerek eklem sıvısı iğne derinliğe, yaklaşık 5 cm. aspiratı ekleyin.
	<ol>
<li>Kalça eklemi delinme Fluoroskop rehberlik kullanın. Hemen bir 60 ° açıyla nişan ponksiyon yerinde iğne yerleştirin. Röntgen, iğne ucu protezi ensenden işaret emin olun. Eklem sıvısı elde kadar derinliğe kadar yaklaşık 8 cm (adipose hastalarda daha derin) kanül, süre alıyorum, ilerlemek. İğne pozisyonda iken alıyorum, protez yüzeyinin kazıma önlemek için tutmak. Not: İğne ucu protezi ile temas İntraartiküler konumlandırma sağlar. Genellikle, en fazla 5 mL sıvı bir Kalça eklemi emişli formu olabilir, bir diz eklemi daha--dan 10 mL verecektir.</li>
		<li>Kanül kaldırıldıktan sonra bıçak kesik bir steril yara pansuman uygulanır. Hematom oluşumu engellemek için hafif sıkıştırma ile bacak bir bandaj uygulanır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Toplanan ortak aspiratı örnek kapsayıcıların içine aktarın. Steril çalışma teknikleri boyunca olun.
	<ol>
<li>Pediatrik kan kültür şişeye emişli eklem sıvısı ile aşı için pediatrik kan kültür şişeye alkollü dezenfektan ile membran dezenfekte. Taze bir kanül şırınga koyun ve 1-3 mL emişli eklem sıvısı kan kültür şişesi enjekte. Nazik ajitasyon veya döndürme16ile karıştırın.</li>
		<li>Yerli ortak aspiratı numune hazırlanması için kanül şırıngadan çıkarın. Bir kan toplama tüp katkı olmadan açın ve 1 mL aspiratı, bu koleksiyon tüp içine enjekte. Eski yerine koymak ve PCR analysis kapağı tutturmak. Not: Gemi PCR analiz için gecikmeden Mikrobiyoloji lab için örnek. Aynı örnekten geleneksel Mikrobiyolojik aerobik ve anaerobik kültürler17kadar ayarlanabilir.</li>
		<li>Ortak aspiratı 1-4 mL EDTA içeren hücre sayısı ve farklılaşma2için bir kan toplama tüp içine aktarın. Gemi herhangi bir gecikme olmadan bir Biyokimya laboratuarı için örnek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. PCR tanılama
<ol><li>Tüm üç cihazlar (lysator, belgili tanımlık çözümlemek ve malzemeler tablo bkz: kokpit;) yukarıya ve koşma doğru olduğundan emin olun. Çalışma bankta (PCR kartuş, bir ana mix tüp, örnek tüp ve örnek tüp kap, bir 0 - 200 µL micropipette ve steril pipet ipuçları) testi gerçekleştirmek için gerekli tüm malzemeleri belirledi.</li>
	<li>Ana mix tüp oda sıcaklığında bu ayarlayarak yordama başlamadan önce defrost. Tüm sarf malzemeleri (ana mix tüp, kartuş ve örnek tüp) zaten bir barkod ile prelabeled.</li>
	<li>Örnek tüp kapağını çıkarın. Toplanan örnek (ortak aspiratı, bkz: Bölüm 1; veya sonication sıvı, bkz: 4) 180 µL almak bir pipet ve transferi ile örnek içine tüp. Protein kinaz K ve tüm iş akışı kalite kontrolü için bir iç kontrol gen içeren örnek tüp kap ile örnek tüp kapatın.</li>
	<li>Kokpit açık çalışma bilgisayar yazılımı "yeni test" dokunarak sol alt köşedeki düğme. Hastanın verileri veya bir örnek kimliği dokunmatik ekran girin. Örnek seçmek için ilk açılır, sonra "ortopedi" olarak uygulama modu, "ITI-kartuş" seçim ve son olarak "synovial sıvı" veya "sonication sıvı" örnek türü olarak seçin. Başlat düğmesine basın.</li>
	<li>Örnek tüp altındaki barkod tarama. Örnek tüp lysator yerleştirin. Not: Lizis işlemi otomatik olarak başlatmak ve bitirmek için yaklaşık 30 dakika al. Lizis tamamlandığında geri sayım süreölçer lysator ekranda gösterir.</li>
	<li>Örnek lysator örnek tüpünden kilidini kokpit ekran üzerinde seçin. Lysator örnek tüpü çıkarması ve lysator'ın üst kapağı kapatın. Örnek tüp PCR kartuş örnek tüp yuvaya aktarın. Fetişlerin mastermix tüp PCR kartuş mastermix yuvasına takın.</li>
	<li>PCR kartuş mastermix ve örnek tüp ile tarama kokpit ekrandaki yönergeleri izleyin.</li>
	<li>PCR kartuş çözümleyicisinin belirtilen kartuş yuvasına takın. Ne zaman bitmiş, belgili tanımlık çözümlemek kartuş serbest bırakır. Not: PCR koşulları üretici tarafından önceden ve kullanıcı tarafından değiştirilemez. Daha fazla bilgi için üreticinin Uygulama Kılavuzu'na bakın. PCR işlemi otomatik olarak başlar ve yaklaşık 4 saat 10 dk.</li>
	<li>Kaldırmak ve kartuş atın. Kokpit dokunmatik ekran, "geçerli" test"sol alt köşede seçin, daha sonra test sonuçlarını görüntülemek için doğru örnek kimliğini seçin. Makinenin bellek, sonuçları kaydetmek ve yazdırabilir veya daha fazla başvuru için (USB götürmek yolu ile) verebilirsiniz. Not: patojen kimlik ve direnç işaretlere, gecikmeden cerrah tespiti gibi PCR, sonuç raporu. Bakteriyel ve fungal patojenlerin 114 deoksiribonükleik asit (DNA) hedefleri olan bir panel genellikle implant enfeksiyonları ve yumuşak doku enfeksiyonları, bulunan en yaygın antibiyotik direnci işaretleri ile birlikte analiz edilir.</li>
</ol>3. cerrahi işlem: İntraoperatif örnek koleksiyonu
Not: Gözden geçirme protezi cerrahisi uzman düzeyde beceri ve uzmanlık gerektirir; cerrahi işlemler hakkında kapsamlı bilgiler için lütfen cerrahın ders kitapları-18bakın. Cerrahi işlem tam ve ayrıntılı açıklaması, bu makalenin kapsamı dışındadır de olurdu. Burada örnek toplama ve öncesi analytics detaylarını üzerinde odaklanmıştır. Ameliyat sırasında elde edilen Mikrobiyolojik örnekleri sonuçlarını uzlaşmaya olarak değil bir tek atış antibiyotik profilaksisi, yönetim gözden geçirme artroplasti ameliyatta kaçınmaları. Bu uygulama tartışmalı19,20olsa bu kurala bağlı kalarak, önerilir. Varolan cerrahi yaklaşım ortak için mümkün olduğunda kullanın. Ek cerrahi yaklaşımlar yumuşak doku güvenliğini aşmasına ve yara oluşumu artırmak.
<ol><li>Ek kapsül de maruz kadar doku incelemek. Arthrotomy gerçekleştirmek hazır şırınga ile çok daha fazla eklem sıvısı toplanan daha fazla analiz (adımları 1.7.1-1.7.3) belirtildiği gibi steril enjektör içine. Not: Hiçbir antiseptik lavaj sıvıları implant kaldırılır ve doku örnekleri alınan kadar kullanılmalıdır.</li>
	<li>Eklem implantları kaldırın. Hemen kaldırıldıktan sonra implant parçaları bir hava ve su geçirmez kapaklı steril bir plastik kaba aktarın. Not: Ders kitabı literatürde implant temizlenmesine yönelik ayrıntılı yönergeler bulunabilir (diz, örneğin: Wirtz vd., Bölüm 16,421; Kalça, örneğin: Claes vd., Bölüm 14.5.122). Belirli aletleri-ebilmek var olmak gerekli, üreticilerin yönergeleri tarafından belirtildiği gibi. İmplant kaldırma tekniği önemli ölçüde farklı implant türleri ve fiksasyon yöntemleri arasında değişir. Keskiler ve matkaplar, sürgülü bir çekiç ve bir evrensel intramedüller çivi Temizleme kümesi kümesi kemikli entegre implantlar23,24giderilmesinde yararlı.</li>
	<li>Steril keskin küret, forseps ve rongeur membran doku kemik implant arabiriminden kaldırmak için kullanın. Doku temsil edici bir örnek olarak numuneler Mikrobiyoloji ve histoloji için vidalı kapaklı, steril bir plastik kaba aktarın. Not: Bir rayba medüller kanal tüm yumuşak dokuların temizlemek için kullanılabilir. Ayrıca, sinovyal doku ve muayene için artiküler kapsül örnekleri almak ve onları steril kaplarda saklayın. Toplamda en az dört numuneler toplanan gerekir.</li>
	<li>Tüm örnekleri ve explanted parçaları Mikrobiyoloji lab anında gönderin. Not: O zaman antibiyotik verilebilir. Doğru antibiyotik seçimi çok önemlidir ve bireyselleştirilmiş karar25,26olması gerekir. Terapötik kavramları üzerinde cerrahlar ve microbiologists oluşan disiplinler arası bir panel tarafından önceden karar vermesi gerekir.</li>
	<li>Eski implant bölgesi debridman enkaz belirtileri gösterir herhangi bir doku kaldırarak tamamlamak (polietilen aşınma gibi metal veya çimento parçacıklar) ya da enfeksiyon ve nekroz (pürülan, avasküler, fibrin kaplı, membranöz veya "çamurlu" doku). Herhangi bir ölü ya da osteitic kemik kaldırın. Vidalar, teller, cerclages, kemik çimento enkaz veya -tekrar Emilebilen dikiş (Claes vd., Bölüm 14.5.322bakınız) gibi tüm yabancı malzeme çıkarmak.</li>
	<li>Bir yara dezenfektan 50 mL şırınga kullanarak seçim kullanarak cerrahi sitesi sulamak. Zil çözüm pulsed lavaj sistemi ile yeterli miktarda (en az 3 L) ile sulamak. Ayırıcı ortak27dengelemek gerekli olabilir.</li>
	<li>Yarayı tekrar Emilebilen derin dikiş antimikrobiyal kaplı kapsül veya Şerit (örgülü polyglactin dikiş, triclosan kaplı, USP 2) ve subkutan doku (örgülü polyglactin dikiş, triclosan kaplı, USP 0) için kullanarak kapatın. Deri kesintiye uğramış dikiş (monofilic polipropilen, USP 0 veya USP 2-0) sigara resorbing kullanarak kapatın.</li>
</ol>4. sonication
Not: kesinlikle aseptik çalışmaya dikkat edin. Bir sınıf II Biyogüvenlik Bank Laminer hava akımı ile daha da explanted malzeme işlemek için kullanın.
<ol><li>Ameliyathane üzerinden explanted protez tutan plastik konteyner açın (bkz. Adım 3.2) Laminer hava akış çalışma tezgah altında ve explanted yabancı cisim kadar steril % 0,9 Sodyum Klorür çözüm kaplı en az % 80 (yaklaşık 500-800 mL) ekleyin.</li>
	<li>Plastik konteyner kapatın. İyice sallayın veya 30 s. Transfer plastik konteyner içine sonication banyo için yüksek yoğunluklu bir girdap Mikser kullanarak plastik konteyner kışkırtmak. Sıvı sonication banyoda kontrol. Not: Sonication banyo sıvı düzeyi içinde plastik konteyner ile aynı olmalıdır. Plastik kap su basmış olamaz ve gerekli eklemek veya sıvı sonication banyodan kaldırmak emin olun.</li>
	<li>Numune frekans 40 ± 2 kHz ve güç yoğunluğu 0.22 ± 0,04 W/cm2ile 5 min için solüsyon içeren temizleyicide. Sallamak ya da girdap numune iyice için 30 s. Not: Sonication kez 1-5 dk arasında biyofilmler, bakteriyel canlılığı28üzerinde herhangi bir etkisi olmadan çözülmesi için en iyisidir.</li>
	<li>Laminar akış tezgah içinde 50 mL sıvı sonication toplamak ve steril, sıkı kapalı tüp için transfer.</li>
	<li>Bir konsantre sonication sıvı oluşturmak için tüp 10 mL kalan hacmi bırakarak 4200 x g., 10 dk santrifüj kapasitesi, kalan süpernatant bir pipet ile atın. Pelet pipetting ve vortexing tarafından resuspend.</li>
	<li>Uygun kültür ortamı (örneğin kan agar, çikolata agar, Sabouraud agar, Schaedler'ın agar, sefaloridin Vankomisin agar veya thioglycolate suyu) 0.5 mL sıvı konsantre sonication her ile aşılamak. Pediatrik kan kültür şişeye 2 mL ile yukarıda açıklandığı gibi aşılamak (bkz. Adım 1.7.1). Konsantre sonication sıvı 1 mL PCR analiz için katkı olmadan bir kan toplama tüp içine aktarın.</li>
	<li>İnoculated kültür medya da kuluçka (35 ° C, % 5 CO2) aktarın. Kültürler için 14 gün kuluçkaya ve büyüme için her gün kontrol edin.</li>
	<li>14 gün sonra hiçbir büyüme ve negatif olarak rapor kültürlerle atmak. Büyüme algılanırsa, standart kimlik teknikleri ve duyarlılık testi kullanılarak patojen kimlik taşımak. Sonuç cerrah gecikmeden rapor. Not: Burada, patojenler tanımlaması matris yardımlı lazer desorbtion/iyonlaşma kullanılarak gerçekleştirilmiştir - uçuş (MALDI-TOF) spektroskopisi, zaman. Antimikrobiyal duyarlılık test bir semiautomated analyzer29,30,31ile gerçekleştirildi.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Wimmer, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+an+interdisciplinary+therapy+algorithm+in+patients+with+prosthetic+joint+infections.">Evaluation of an interdisciplinary therapy algorithm in patients with prosthetic joint infections.</a> Int Orthop. 37 (11), 2271-2278 (2013).</li><li>Trampuz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+fluid+leukocyte+count+and+differential+for+the+diagnosis+of+prosthetic+knee+infection.">Synovial fluid leukocyte count and differential for the diagnosis of prosthetic knee infection.</a> Am J Med. 117 (8), 556-562 (2004).</li><li>Randau, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+in+serum+and+in+synovial+fluid+enhances+the+differentiation+between+periprosthetic+joint+infection+and+aseptic+loosening.">Interleukin-6 in serum and in synovial fluid enhances the differentiation between periprosthetic joint infection and aseptic loosening.</a> PLoS One. 9 (2), e89045 (2014).</li><li>Deirmengian, C. A., Wongworawat, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Editor's+spotlight/take+5:+diagnosing+periprosthetic+joint+infection:+has+the+era+of+the+biomarker+arrived.">Editor's spotlight/take 5: diagnosing periprosthetic joint infection: has the era of the biomarker arrived.</a> Clin Orthop Relat Res. 472 (111), 3250-3253 (2014).</li><li>Gollwitzer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+peptides+and+proinflammatory+cytokines+in+periprosthetic+joint+infection.">Antimicrobial peptides and proinflammatory cytokines in periprosthetic joint infection.</a> J Bone Joint Surg Am. 95 (7), 644-651 (2013).</li><li>Trampuz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonication+of+removed+hip+and+knee+prostheses+for+diagnosis+of+infection.">Sonication of removed hip and knee prostheses for diagnosis of infection.</a> N Engl J Med. 357 (7), 654-663 (2007).</li><li>Achermann, Y., Vogt, M., Leunig, M., Wust, J., Trampuz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+diagnosis+of+periprosthetic+joint+infection+by+multiplex+PCR+of+sonication+fluid+from+removed+implants.">Improved diagnosis of periprosthetic joint infection by multiplex PCR of sonication fluid from removed implants.</a> J Clin Microbiol. 48 (40), 1208-1214 (2010).</li><li>Portillo, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplex+PCR+of+sonication+fluid+accurately+differentiates+between+prosthetic+joint+infection+and+aseptic+failure.">Multiplex PCR of sonication fluid accurately differentiates between prosthetic joint infection and aseptic failure.</a> J Infect. 65 (6), 541-548 (2012).</li><li>Qu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PCR-based+diagnosis+of+prosthetic+joint+infection.">PCR-based diagnosis of prosthetic joint infection.</a> J Clin Microbiol. 51 (8), 2742-2746 (2013).</li><li>Borde, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+prosthetic+joint+infections+using+UMD-Universal+Kit+and+the+automated+multiplex-PCR+Unyvero+i60+ITI((R))+cartridge+system:+a+pilot+study.">Diagnosis of prosthetic joint infections using UMD-Universal Kit and the automated multiplex-PCR Unyvero i60 ITI((R)) cartridge system: a pilot study.</a> Infection. 43 (5), 551-560 (2015).</li><li>Hischebeth, G. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unyvero+i60+implant+and+tissue+infection+(ITI)+multiplex+PCR+system+in+diagnosing+periprosthetic+joint+infection.">Unyvero i60 implant and tissue infection (ITI) multiplex PCR system in diagnosing periprosthetic joint infection.</a> J Microbiol Methods. 121, 27-32 (2016).</li><li>Prieto-Borja, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+commercial+multiplex+PCR+(Unyvero+i60(R))+designed+for+the+diagnosis+of+bone+and+joint+infections+using+prosthetic-joint+sonication.">Evaluation of a commercial multiplex PCR (Unyvero i60(R)) designed for the diagnosis of bone and joint infections using prosthetic-joint sonication.</a> Enferm Infecc Microbiol Clin. , (2016).</li><li>Bernau, A., Heeg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraarticular+punctures+and+injections:+indications--prevention+of+infection--technique--complications.">Intraarticular punctures and injections: indications--prevention of infection--technique--complications.</a> Orthopade. 32 (6), 548-569 (2003).</li><li>Courtney, P., Doherty, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Joint+aspiration+and+injection+and+synovial+fluid+analysis.">Joint aspiration and injection and synovial fluid analysis.</a> Best Pract Res Clin Rheumatol. 27 (2), 137-169 (2013).</li><li>Arnold, S., Meurer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-articular+punctures+and+injections.">Intra-articular punctures and injections.</a> Orthopade. 42 (12), 1075-1086 (2013).</li><li>Geller, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospective+Comparison+of+Blood+Culture+Bottles+and+Conventional+Swabs+for+Microbial+Identification+of+Suspected+Periprosthetic+Joint+Infection.">Prospective Comparison of Blood Culture Bottles and Conventional Swabs for Microbial Identification of Suspected Periprosthetic Joint Infection.</a> J Arthroplasty. 31 (8), 1779-1783 (2016).</li><li>Cross, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+percutaneous+joint+aspiration+and+synovial+biopsy+in+identifying+culture-positive+infected+hip+arthroplasty.">Utility of percutaneous joint aspiration and synovial biopsy in identifying culture-positive infected hip arthroplasty.</a> Skeletal Radiol. 43 (2), 165-168 (2014).</li><li>Berry, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Revision total hip and knee arthroplasty. , (2012).</li><li>Parvizi, J., Gehrke, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+Consensus+Group+on+Periprosthetic+Joint,+I.+Definition+of+periprosthetic+joint+infection.">International Consensus Group on Periprosthetic Joint, I. Definition of periprosthetic joint infection.</a> J Arthroplasty. 29 (7), 1331 (2014).</li><li>Ghanem, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perioperative+antibiotics+should+not+be+withheld+in+proven+cases+of+periprosthetic+infection.">Perioperative antibiotics should not be withheld in proven cases of periprosthetic infection.</a> Clin Orthop Relat Res. 461, 44-47 (2007).</li><li>Wirtz, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> AE-Manual der Endoprothetik - Knie. , (2011).</li><li>Claes, L. K., Peter, , Perka, , Carsten, , Rudert, , Maximilian, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> AE-Manual der Endoprothetik - H&#252;fte und H&#252;ftrevision. , (2012).</li><li>Herrmann, P., Thoele, P., Heppert, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infected+knee+prostheses.+Part+2:+chronic+late+infections.">Infected knee prostheses. Part 2: chronic late infections.</a> Oper Orthop Traumatol. 25 (3), 242-250 (2013).</li><li>Zweymuller, K. A., Steindl, M., Melmer, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anterior+windowing+of+the+femur+diaphysis+for+cement+removal+in+revision+surgery.">Anterior windowing of the femur diaphysis for cement removal in revision surgery.</a> Clin Orthop Relat Res. 441, 227-236 (2005).</li><li>Osmon, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbiology+and+Antimicrobial+Challenges+of+Prosthetic+Joint+Infection.">Microbiology and Antimicrobial Challenges of Prosthetic Joint Infection.</a> J Am Acad Orthop Surg. 25, 17-19 (2017).</li><li>Renner, L., Perka, C., Trampuz, A., Renz, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+periprosthetic+infections.">Treatment of periprosthetic infections.</a> Chirurg. 87 (10), 831-838 (2016).</li><li>Kuzyk, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-stage+revision+arthroplasty+for+management+of+chronic+periprosthetic+hip+and+knee+infection:+techniques,+controversies,+and+outcomes.">Two-stage revision arthroplasty for management of chronic periprosthetic hip and knee infection: techniques, controversies, and outcomes.</a> J Am Acad Orthop Surg. 22 (3), 153-164 (2014).</li><li>Kobayashi, N., Bauer, T. W., Tuohy, M. J., Fujishiro, T., Procop, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brief+ultrasonication+improves+detection+of+biofilm-formative+bacteria+around+a+metal+implant.">Brief ultrasonication improves detection of biofilm-formative bacteria around a metal implant.</a> Clin Orthop Relat Res. 457, 210-213 (2007).</li><li>Dubois, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performances+of+the+Vitek+MS+matrix-assisted+laser+desorption+ionization-time+of+flight+mass+spectrometry+system+for+rapid+identification+of+bacteria+in+routine+clinical+microbiology.">Performances of the Vitek MS matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry system for rapid identification of bacteria in routine clinical microbiology.</a> J Clin Microbiol. 50 (8), 2568-2576 (2012).</li><li>Cherkaoui, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+two+matrix-assisted+laser+desorption+ionization-time+of+flight+mass+spectrometry+methods+with+conventional+phenotypic+identification+for+routine+identification+of+bacteria+to+the+species+level.">Comparison of two matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry methods with conventional phenotypic identification for routine identification of bacteria to the species level.</a> J Clin Microbiol. 48 (4), 1169-1175 (2010).</li><li>Barenfanger, J., Drake, C., Kacich, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+and+financial+benefits+of+rapid+bacterial+identification+and+antimicrobial+susceptibility+testing.">Clinical and financial benefits of rapid bacterial identification and antimicrobial susceptibility testing.</a> J Clin Microbiol. 37 (5), 1415-1418 (1999).</li><li>Tande, A. J., Patel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prosthetic+joint+infection.">Prosthetic joint infection.</a> Clin Microbiol Rev. 27 (2), 302-345 (2014).</li><li>Portillo, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advantages+of+sonication+fluid+culture+for+the+diagnosis+of+prosthetic+joint+infection.">Advantages of sonication fluid culture for the diagnosis of prosthetic joint infection.</a> J Infect. 69 (1), 35-41 (2014).</li><li>Scorzolini, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonication+technique+improves+microbiological+diagnosis+in+patients+treated+with+antibiotics+before+surgery+for+prosthetic+joint+infections.">Sonication technique improves microbiological diagnosis in patients treated with antibiotics before surgery for prosthetic joint infections.</a> New Microbiol. 37, 321-328 (2014).</li><li>Zhai, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meta-analysis+of+sonication+fluid+samples+from+prosthetic+components+for+diagnosis+of+infection+after+total+joint+arthroplasty.">Meta-analysis of sonication fluid samples from prosthetic components for diagnosis of infection after total joint arthroplasty.</a> J Clin Microbiol. 52 (5), 1730-1736 (2014).</li><li>Panousis, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poor+predictive+value+of+broad-range+PCR+for+the+detection+of+arthroplasty+infection+in+92+cases.">Poor predictive value of broad-range PCR for the detection of arthroplasty infection in 92 cases.</a> Acta Orthop. 76 (3), 341-346 (2005).</li><li>Rak, M., KavcIc, M., Trebse, R., Co, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+bacteria+with+molecular+methods+in+prosthetic+joint+infection:+sonication+fluid+better+than+periprosthetic+tissue.">Detection of bacteria with molecular methods in prosthetic joint infection: sonication fluid better than periprosthetic tissue.</a> Acta Orthop. 87 (4), 339-345 (2016).</li><li>Li, Z., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+value+of+a+PCR-based+technique+for+prosthetic+joint+infection.">Diagnostic value of a PCR-based technique for prosthetic joint infection.</a> J Clin Microbiol. 52 (6), 2281-2282 (2014).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Yabancı cisim enfeksiyondur ortopedik ortaya çıkan bir sorunu ve travma cerrahisi pahalı tedavi, uzun yatış ve etkilenen eklemlerin fonksiyonel eksikliği. Ayırıcı tanı meydan okuyor. Yabancı cisim tanılamak için güvenilir yöntemleri enfeksiyonlar ilgili ve birçok araştırmacılar ve klinisyenler dikkatini bu konuya daha kesin bulmak için çabalıyor veriyoruz. Bugüne kadar birçok farklı tanılama araçları olmak değerlendirildi ve tanı yolu32yılında uygulanan.
Sonication yordamı doku örnekleri6geleneksel kültürleri daha iyi hassasiyet gösteren çok değerli bir yöntemdir. Bizim çalışmada, sıvı sonication kültürler bir özgüllüğü %61.5 %88.9 bir hassasiyet var gösterdi. Doku örnekleri ve ortak boğulmadan geleneksel kültürler sırasıyla % 66,7 bir duyarlılık ve %82.3 %84.6, özgüllük ile vardı. Diğer araştırmacılar bu geleneksel Mikrobiyolojik yordamlar6,33,34,35için benzer sonuçlar gösterir. Bu kez sonication yordam örnekleri işlemede özel bakım alınmalıdır kirlenme için eğilimli olduğunu eleştirdi.
Doku örnekleri veya sıvı DNA bir etken patojen algılama olasılığı merak uyandırıcı. NAT içinde birkaç saat, zaman alan Mikrobiyolojik kültür yöntemleri ile karşılaştırıldığında sonuçlar hızlı bir işlemdir. Şüphesiz, NAT içinde patojenler hafiye iyi bir duyarlılığa sahiptir ama kirleticiler, böylece özgüllük36eksik algılama riskini tutun. PJI teşhis bu PCR tekniği büyük yarar özellikle antibiyotik tedavisi cerrahi yakın ya da daha uzun bir dönem7,8için alınan hastalarda belgelenmiştir. Çalışmalar NAT sonication sıvı daha fazla duyarlılık ve özgüllük37artabilir öneririz. Ne yazık ki, bu teknik laboratuar, onun zaman alıcı iş akışı nedeniyle rutin olarak kullanılamaz.
Genel olarak bazı sınırlamalar PCR tekniği vardır: NAT ile kalıcı ve kalıcı olmayan bakteriler, sonuçların yorumlanması zor yapım arasındaki hiçbir farklılaşma DNA algılar. Geniş menzilli PCR patojenler37arasında ayırt değil 16S ribozomal ribonükleik asit (16S rRNA), yalnızca algılar. Daha belirli sistemlere antibiyotik direnci gen kodlanmış işaretleri rutin olarak algılamaz. Hedeflenen bir antibiyotik tedavisi bu nedenle daha fazla duyarlılık test olmadan sınırlı olabilir.
Bu çalışmada uygulanan sistem bazı belirli bakteriler arasında ayırt ve gen kodlanmış direnç işaretleri tanımlayan bu sınırlamalar üstesinden gelir. Genel olarak, NAT deneyleri PJI7,8,9,38onaylamak için hızlı ve yararlı tamamlayıcı düşünülebilir.
Önceden ortak aspirasyon ve cerrahi plan gereklidir: örnek kapları steril ve hazır olmalı ve komut istemi örnek taşıma kullanılabilir olması gerekir. Cerrahlar onların microbiologists planlanan yordamlar ve ne kısa bir örnek malzeme bekliyoruz. Ne zaman gerçekleştirme ortak aspirasyon, kesinlikle steril koşullar, eklem iyatrojenik enfeksiyonu önlemek için sağlanması gerekir. Adipose hastalarda eklem ponksiyon zor olabilir ve floroskopik rehberlik yardımcı olabilir. Gözden geçirme protezi ameliyatı çok yüksek bir seviyede uzmanlık gerektirir ve sadece yetenekli bir cerrah tarafından gerçekleştirilmelidir. Explanted malzeme gerekenden daha fazla ameliyat odasına tutulmalıdır değil ama mikrobiyolog için en kısa zamanda gönderilecektir. Bir çok önemli bu protokol içinde olası bulaşma riskini parçasıdır. Sadece örnekleri toplama iken, aynı zamanda Mikrobiyoloji laboratuarında örnekleri işleme sırasında tüm personel dahil (ortopedik cerrah, hemşire, teknisyen, microbiologists) gerekir hızlı ve doğru iş ve yordamlar, uygun eğitim var.
Sonication ve NAT implantı ilişkili enfeksiyonlar teşhis değerli araçlardır. Bununla birlikte, sonuçlar her zaman dikkatle sorguya. Ortopedik Cerrahlar, microbiologists ve enfeksiyon hastalıkları uzmanları ve patolog bireyselleştirilmiş tedavi stratejisi üzerinde anlaşmaya bir yuvarlak masa tartışma sonuçlarını tartışmak öneririz.
Tanı bu tekniği uygulamak için PJI yolunu birkaç avantajları olabilir. Bu saat içinde bir sonuç ile hızlı bir kontrol var. Birkaç kodlanmış gen direnç işaretleri analiz nedeniyle, bir hedefe yönelik antibiyotik tedavi klinik seyir içinde çok erken bir aşamada yer alabilir. Bir yan etki olarak geniş menzilli antibiyotik gerçekten gereken yerlere endikasyonlar için kaydedilebilir. Diğer örnek türleri (örneğin doku örnekleri, temizleme bezi, Hematom, vb) bizim protokole göre soruşturma olmaktır. PCR kartuş kapalı bir sistem olduğu için hiçbir sorun giderme gerekli veya kullanıcı tarafında mümkün. Herhangi bir uyum Protokolü'nün üretici tarafından uygulanması gerekir. Ayrıntı yok daha yeni sürümleri tam değişiklikler üzerinde genel yapılır ancak değişiklikler yazılım ve donanım (kartuş) sistemi geliştirmek için üretici tarafından sürekli olarak yapılır.

Acı arthroplasties ortopedik cerrahi tanı bir sorun vardır. Aseptik gevşeme sonra PJI implant başarısızlık çoğu ikinci nedeni ve yıkıcı bir komplikasyon artroplasti ameliyattan sonra sunuyor. PJI tedavi etmek zor ve teşhis etmek zor. Bir PJI olacak büyük olasılıkla sonucunda tekrarlayan enfeksiyon tanısında önemli morbidite, fonksiyon kaybı ve yaşam kalitesi kaybı ile özledim. Bu nedenle, enfeksiyon tedavi edici önlemler başlatılan önce acı protezi ile sunan tüm hastalarda ekarte.
Hasta Tarih, klinik muayene, kan sınav CRP ve beyaz küre sayısı, hem de Radyografi veya etkilenen eklem szintigraphy için temel tanılama1oluşturmaktadır. Preoperatif rutin de mümkün olan her yerde steril koşullar altında ortak bir aspirasyon içermelidir. Edinilen aspiratı daha fazla teşhis çok değerli bir malzemedir.
Hücre sayısı ve hücre farklılaşması ortak aspiratı içinde köklü deneyleri2olarak yanı sıra, protein biyolojik tespiti fark tanılama3,4,5' te yardımcı olabilir. Geleneksel Mikrobiyolojik kültür patojen algılama altın standart kalır. Gram pozitif ve gram-negatif bakteriler hem yapışık implant yüzeyler için neden biyofilmler, PJI önemli bir patojenik faktör vardır. Bu nedenle, 2007'de, patojen algılama izin vermek için kaldırılan implantlar üzerinde biyofilmler engellemeden yabancı vücut ilişkili enfeksiyonların ortopedik cerrahi, teşhis sonication prosedürü uygulanmıştır. Bakteri böylece dinlenme onların formundan etkin forma algılama kültüründe yapma, tekrar mümkün alınır. Kaldırılan implantlar sonication kültürler doku örnekleri (%78.5 %60.8 vs)6daha yüksek bir duyarlılık gösterdi.
Nükleik asit amplifikasyon test (NAT), PCR gibi son zamanlarda klinisyenler ve microbiologists PJI tanılamak için kapsamı taşındı. Ameliyat öncesi antibiyotik tedavisi alan özellikle hastalarda tanı PCR etken organizmalar7,8,9belirlenmesinde faydalıdır gösterildi. Son zamanlarda, implant ve doku enfeksiyonları (ITI) için özel olarak tasarlanmış yeni bir multiplex PCR sistemi, kullanılmaya başlandı. Bu kartuş tabanlı sistem patojenler tanımlanması için genomik işaretleri ve antibiyotik direnci işaretleri sunar. Uygulama yelpazesini arasında (protez eklem enfeksiyonları, cerrahi sitesi enfeksiyonlar, kardiyoloji ile ilgili enfeksiyonlar, kateter ilişkili enfeksiyonlar, Diyabetik ayak enfeksiyonları, derin cilt ve doku enfeksiyonları, implant enfeksiyonları, çok sayıda göstergeleridir ve yanık yara enfeksiyonları), ve örnek malzeme geniş bir panel-ebilmek var olmak kullanılmış için bu tekniği (sonication sıvı, sinovyal sıvı, temizleme bezi, doku, irin, Aspire edin/çıktı ve biyofilm)10,11,12.
Hız ile karşılaştırıldığında geleneksel Mikrobiyoloji, yordamın en büyük avantajdır: etken patojen saat içinde tanımlanabilir. Ayrıca, bu PCR sistemi geniş bir panel hedeflenen antibiyotik tedavisi inisiyasyon erken sağlayan gen kodlanmış direnç işaretlerinin algılar. PCR yardımı ile cerrahlar virüslü ve sigara-enfekte hastalarda tanı yordamı11çok erken bir aşamada birbirinden ayırt etmek mümkün olabilir. Burada, hızlı bir şekilde ortak aspiratı ve sonication sıvı PJI teşhis bu çoklu PCR gerçekleştirmek için iletişim kuralı mevcut.

<table><tbody><tr><td>sterile plastic container&amp;nbsp;</td><td>Lock &amp;amp; Lock, Distributor ISI GmbH, Solingen, Germany</td><td>EAN 8803733184403</td><td>Transport container for implants</td></tr><tr><td>Bactosonic 14.2&amp;nbsp;</td><td>Bactosonic, Bandelin, Berlin, Germany</td><td>3290</td><td>&quot;Sonication machine&quot;</td></tr><tr><td>50ml Falcon tubes</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>352070</td><td>Centrifugation</td></tr><tr><td>PEDS medium blood culture flasks&amp;nbsp;</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>442194</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>Columbia agar with 5% sheep blood</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>254071</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>Mac Conkey agar</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>254078</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>chocolate agar&amp;nbsp;</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>254089</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>sabouraud agar&amp;nbsp;</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>254096</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>thioglycolate bouillon&amp;nbsp;</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>221788</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>Schaedler agar</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>254084</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>kanamycin/vancomycin agar</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>254077</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>Bactec FX blood culture system&amp;nbsp;</td><td>Becton &amp;amp; Dickinson, Heidelberg, Germany</td><td>441386/441385</td><td>culture medium</td></tr><tr><td>Unyvero A50 Analyzer</td><td>Curetis, Holzgerlingen, Germany</td><td>60001</td><td>PCR machine</td></tr><tr><td>Unyvero L4 Lysator</td><td>Curetis, Holzgerlingen, Germany</td><td>60002</td><td>PCR machine</td></tr><tr><td>Unyvero C8 Cockpit</td><td>Curetis, Holzgerlingen, Germany</td><td>60003</td><td>PCR machine</td></tr><tr><td>Unyvero M1 Masterix Tube</td><td>Curetis, Holzgerlingen, Germany</td><td>10002</td><td>consumables PCR</td></tr><tr><td>Unyvero i60 ITI Cartridge</td><td>Curetis, Holzgerlingen, Germany</td><td>10040</td><td>consumables PCR</td></tr><tr><td>Unyvero Sample Tube Cap</td><td>Curetis, Holzgerlingen, Germany</td><td>10004</td><td>consumables PCR</td></tr><tr><td>Unyvero Sample Tube</td><td>Curetis, Holzgerlingen, Germany</td><td>10003</td><td>consumables PCR</td></tr><tr><td>S-Monovette 2.7ml</td><td>Sarstedt AG, N&amp;uuml;mbrecht, Germany</td><td>05.1729.001&amp;nbsp;</td><td>Transport container (aspirate)</td></tr><tr><td>scalpel typ 11</td><td>pfm medical, Cologne, Germany</td><td>200130011</td><td>scalpel for stab incision</td></tr><tr><td>PP Container 70mL 55x45mm</td><td>Sarstedt AG, N&amp;uuml;mbrecht, Germany</td><td>759,922,721</td><td>Transport container (tissue specimen)</td></tr><tr><td>Vicryl Plus</td><td>Johnson&amp;amp;Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany</td><td>VCP247H</td><td>surgical suture material</td></tr><tr><td>Prolene 0</td><td>Johnson&amp;amp;Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany</td><td>EH7920H</td><td>surgical suture material</td></tr><tr><td>Prolene 2/0</td><td>Johnson&amp;amp;Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany</td><td>EH7697H</td><td>surgical suture material</td></tr><tr><td>Kodan&amp;nbsp; Tinktur forte farblos</td><td>Sch&amp;uuml;lke &amp;amp; Mayr GmbH, Norderstedt, Germany</td><td>104005</td><td>alcoholic skin disinfectant</td></tr></tbody></table>

novel diagnostics in revision arthroplasty: implant sonication and multiplex polymerase chain reaction

Ortopedik hastalarda, yabancı vücut ilişkili enfeksiyonlar, özellikle periprosthetic eklem enfeksiyonları (PJIs), artroplasti yıkıcı bir komplikasyonu vardır. Enfeksiyon karmaşık tedavi gerektirir, uzun süre hastanede ve nedenleri önemli maliyeti içinde neden olabilir. Birden çok cerrahi revizyonlar yaşam kalitesi olduğu gibi bu hastalarda, gerekli işlevi de bir kaybı olabilir.
Rutin ameliyat öncesi tanılama kan sınav için C - reaktif protein (CRP) ve diğer biyolojik, yanı sıra ortak aspiratı analizi hücre sayısı, farklılaşma ve kültür içerir. Histoloji ve Mikrobiyoloji için intraoperatif örnekler de standart bir prosedür vardır. Kaldırılan sonication, mikrobiyoloji, moleküler biyoloji teknikleri uygulanması ile birlikte implantlarda Mikrobiyolojik inceleme iki roman teknik PJI fark tanılama geliştirmek için şu anda istihdam temsil eder.
Burada bir kartuş tabanlı multiplex Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) sistemi kullanarak ortak aspiratı ve sonication sıvı, analiz step-wise prosedürü mevcut. Sonuçları PJI için geleneksel kültür ve fikir birliği kriterleri karşı eşleştirilmiştir. Doku biyopsisi, geleneksel Mikrobiyolojik kültürler ortak aspiratı ve sonication sıvı sırasıyla % 66,7, % 66,7 ve %88.9, duyarlılığını gösterdi ve özgüllüğü %82.3 %54.6 ve % 61.5, anılan sıraya göre. PCR tanılama sonication sıvı ve sırasıyla %50.0 ve % 55.6, duyarlılığını gösterdi eklem sıvısı ve her iki bir özgüllüğü %100,0. Kombine hem PCR tanılama % 66,7 bir duyarlılık ve özgüllük %100,0 vardı. Multiplex PCR bu nedenle ılımlı duyarlılık ama PJI teşhis yüksek özgüllük ile hızlı bir tanı aracı sunar.

Fikir birliği kurul, kas-iskelet enfeksiyon toplum (MSIs), tarafından tanımlanan bir PJI varlığı bir önemli ölçüt veya en az üç beş küçük ölçüt dışarı ne zaman yoktu kanıtlanmış olarak kabul edildi. Önemli ölçütleri bir fistül varlığı veya algılama bir patojenin iki ayrı Mikrobiyolojik örnekleri içerir. Küçük ölçüt içerir pozitif hücre sayısı (> 3000 lökosit/µL) veya pozitif hücre farklılaşması (> % 85 nötrofil granülosit) ortak aspiratı içinde olumlu CRP ve sedimentasyon hızı kan örnekleri, doku örneklerinde olumlu Histoloji veya Algılama işlemi, bir patojenin bir Mikrobiyolojik örnek19. Duyarlılık ve özgüllük nükleik asit amplifikasyon test (NAT), MSI'LERİNİ altın standart göre hesaplanır. Hasta detayları tespit, patojenleri de dahil olmak üzere, Tablo 1' de verilmiştir.
Kendi sonuçlar ılımlı bir duyarlılık PCR için tanılama sonication sıvı ve ortak aspiratı (%50.0 ve % 55.6) ama çok güçlü bir özgüllüğü % 10011gösterdi. Ne zaman PCR tanılama (Toplam n 62 testleri =) olumlu bir bulgu ortak aspiratı gösterdi (n = 31) veya sonication sıvı (n = 31), aynı patojen daha sonra bir geleneksel Mikrobiyolojik kültürler içinde tespit edildi. Farklı örnekler PCR (bkz. şekil 1) hiçbir yanlış pozitif gösterdi-enfeksiyon vakaları neden.
PCR tanılama geleneksel Mikrobiyolojik kültür yöntemleri ile kanıtlanmış bazı patojenlerin algılamak başarısız oldu. 16 üzerinden 6 (%37.0) sonication sıvı örneklerini gerçek patojenler ve 13 üzerinden 5 (%38.0) patojenler ile ortak sıvı kültür PCR algılama tarafından cevapsız. Çoğunlukla, PCR tanılama Koagülaz-negatif stafilokoklar (8 dışarı-in 11) tespiti özledim. Her iki malzeme (eklem aspiratı ve sonication sıvısı, "PCR havuza alınmış") kombine PCR tanılama 12 dışarı-in 18 enfeksiyon durumlarda doğru tespit (duyarlılık % 66,7, % 95 CI: %41.0 %86,7 için bkz: Tablo 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55147/55147fig1.jpg"> Şekil 1: NAT Özeti sonuç. Grafik toplu hasta numuneleri özetlenen sonuçları gösterilmektedir. Sağ taraftaki hasta sol tarafında PJI ölçütlerle eşleşen grup vermedi grup olmasıdır. Çubuklar nükleik asit güçlendirme yöntemleri gösterir. Yanlış pozitif ve yanlış negatifleri kırmızıyla toplamın yüzdesi olarak gösterilir. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55147/55147fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody><tr><td>Ortak</td>
			<td>Gözden geçirme nedeni</td>
			<td>Maçlar MSI'LERİNİ kriterler?</td>
			<td>Önceki antibiyotik tedavisi?</td>
			<td>Sıvı sonication kültür</td>
			<td>Ortak aspiratı kültür</td>
			<td>NAT sonication kültür</td>
			<td>NAT ortak aspiratı</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Dermabacter hominis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Leifsonia Aquatica</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>istikrarsızlık</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik luksasyonu</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Stafilokok haemolyticus</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>aseptik gevşeme</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>istikrarsızlık</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Pseudomonas aeruginosa</td>
			<td>Pseudomonas aeruginosa</td>
			<td></td>
			<td>Pseudomonas aeruginosa</td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Escherichia coli</td>
			<td>Escherichia coli</td>
			<td>Escherichia coli</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Corynebakterium spp.</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>Stafilokok Aureus</td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Streptokok agalacticae</td>
			<td>Streptokok agalacticae</td>
			<td>Streptokok agalacticae</td>
			<td>Streptokok agalacticae</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Evet</td>
			<td></td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Staphlococcu epidermidis</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td></td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Akut enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td></td>
			<td>Staphlococcus epidermidis</td>
			<td>Koagülaz-negatif Stafilokok</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td></td>
			<td>Stafilokok Aureus</td>
		</tr><tr><td>Kalça</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>Enterokok faecialis</td>
			<td>Enterokok faecialis</td>
			<td>Enterokok spp.</td>
			<td>Enterokok spp.</td>
		</tr><tr><td>Diz</td>
			<td>Kronik enfeksiyon</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Enterocuccus faecalistir</td>
			<td>Enterocuccus faecalistir</td>
			<td>Enterokok spp.</td>
			<td>Enterokok spp.</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 1: hasta ayrıntıları ve algılanan patojenler. Sekmeli sonuçlar hasta ayrıntıları gözden geçirme cerrahi, neden eşleştirme MSI'LERİNİ ölçütü dahil, ve geleneksel Mikrobiyoloji ve NAAT analiz algılanan patojenler.
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td>Ölçüt</td>
			<td>PCR solüsyon içeren temizleyicide</td>
			<td>PCR aspiratı</td>
			<td>Havuza alınan PCR</td>
		</tr>
<tr>
<td>P değeri</td>
			<td>0.0036</td>
			<td>0.0013</td>
			<td>0,0001</td>
		</tr>
<tr>
<td>Duyarlılık</td>
			<td>%50.0</td>
			<td>%55.6</td>
			<td>% 66,7</td>
		</tr>
<tr>
<td>Özgüllük</td>
			<td>%100,0</td>
			<td>%100,0</td>
			<td>%100,0</td>
		</tr>
<tr>
<td>Pozitif öngörü değeri</td>
			<td>%100,0</td>
			<td>%100,0</td>
			<td>%100,0</td>
		</tr>
<tr>
<td>Negatif değeri</td>
			<td>%59.1</td>
			<td>%61.9</td>
			<td>%68,4</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 2: Mikrobiyolojik yöntemleri sonuçlarını. Sekmeli sonuçlar sonication sıvı, ortak aspiratı ve havuza alınan PCR tanılama PCR değerlendirilmesi. N sırasıyla 31 aspiratı ve sonication, numune = n = 62 havuza alınan PCR veriler için.

Watch this Scientific Journal Video about Novel Diagnostics in Revision Arthroplasty: Implant Sonication and Multiplex Polymerase Chain Reaction at JoVE.com

Novel Diagnostics in Revision Arthroplasty: Implant Sonication and Multiplex Polymerase Chain Reaction

Acı artroplasti ndaki fark teşhis tedavi başarı için çok önemlidir. Ortak aspirasyon preoperatively düzenli olarak gerçekleştirilir. Multiplex Polimeraz zincir reaksiyonu ortak aspiratı ve sonication sıvı hızlı patojen algılama bu örnekler için uygun bir araç tanımlanır.

Revizyon artroplastisi roman tanılama: Sonication ve Multiplex Polimeraz zincir reaksiyonu

In orthopedic patients, foreign body-associated infections, especially periprosthetic joint infections (PJIs), are a devastating complication of ...

novel-diagnostics-revision-arthroplasty-implant-sonication-multiplex

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

11.0K Görüntüleme.  University Hospital Bonn. Acı artroplasti ndaki fark teşhis tedavi başarı için çok önemlidir. Ortak aspirasyon preoperatively düzenli olarak gerçekleştirilir. Multiplex Polimeraz zincir reaksiyonu ortak aspiratı ve sonication sıvı hızlı patojen algılama bu örnekler için uygun bir araç tanımlanır.

Video: Novel Diagnostics in Revision Arthroplasty: Implant Sonication and Multiplex Polymerase Chain Reaction

Multiplex PCR Assay for Typing of Staphylococcal Cassette Chromosome Mec Types I to V in Methicillin-resistant Staphylococcus aureus

Staphylococcal Cassette Chromosome mec (SCCmec) typing is a very important molecular tool for understanding the epidemiology and clonal strain relatedness of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), particularly with the emerging outbreaks of community-associated MRSA (CA-MRSA) occurring on a worldwide basis. Traditional PCR typing schemes classify SCCmec by targeting and identifying the individual mec and ccr gene complex types, but require the use of many primer sets and multiple individual PCR experiments. We designed and published a simple multiplex PCR assay for quick-screening of major SCCmec types and subtypes I to V, and later updated it as new sequence information became available. This simple assay targets individual SCCmec types in a single reaction, is easy to interpret and has been extensively used worldwide. However, due to the sophisticated nature of the assay and the large number of primers present in the reaction, there is the potential for difficulties while adapting this assay to individual laboratories. To facilitate the process of establishing a MRSA SCCmec assay, here we demonstrate how to set up our multiplex PCR assay, and discuss some of the vital steps and procedural nuances that make it successful.

Multiplex PCR Assay for Typing of Staphylococcal Cassette Chromosome Mec Types I to V in Methicillin-resistant Staphylococcus aureus

We demonstrate a simple multiplex PCR assay for quick-screening and typing of Staphylococcal Cassette Chromosome mec (SCCmec) types I-V for methicillin-resistant Staphylococcus aureus, and provide some of the vital steps and procedural nuances that make it successful for adapting this assay to individual laboratories.

Metisiline diren

Staphylococcal Cassette Chromosome mec (SCCmec) typing  is a very important molecular tool for understanding the epidemiology and  clonal strain ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

A Novel Application of Musculoskeletal Ultrasound Imaging

Ultrasound is an attractive modality for imaging muscle and tendon motion during dynamic tasks and can provide a complementary methodological approach for biomechanical studies in a clinical or laboratory setting. Towards this goal, methods for quantification of muscle kinematics from ultrasound imagery are being developed based on image processing. The temporal resolution of these methods is typically not sufficient for highly dynamic tasks, such as drop-landing. We propose a new approach that utilizes a Doppler method for quantifying muscle kinematics. We have developed a novel vector tissue Doppler imaging (vTDI) technique that can be used to measure musculoskeletal contraction velocity, strain and strain rate with sub-millisecond temporal resolution during dynamic activities using ultrasound. The goal of this preliminary study was to investigate the repeatability and potential applicability of the vTDI technique in measuring musculoskeletal velocities during a drop-landing task, in healthy subjects. The vTDI measurements can be performed concurrently with other biomechanical techniques, such as 3D motion capture for joint kinematics and kinetics, electromyography for timing of muscle activation and force plates for ground reaction force. Integration of these complementary techniques could lead to a better understanding of dynamic muscle function and dysfunction underlying the pathogenesis and pathophysiology of musculoskeletal disorders.

We describe a new ultrasound-based vector tissue Doppler imaging technique to measure muscle contraction velocity, strain and strain rate with sub-millisecond temporal resolution during dynamic activities. This approach provides complementary measurements of dynamic muscle function and could lead to a better understanding of mechanisms underlying musculoskeletal disorders.

Kas-iskelet Ultrason Görüntüleme Bir Roman Uygulama

Ultrasound is an attractive modality for imaging muscle and tendon  motion during dynamic tasks and can provide a complementary methodological  approach ...

Tıp

Combined In vivo Optical and &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in vivo optical and &#956;CT imaging allow the visualization of biological phenomena in an anatomical context. These imaging modalities may be especially useful to study conditions that impact bone. In particular, orthopaedic implant infections are an important problem in clinical orthopaedic surgery. These infections are difficult to treat because bacterial biofilms form on the foreign surgically implanted materials, leading to persistent inflammation, osteomyelitis and eventual osteolysis of the bone surrounding the implant, which ultimately results in implant loosening and failure. Here, a mouse model of an infected orthopaedic prosthetic implant was used that involved the surgical placement of a Kirschner-wire implant into an intramedullary canal in the femur in such a way that the end of the implant extended into the knee joint. In this model, LysEGFP mice, a mouse strain that has EGFP-fluorescent neutrophils, were employed in conjunction with a bioluminescent Staphylococcus aureus strain, which naturally emits light. The bacteria were inoculated into the knee joints of the mice prior to closing the surgical site. In vivo bioluminescent and fluorescent imaging was used to quantify the bacterial burden and neutrophil inflammatory response, respectively. In addition, &#956;CT imaging was performed on the same mice so that the 3D location of the bioluminescent and fluorescent optical signals could be co-registered with the anatomical &#956;CT images. To quantify the changes in the bone over time, the outer bone volume of the distal femurs were measured at specific time points using a semi-automated contour based segmentation process. Taken together, the combination of in vivo bioluminescent/fluorescent imaging with &#956;CT imaging may be especially useful for the noninvasive monitoring of the infection, inflammatory response and anatomical changes in bone over time.

Combined In vivo Optical and  &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Combined optical and &#956;CT imaging in a mouse model of orthopaedic implant infection, utilizing a bioluminescent engineered strain of Staphylococcus aureus, provided the capability to noninvasively and longitudinally monitor the dynamics of the bacterial infection, as well as the corresponding inflammatory response and anatomical changes in the bone.

Kombine<em&gt; In vivo</em&gt; Optik ve uCT Görüntüleme Farelerde bir Ortopedik İmplant Enfeksiyon Enfeksiyon, Enflamasyon ve Kemik Anatomisi Monitör

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in ...

High Spatial Resolution Chemical Imaging of Implant-Associated Infections with X-ray Excited Luminescence Chemical Imaging Through Tissue

Microbial infections associated with implantable medical devices are a major concern in fracture fixation failure. Early diagnosis of such infection will allow successful eradication with antibiotics without an extra cost for a second surgery. Herein, we describe XELCI as a technique with high X-ray resolution, implant specificity, and chemical sensitivity to noninvasively image chemical concentrations near the surface of implanted medical devices. The devices are coated with chemically reporting surfaces. This chemically responsive surface consists of two layers coated on an implantable medical device; a pH-sensitive layer (bromothymol blue or bromocresol green incorporated hydrogel) which is coated over a red-light emitting scintillator (Gd2O2S: Eu) layer for monitoring. A focused X-ray beam irradiates a spot on the implant, and the red light generated by the scintillator (with 620 nm and 700 nm peaks) is transmitted through the sensing layer which alters the spectral ratio depending on the pH. An image is generated by scanning the X-ray beam across the implant and measuring the spectral ratio of light passing through the tissue point-by-point. We used this imaging technique for monitoring implant-associated infections previously on the bone surface of the femur with a modified implantable plate sensor. Now we are studying pH changes that occur from tibial intramedullary rod infections. Two different types of intramedullary rod designs are used in pre-pilot rabbit studies, and we learned that the XELCI technique could be used to monitor any chemical changes that occur not only on the bone surface but also inside the bone. Thus, this enables noninvasive, high spatial resolution, low background local pH imaging to study implant-associated infection biochemistry.

Here, we present a protocol for high-resolution optical detection of chemical information around implanted medical devices with X-ray excited luminescence chemical imaging (XELCI). This novel imaging technique is developed in our lab which enables studying implant-associated infection biochemistry.

Yüksek Uzamsal Çözünürlüklü İmplantla İlişkili Enfeksiyonların X-ışını ile Kimyasal Görüntülenmesi Uyarılmış Lüminesans Doku Yoluyla Kimyasal Görüntüleme

Microbial infections associated with implantable medical devices are a major concern in fracture fixation failure. Early diagnosis of such infection will ...

Kimya

A Novel Method to Determine the Longitudinal Antibacterial Activity of Drug-Eluting Materials

Ultrahigh molecular weight polyethylene (UHMWPE) is widely used in total joint arthroplasties as a load-bearing surface. Periprosthetic joint infections, the majority of which occur shortly after joint replacement, constitute almost 25% of total knee revision surgeries, and the complete eradication of bacterial infection poses a major challenge. A promising way to tackle this problem is to ensure the local sustained delivery of antibiotic concentrations sufficient to inhibit the bacteria to support routine systemic antibiotic prophylaxis. There is increased research into the development of efficient local drug delivery devices. Although established antibacterial testing methods for drugs can be used to test the antibacterial efficacy of drug-eluting materials, they are lacking in terms of providing real-time and longitudinal antibacterial efficacy data that can be correlated to the elution profiles of antibiotics from these devices. Here, we report a direct and versatile methodology to determine the antibacterial efficacy of antibiotic-eluting UHMWPE implants. This methodology can be used as a platform to avoid bacterial culture at each time point of a lengthy experiment and can also be adapted to other local drug delivery devices.

Here, we present a protocol to evaluate the antibacterial efficacy of an antibiotic-eluting polymer to simulate prophylactic clinical application by using a commercially available real-time ATP-based luminescent microbial viability assay. This method enables the monitoring of the longitudinal activity of drug-eluting materials and can be widely adapted to test anti-microbial drug delivery platforms.

İlaç Salınımlı Malzemelerin Uzunlamasına Antibakteriyel Aktivitesini Belirlemek İçin Yeni Bir Yöntem

Ultrahigh molecular weight polyethylene (UHMWPE) is widely used in total joint arthroplasties as a load-bearing surface. Periprosthetic joint infections, ...

A Probing Device for Quantitatively Measuring the Mechanical Properties of Soft Tissues during Arthroscopy

Probing in arthroscopic surgery is performed by pulling or pushing the soft tissue, which provides feedback for understanding the condition of the soft tissue. However, the output is only qualitative based on the &#8220;surgeon&#8217;s feeling&#8221;. Herein is described a probing device developed to address this issue by measuring the resistance of soft tissues quantitatively with a tri-axial force sensor. Under both conditions (i.e., pull- and push-probing certain tissues mimicking the acetabular labrum and cartilage), this probing device is found to be useful for measuring some mechanical properties in joints during arthroscopy.

Probing during arthroscopy surgery is normally done to assess the condition of the soft tissue, but this approach has always been subjective and qualitative. This report describes a probing device that can measure the resistance of the soft tissue quantitatively with a tri-axial force sensor during arthroscopy.

Artroskopi Sırasında Yumuşak Dokuların Mekanik Özelliklerini Nicel Olarak Ölçen Bir Sondalama Cihazı

Probing in arthroscopic surgery is performed by pulling or pushing the soft tissue, which provides feedback for understanding the condition of the soft ...

Biotribological Testing and Analysis of Articular Cartilage Sliding against Metal for Implants

Osteochondral defects in middle-aged patients might be treated with focal metallic implants. First developed for defects in the knee joint, implants are now available for the shoulder, hip, ankle and the first metatarsalphalangeal joint. While providing pain reduction and clinical improvement, progressive degenerative changes of the opposing cartilage are observed in many patients. The mechanisms leading to this damage are not fully understood. This protocol describes a tribological experiment to simulate a metal-on-cartilage pairing and comprehensive analysis of the articular cartilage. Metal implant material is tested against bovine osteochondral cylinders as a model for human articular cartilage. By applying different loads and sliding speeds, physiological loading conditions can be imitated. To provide a comprehensive analysis of the effects on the articular cartilage, histology, metabolic activity and gene expression analysis are described in this protocol. The main advantage of tribological testing is that loading parameters can be adjusted freely to simulate in vivo conditions. Furthermore, different testing solutions might be used to investigate the influence of lubrication or pro-inflammatory agents. By using gene expression analysis for cartilage-specific genes and catabolic genes, early changes in the metabolism of articular chondrocytes in response to mechanical loading might be detected.

This protocol describes the preparation, biotribological testing, and analysis of osteochondral cylinders sliding against metal implant material. Outcome measures included in this protocol are metabolic activity, gene expression and histology.

İmplantlar İçin Metale Karşı Kayan Eklem Kıkırdağının Biyotribolojik Test ve Analizi

Osteochondral defects in middle-aged patients might be treated with focal metallic implants. First developed for defects in the knee joint, implants are ...

Rapid and Specific Detection of Acinetobacter baumannii Infections Using a Recombinase Polymerase Amplification/Cas12a-based System

Acinetobacter baumannii, a gram-negative bacterium, is notorious for causing severe infections with high mortality rates. Rapid and accurate detection of A. baumannii is crucial for prompt treatment, effective infection control, and curbing antibiotic resistance. However, there is no suitable method for rapid and easy on-site detection of A. baumannii. The DNA Endonuclease Targeted CRISPR Trans Reporter (DETECTR) system offers a rapid, precise, and sensitive approach to A. baumannii detection by integrating the target-specific recognition capabilities of Cas12a with the isothermal amplification efficiency of Recombinase Polymerase Amplification (RPA). This protocol details the detection of A. baumannii using RPA combined with LbaCas12a endonuclease. The following steps are described in this article: extraction of DNA, selection of a specific DNA sequence, design of primer and CRISPR RNA (crRNA), construction of positive recombinant plasmid, setup of Cas12a-RPA assay, optimization of the RPA amplification system, visualization of the RPA-CRISPR/Cas12a assay using a fluorescence detection tool such as a real-time PCR instrument, and evaluation of sensitivity and specificity evaluation.

To facilitate the rapid and precise detection of Acinetobacter baumannii, we present a protocol that employs Recombinase Polymerase Amplification (RPA) in conjunction with LbaCas12a endonuclease for identifying A. baumannii infections.

Acinetobacter baumannii, a gram-negative bacterium, is notorious for causing severe infections with high mortality rates. Rapid and accurate detection of ...

The Use of Mixed Reality in Custom-Made Revision Hip Arthroplasty: A First Case Report

The technology of 3D printing and visualization of anatomical structures is rapidly growing in various fields of medicine. A custom-made implant and mixed reality were used to perform complex revision hip arthroplasty in January 2019. The use of mixed reality allowed for a very good visualization of the structures and resulted in precise implant fixation. According to the authors' knowledge, this is the first described case report of the combined use of these two innovations. The diagnosis preceding the qualification for the procedure was the loosening of the left hip's acetabular component. Mixed reality headset and holograms prepared by engineers were used during the surgery. The operation was successful, and it was followed by early verticalization and patient rehabilitation. The team sees opportunities for technology development in joint arthroplasty, trauma, and orthopedic oncology.

A complex revision hip arthroplasty was performed using a custom-made implant and mixed reality technology. According to the authors&#39; knowledge, this is the first report of such procedure described in the literature.

Ismarlama Revizyon Kalça Artroplastisinde Karma Gerçeklik Kullanımı: İlk Olgu Sunumu

The technology of 3D printing and visualization of anatomical structures is rapidly growing in various fields of medicine. A custom-made implant and mixed ...

Non-İnvaziv ACL Yaralanması ve Cerrahisinin Farelerde Proteaz Aktivitesi Üzerine Etkisi

Non-Invasive Compression-Induced Anterior Cruciate Ligament (ACL) Injury and In Vivo Imaging of Protease Activity in Mice

Traumatic joint injuries such as anterior cruciate ligament (ACL) rupture or meniscus tears commonly lead to post-traumatic osteoarthritis (PTOA) within 10-20 years following injury. Understanding the early biological processes initiated by joint injuries (e.g., inflammation, matrix metalloproteinases (MMPs), cathepsin proteases, bone resorption) is crucial for understanding the etiology of PTOA. However, there are few options for in vivo measurement of these biological processes, and the early biological responses may be confounded if invasive surgical techniques or injections are used to initiate OA. In our studies of PTOA, we have used commercially available near-infrared protease activatable probes combined with fluorescence reflectance imaging (FRI) to quantify protease activity in vivo following non-invasive compression-induced ACL injury in mice. This non-invasive ACL injury method closely recapitulates clinically relevant injury conditions and is completely aseptic since it does not involve disrupting the skin or the joint capsule. The combination of these injury and imaging methods allows us to study the time course of protease activity at multiple time points following a traumatic joint injury.

Yazar Spotlight: Osteoartrit İlerlemesi için ÖÇB Yaralanmalarının Erken Olaylarının ve Uzun Vadeli Etkilerinin Araştırılması

Non-invasive ACL injury is a reliable and clinically relevant method for initiating post-traumatic osteoarthritis (PTOA) in mice. This injury method also allows for in vivo quantification of protease activity in the joint at early time points post-injury using protease-activatable near infrared probes and fluorescence reflectance imaging.

Non-İnvaziv Kompresyona Bağlı Ön Çapraz Bağ (ACL) Yaralanması ve Farelerde Proteaz Aktivitesinin İn vivo Görüntülenmesi

Traumatic joint injuries such as anterior cruciate ligament (ACL) rupture or meniscus tears commonly lead to post-traumatic osteoarthritis (PTOA) within ...