Bu yöntem, çay yaprağı tırtıllarının, Ectropis grisescens'in, yavrulama davranışları ve farklı çevresel faktörlere yanıt olarak pupa hayatta kalanlar gibi yavru ekolojisi ile ilgili önemli bilgiler sağlayabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, ectropis grisescens'in yavru tercihini ve ortaya çıkma başarısını ölçme gibi basit bir yöntem kullanmanıza olanak sağlar. Başlamak için, çay bitkileri taze sürgünler kesti.
Sonra musluk suyu ile 250 mililitrelik üçgen şişe doldurun ve şişe içine sürgünler yerleştirin. Plastik bir lavaboya 3-4 şişe aktarın. Sonra, E.grisescens laboratuvar kolonisinden çay sürgünlerinin yapraklarına 1000 ila 2 000 larva bırakın.
Larvaları kontrollü laboratuvar koşullarında muhafaza edin. Sürgünlerin yapraklarından düşen olgun, son yıldız larvalarını elde edin ve havzanın alt kısmında aktif olarak dolaşın. Üç gün boyunca 80 derece santigrat fırın kurutucu toprak ve kum sterilize.
Daha sonra toprağı ve kumu 50 derecede birkaç hafta kurutun. Ağırlık zaman içinde değişmediğinde substrat örnekleri yeterince kurutulur. Kurutulmuş toprak öğütmek için ahşap bir havaneli ve harç kullanın.
Sonra üç milimetrelik bir elek ile kum ve zemin toprak eleyip. Yüzeyleri içeren mühürlü torbalara gerekli miktarda distile su ekleyin ve iyice karıştırın. Daha sonra, polipropilen kapları altı eşit odaya bölmek için PVC levhalar kullanın.
PVC levhalar düzeltin ve sıcak tutkal ile çatlaklar mühür. Daha sonra, farklı nem içeriği ile substrat aynı tip ile altı odacıkları doldurun. Polipropilen kabın kapağının iç yüzeyine dört ila altı parça taze yaprak yapıştırmak için küçük bant parçaları kullanın.
Daha sonra, odacıklı kabın kapağına yapıştırılan yaprakların üzerine 30 olgun son yıldız larvası bırakın. Kapağı dikkatlice ters çevirin ve kabın üzerini kapatın. Bioassay arenasını 26 santigrat derecede 14 ila 10 ışık/karanlık fotoperi ile çevre odasında koruyun.
Beşinci günde, her odadaki substrat yüzeyindeki pupa sayısını sayın. Bioassay'ı sök ve pupa sayısını say. İlk olarak, polipropilen kapları dört odaya bölmek için PVC levhalar kullanın.
Sonra, düzeltmek ve sıcak tutkal ile PVC levhalar mühür. Aynı nem içeriği ve rasgele atanan siparişler ile dört tür substrat ile konteyner odaları doldurun. Daha sonra, kap üzerine çevirmeden önce kapak taze çay yaprakları yapıştırmak için bant kullanın.
Daha sonra larvaları yapraklara aktarın ve metin protokolünde belirtildiği gibi verileri kaydedin ve analiz edin. 12 substrat nem içeriği tedavisini hazırladıktan sonra, yüzeyi plastik kaplara ekleyin. Sonra her arenanın substrat içine 15 olgun son yıldız larvaları bırakın.
Bioassay arenalarının her birini 26 santigrat derecede 14 ila 10 ışık/karanlık fotoperi ile çevre odasında koruyun. Üçüncü günde, her arenanın yüzeyindeki pupa ve ölü larvaların sayısını sayın. Son olarak, 15 gün boyunca yeni yetişkinler ortaya çıkana kadar her gün ortaya çıkan yetişkin sayısını kaydedin.
Bu protokolde, E.grisescens'in yavrulama tercihini incelemek için nem ve substrat seçimi biyoasiler kullanılmıştır. Nem seçimi bioassays daha fazla kişi üzerinde veya içinde pupated gösterdi 5% ve 35% nem kum% 80 nem kum ile karşılaştırıldığında. Ancak, önemli ölçüde daha fazla kişi ara nem içeriği ile toprak içinde veya içinde pupate tercih etti.
Substrat seçimi bioassays kum en çok% 20 nem koşulları altında E.grisescens tarafından tercih olduğunu ortaya koymuştur, ve% 80 nem koşulları altında. Ancak% 50 nem koşulları altında dört substrat arasında hiçbir yavru tercihbulundu. Bu teknik, geliştirildikten sonra, entomoloji alanındaki araştırmacıların birçok toprak-pupating böceğinin yavru ekolojisini keşfetmelerinin önünü açmıştır.
