Bu çalışmaya 10 CIP hastası ve 12 NPCU alındı. Tüm hastalar İtalya'nın Milano Üniversitesi Policlinico Hastanesi'nin psikiyatrik merkezinde işe alındı, esrar kullanıcıları ise Milano yakalama bölgesine kaydedildi. Tüm hastalar stabil farmakolojik tedavi görüyordu. Sol veya sağ elini kullanan katılımcılar dahil edildi. Tüm katılımcıların alışılmış bir esrar tüketimi vardı ve uyuşturucunun türü, sıklığı ve süresi ile bağımlılığın sosyo-demografik, klinik ve psikososyal parametreleri ölçüldü. Çalışma yerel etik komitesi tarafından onaylandı.
1. Katılımcılar
<ol><li>Aşağıdaki dahil etme kriterlerini kullanın: Hastalar için: 18-45 yaş, Esrar kaynaklı Psikotik Bozukluğun DSM-IV tanısı, çalışma sırasında ve önceki 6 ayda ağır kenevir tüketimi. NPCU için: 18-45 yaş, DSM-IV tanısı yok, çalışma sırasında ve önceki 6 ayda ağır kenevir tüketimi.</li>
	<li>Aşağıdaki dışlama kriterlerini kullanın: zeka geriliği tanısı, mevcut herhangi bir büyük tıbbi veya nörolojik hastalık, bilinç kaybı ile travmatik kafa yaralanması öyküsü ve alkol bağımlılığı veya Axis II bozuklukları ve hamilelik de dahil olmak üzere diğer Axis I. Psikotik semptomların esrar kullanımının başlangıcından önce olmadığını ve akut yoksunluk veya şiddetli zehirlenmenin durmasından sonra önemli bir süre devam etmediğini doğrulayın. Yinelenen abonelikle ilgili olmayan bölümlerin geçmişinin olmadığını doğrulayın.</li>
	<li>Bilgilendirilmiş onay almak için katılımcılara onay formunu okuyun. Hem katılımcının hem de araştırmacının onay formunu mükerrer olarak imzalamasını bildirin. Kayıtlar için izin formunu saklayın.</li>
	<li>CIP hastalarının tanısını değerlendirmek için, 4. baskı, metin revizyonu (DSM-IV-TR)27.</li>
	<li>Bağımlılık sıklığını ve süresini belirlemek için, çocuk ve ergenler için yarı yapılandırılmış klinik görüşme kılavuzunu kullanın SCICA28.</li>
</ol>2. Klinik ve psikososyal değerlendirme
NOT: Tüm katılımcılara çeşitli klinik ve psikososyal ölçekler uygulandı.
<ol><li>Psikiyatrik semptomları değerlendirmek için Kısa Psikiyatrik Derecelendirme Ölçeği (BPRS)29, Genç Mania Derecelendirme Ölçeği (YMRS)30, Montgomery-Åsberg Depresyon Derecelendirme Ölçeği (MADRS)31, Hamilton Depresyon Derecelendirme Ölçeği (HAM-D)32 ve Hamilton Anksiyete Derecelendirme Ölçeği (HAM-A)33'ü kullanın.</li>
	<li>Partum sırasında veya hemen sonrasında travma veya enfeksiyon varlığını keşfetmek için Murray-Lewis Obstetrik Komplikasyonlar Ölçeği (MLOCS)34'ükullanın.</li>
	<li>İhmal veya istismar deneyimlerini değerlendirmek için, Bakım ve İstismarın Çocukluk Deneyimi Anketini (CECA-Q)kullanın 35.</li>
	<li>Sosyo-ekonomik durumu (SES) tahmin etmek için MacArthur36'nınSosyo-Ekonomik Durum Ölçeğini kullanın.</li>
	<li>Mahalle memnuniyeti (NS-A), güvenlik hissi (NS-B), bozulma seviyesi (NS-C), diğer vatandaşların olumsuz durumlara müdahale etme isteği (NS-D) ve maddelerin kabul derecesi (NS-E) açısından mahallenin belirli özelliklerini değerlendirmek için Komşuluk Ölçeği (NS)37'yi kullanın.</li>
	<li>Kişilik özelliklerini keşfetmek için Mizaç ve Karakter Envanterini (TCI-125) kullan38,39.</li>
	<li>Yaşam kalitesini ve küresel işleyişi değerlendirmek için sırasıyla Manchester Kısa Yaşam Kalitesi Değerlendirmesi (MANSA)40 ve Yaşam Kalitesi Endeksi (QL-endeksi)41 ve İşleyiş Küresel Değerlendirmesi (GAF)27 ölçeklerini kullanın. NOT: Tüm sosyo-demografik ve klinik veriler Tablo 1'deözetlenmiştir.</li>
</ol>3. Manyetik rezonans görüntüleme
<ol><li>Katılımcıyı 3 Tesla MRI tarayıcısının yatağına bir destek konumuna getirin.</li>
	<li>Katılımcının kafasına bir radyo frekansı (RF) bobini yerleştirin.</li>
	<li>Arka plan gürültüsünü engellemek için kulak tıkacı ve kulaklık sağlayın.</li>
	<li>Başı hareketsiz hale getirmek için köpük pedler takın.</li>
	<li>Deneğin hareketsiz kalmasını söyleyin.</li>
	<li>KONTROL ODASINDAKİ İş İstasyonuNDAN MRI seansını çalıştırın.<ol>
<li>Hizalama ve yerelleştirme için 3 düzlemli gradyan eko taraması çalıştırın ve homojen, sabit bir manyetik alan oluşturmak için bir dolgu prosedürü gerçekleştirin.</li>
		<li>MRI için eko-düzlemsel görüntüleme protokolü başlatın. Yüksek çözünürlüklü T1 ağırlıklı üç boyutlu beyin taramasının kazanım parametreleri görüntüleme programında zaten belirlenmiştir ve değiştirilmemelidir. Parametreler şunlardır: tekrarlama süresi [TR] = 9.8, yankı süresi [TE] = 4.6 ms, düzlemde voksel boyutu= 0.9375 × 0.9375, matris = 256 × 256, çevirme açısı = 8°.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Katılımcıyı MR tarayıcı odasından çıkarın. MR verilerini diske aktarın ve oturumu kapatın. NOT: Beyinciğın alt yönünden beynin büyük bir kısmını kapsayacak şekilde üstün bir şekilde uzanan toplam 185 bitişik 1 mm sagittal dilim sagittal lokalizatör taramasından seçilmiştir.</li>
</ol>4. Ön işleme adımları
NOT: MATLAB'da uygulanan İstatistiksel Parametrik Haritalama (SPM12) kullanılarak voksel bazlı morfometri analizi yapılmalıdır.
<ol><li>Grup analizlerini gerçekleştirmeden önce, Script_pre işlem komut dosyası dosyasında gösterilen aşağıdaki ön işleme adımlarını gerçekleştirin.<ol>
<li>Segmentasyon: Beyaz madde dokularını, gri madde dokularını ve beyin omurilik sıvısını farklı görüntülere ayırmak ve ayırmak için yapısal görüntüyü işleyin. Bu ayrım, orijinal görüntüdeki belirli dokuların voksel dağılımlarını tanımlayan model küme analizleri ile birlikte doku dağılımının genel bilgisinden detaylandırılmış olasılık haritalarının kombinasyonu sayesinde elde edilir. segment.mat toplu iş dosyasını çalıştırın.</li>
		<li>DARTEL (Exponentiated Lie cebiri ile Diffeomorfik Anatomik Kayıt) araçları: tüm katılımcıların GM ve beyaz madde görüntülerini kaydetmek için doğrusal olmayan deformasyonları belirleyin. create_template.mat toplu iş dosyasını çalıştırın.</li>
		<li>Normalleştirme: Mekansal normalleştirme aşamasında, MRI görüntülerini anatomik standart bir şablona uyarla. Bunun nedeni, her konunun beynin form ve organizasyonunda yapılardaki boyut ve morfolojik farklılıklar gibi çok az farklılık olmasıdır. normalize_to_MNI.mat toplu iş dosyasını çalıştırın.</li>
		<li>Mekansal Yumuşatma: Hareket düzeltmeden sonra, sinyal-gürültü oranını artırmak ve anatomik yapılardaki ince varyasyonları hesaba katmak için yarım maksimum Gauss çekirdeğinde 6 mm tam genişlikte bir izotropik Gauss çekirdeği gerçekleştirin. normalize_to_MNI.mat toplu iş dosyasını çalıştırın.</li>
		<li>SPM12 kullanarak toplam intrakraniyal hacmi (ICV) ayıklayın: GM, beyaz madde ve CSF sınıfı görüntülerdeki yoğunluk değerlerinin eklenmesi ve voksel hacimleriyle çarpılmasıyla elde edilebilir. NOT: Ön işleme tamamlandıktan sonra, verileri detaylandırmak mümkündür. NOT: Lütfen bu çalışmada kullanılan ön işleme adımlarının ve kullanılacak SPM komutlarının ayrıntılı bir açıklamasını sağlayan SPM el kitabına (https://www.fil.ion.ucl.ac.uk/spm/doc/spm12_manual.pdf) bakın. Lütfen bu çalışma için kullanılan tam ön işleme adımları ile ek malzemelerde yer alan komut dosyasına ve Matlab partilerine de bakın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. İstatistiksel analizler
<ol><li>Demografik, klinik ve psikososyal ölçekte iki grup arasındaki farklılıkları araştırmak için ki-kare testleri (kategorik değişkenler) ve iki örnek t testi (nicel değişkenler) gerçekleştirin.</li>
	<li>CIP hastaları ve NPCU arasındaki GM hacimlerini karşılaştırmak için Genel Doğrusal Model (GLM) tasarımı bağlamında tek yönlü Varyans Analizi (ANOVA) gerçekleştirin. Tüm analizlerde cinsiyet ve yaş kontrol değişkenleri olarak kullanılmıştır. Tek yönlü ANOVA toplu iş dosyasını çalıştırın.</li>
	<li>Bu çalışmada kullanılan tüm klinik ve psikososyal ölçeklerdeki puanların GM hacim değişiklikleriyle önemli ölçüde ilişkili olup olmadığını araştırmak için sadece CIP grubu için tüm beyin gerileme analizlerini gerçekleştirin. Herhangi bir beyin maskesi kullanmayın, ancak tüm vokselleri düşünün. Regresyon analizi toplu iş dosyasını klinik ilgi ölçeğiyle çalıştırın.</li>
	<li>Suprathreshold kümelerinin tepe maksimasının stereotaktik koordinatlarını MNI uzamsal dizisinden (www.mni.mcgill.ca) Talairach ve Tournoux42'yedönüştürün. NOT: Tüm nöroanatomik analizlerde, denekler arasındaki hacimsel farklılıklar, toplam intrakraniyal hacim (ICV) için orantılı ölçekleme ile dikkate alındı.<ol>
<li>ANOVA için, anlamlılık eşiğini en az k=30 küme boyutuyla p < 0,001 düzeltilmemiş olarak ayarlayın, çoklu regresyon analizleri için ise, düzeltilen bir p < 0,05 tepe Aile Açısından Hata (pFWE) önemli olarak kabul edildi ve en az k=10 küme boyutu kullanıldı. Bu çalışmada kullanılan küçük örneklem büyüklüğü nedeniyle eski eşik dikkate alındı ve bu nedenle bu analizden ortaya çıkan sonuçların ön kabul edilmesi gerekiyor. P değeri birden çok karşılaştırma için düzelt edildiğinden, ikinci eşik daha katıdır. NOT: İşlem sonrası adımlar (http://dbm.neuro.uni-jena.de/vbm8/VBM8-Manual.pdf) hakkında daha fazla bilgi için lütfen VBM8 El Kitabı'na bakın. Lütfen bu çalışma için kullanılan tam modele sahip ek malzemelerde yer alan "tek yönlü ANOVA" ve "Regresyon analizi" adlı Matlab partilerine de bakın. Bu çalışmanın keşif niteliği nedeniyle, resmi bir örneklem boyutu hesaplaması çok az değere sahip olacaktı ve bu nedenle yapılmadı.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

Bu çalışmada, sadece psikotik semptomların varlığının beyin morfolojik değişikliklerinin tespitini ayırdığını gözlemledik. Gerçekten de, CIP'li kronik esrar kullanıcıları, psikotik olmayan esrar kullanıcılarına (NPCU) kıyasla esas olarak prefronto-temporo-limbik ağda GM hacimlerinde azalma olduğunu göstermiştir. Ayrıca psikometrik anketler ile ilgili olarak, etki alanı BPRS-Activity ve seçici GM hacimleri arasındaki korelasyonlar vurgulanmıştır. Özellikle, bu bprs ölçeği ve sol üstün temporal korteks ve sol serebellum arasında negatif bir korelasyon gözlemledik, birlikte iki taraflı olarak çivi otu, sol inferior oksipital girus, sağ inferior parietal lobül ve sağ üstün prefrontal korteks ile pozitif korelasyon. Bununla birlikte, esrar bağımlılığı olmayan sağlıklı deneklerden oluşan bir kontrol grubunun olmamasının, esrar kullanımının beyin değişikliklerine neden olup olmadığını keşfetmemizi engellediğini belirtmeliyiz.
Genel olarak, önceki MRI çalışmaları şizofreni gibi psikotik bozuklukların, özellikle frontal ve temporo-limbik bölgelerde benzer GM anormalliklerini paylaştığını gösterdiğinden sonuçlar şaşırtıcı değildir29,30. Bununla birlikte, bazı kronik esrar kullanıcılarının neden psikotik semptomlar geliştirdiği, bazılarının ise neden sağlıklı kaldığı hala belirsizdir. Nitekim, örnekte, iki grup arasında sadece küçük klinik farklılıklar tespit ettik ve bu nedenle CIP grubunda gözlenen kapsamlı GM anormallikleri spesifik klinik profilleriyle ilişkili olmayabilir. Özellikle, 10 CIP hastasının 9'unda günlük esrar kullanımı rapor edilirken, NPCU grubundaki 12 hastanın 7'sine kıyasla. Ayrıca, iki grup arasında yaş, cinsiyet, esrar kullanımının başlama yaşı ve eğitim düzeyi açısından herhangi bir farklılık bulunmadı. Bununla birlikte, bu farklılıkların eksikliğinin, bu faktörleri istatistiksel olarak analiz etme ve yorumlama olasılığını da sınırlayan küçük örneklem boyutundan kaynaklanabileceğini düşünmeliyiz. Bir hipotez, esrar kullanımından bağımsız olarak beyin hacmindeki azalmadan psikotik sürecin kendisinin sorumlu olduğudur. Gerçekten de, önceki çalışmalar esrar tüketimi olan ve olmayan psikotik hastalar arasında GM farkı olmadığını göstermiştir, bu nedenle esrar kullanımının ilk bölüm psikotik hastalarda GM değişiklikleriyle ilgili olduğuna dair net bir kanıt bulamamak45. Bununla birlikte, esrar kullanımı beyin değişikliklerine ve daha sonra sadece duyarlı esrar kullanıcılarının bir alt grubunda psikoza katkıda bulunmuştur.
İlk hipotez, psikotik bozukluklarda beyin anormalliklerini gösteren çalışmalarla uyumludur. Özellikle, sonuçlar NPCU ile karşılaştırıldığında CIP hastalarının frontotemporal kortikal kortikaller, insula, hipokampus ve fusiform gyrus46gibi duygusal düzenlemede yer aldığı bilinen bazı beyin bölgelerinde kapsamlı GM hacmi düşüşleri olduğunu göstermiştir. İlginçtir ki, bu yapılardaki aksaklıklar, özellikle prefrontal bölgelerde, ergenlerde ve genç yetişkinlerde ruh hali dengesizliğini ve daha fazla duygusal reaktiviteyi, dürtüsel davranışları ve madde aramayı açıklayabilir33,34. Gerçekten de, duygu düzenleme / işlemenin duygusal limbik yapılar üzerinde bilişsel kontrolde yer alan bir dizi prefrontal beyin bölgesinin işe alınmasıyla ilişkili olduğu sürekli olarak bildirilmiştir. Örneğin, tütün içenler arasında duygusal düzenlemede daha büyük zorluklar, içmeyenlere kıyasla daha düşük frontal girus ve amigdala arasında daha zayıf bir bağlantı ile ilişkilendirilmiştir49. Bu nedenle, CIP hastaları arasında psikotik semptomların gelişiminin bu yapılar arasındaki müdahaleli denge ile ilişkili olması akla yatkın olabilir.
Ek olarak, CIP hastaları grubunun, çalışma belleği, yürütme işlevleri50 ve duygusal düzenleme51dahil olmak üzere önemli bilişsel işlevlerde yer alan önemli bir bölge olan dorsolateral prefrontal kortekste (DLPFC) bozulmalar gösterdiğini gözlemledik. Gerçekten de, DLPFC risk izleme bölgeleriyle birlikte çalıştığından, bu bulgu şaşırtıcı değildir, cip hastaları grubunda da değiştirilmiş olarak bulunan insula (son zamanlarda bağımlılık52'deyer aldığı tespit edilen salience ağının önemli biryapısı)ve ön singulat korteks gibi, sonuçta risklileri güvenli seçimlerden ayırt etmedeki bozuklukların DLPFC ve bu tür risk izleme bölgeleri arasında bir bozulmadan neden olabileceğini düşündürmektedir53.
Ayrıca, CIP hastaları üstün temporal kortekste GM hacminde azalma gösterdi. İlginçtir ki, bu sonuç, daha önce çok modlu nörogörüntüleme çalışması54tarafından bildirilen kanıtlarla uyumludur , daha büyük bir CIP hasta örneği (N = 16), çoğunluğu cip hastalarında temporal kortikal kortikallerde kapsamlı GM değişikliği bulan bu çalışmada kullanılan örnekle örtüştürür. Genel olarak bu tür kanıtlar, psikozdaki üstün zamansal korteksin kilit rolünü daha da doğrular, çünkü bu yapının katılımı, dil işleme ve zihin yetenekleri teorisi de dahil olmak üzere psikotik hastalarda sıklıkla bozulan yeteneklerde sürekli olarak bildirilmiştir39,40. Ayrıca, bu bölgenin hacim azaltmaları ile işitsel halüsinasyon veya düşünce bozuklukları arasındaki ilişkiyi bildiren önceki kanıtlarla uyumlu sonuçlar41,42 ve bu alanın maddeye bağımlı bireylerde sağlıklı kontrollere kıyasla bozulmasını öneren önceki bir MRI çalışmasıile uyumlu 59.
Son olarak, CIP hastalarında hipokampusta anlamlı bir GM hacmi azalması sonuçlardan ortaya çıkmıştır. Bu bulgu, sağlıklı kontrollere kıyasla erken psikozlarda ve risk altındaki zihinsel durum/ilk bölüm psikozunda bu yapıdaki yapısal ve fonksiyonel değişiklikleri gösteren önceki kanıtlarla uyumludur60,61,62,63. Hafıza ve duygusal davranış48,49 dahil olmak üzere bir dizi zihinsel işlev için normal hipokampal fonksiyon gereklidir ve bu yapıdaki azaltılmış hacmin ilk bölüm psikozu olan hastalarda olumsuz bir klinik sonucun işaretleyicisini temsil edebileceği önerilmiştir66. Bununla birlikte, sonuçların aksine, bu bölgede daha ince kortikallere sahip olduğu ve hacimlerinin azaldığı tespit edilen genç ve yetişkin esrar kullanıcılarında hipokampal açıkları bildirilmiştir67,68,69,70. Bu nedenle, hipokampüsün madde bağımlılığındaki rolü hakkında net bir tabloya hala sahip olunmamıştır. Bununla birlikte, sonuçlar, önceki bir MRI çalışması54 tarafından da önerildiği gibi, KORTIKO-limbik sistemin CIP hastaları grubunda tehlikeye atıldığını ve gelecekteki psikotik gelişimin kritik bir habercisi olduğu öne sürülen duygusal detaylandırma açıklarını açıklayabileceği hipotezine işaret eder55,56, genellikle bu hastalarda gözlenir.
Bu nedenle, esrar kaynaklı psikozun prefronto-temporo-limbik ağ içindeki bölgelerdeki beyin değişiklikleriyle ilişkili olduğunu varsaymak mantıklı görünmektedir, bu nedenle birden fazla psikoz formunun ortak bir nörogelişimsel substratını temsil edebilir. İlginçtir ki, boyuna çalışmalar, daha küçük orbitofrontal korteks hacimleri73, fronto-parietal ve azalmış görsel ilişki bölgeleri aktivasyonu ve daha zayıf yürütme işlevleri74gibi bilişsel eksiklikler de dahil olmak üzere bazı beyin bozulmalarının esrar bağımlılığının başlatılmasından önce bile mevcut olabileceğini önermiştir. Bu nedenle, alttaki beyin değişiklikleri olan bu bireylerin esrar kullanımı başlatmadan sonra psikotik semptomlar geliştirme olasılığı daha yüksek olabilir. Ek olarak, dopamin sinyalizasyonunda yer alan AKT1 ve DRD2 genlerinde risk alellerine sahip etmenin, esrar kullanımından sonra psikoz gelişme riskinin artmasıyla ilişkili olduğunu bildiren kanıtlar vardır3. Bu nedenle, CIP hastalarında morfolojik düşüşlerin tespiti, bu denek grubunda kronik esrar kullanımının nörotoksik etkisine karşı artırılmış bir genetik duyarlılığı yansıtabilir.
Son olarak, CIP grubunda, sonuçlar ayrıca BPRS'nin bir alt etki alanı, BPRS Aktivitesi ve sol üstün temporal korteks ve sol serebellum içindeki seçici GM hacimleri arasında negatif bir korelasyon göstermiştir. Ayrıca, bu alt ölçek iki taraflı olarak çivi yazısı, sol inferior oksipital girus, sağ inferior parietal lobül ve sağ üstün prefrontal korteks ile pozitif olarak ilişkiliydi. Genel olarak, klinik semptomatoloji ve GM yapıları arasındaki korelasyonlar yaygın olarak bildirilmiş olmasına rağmen, özellikle şizofreni75, sonuçlar hala heterojendir, ters76,pozitif77 veya seçici GM hacimleri ile klinik ölçekler arasında78 korelasyonları karışık bir tablo ile. Özellikle, BPRS-Aktivite ve üstün temporal korteks arasında gözlenen negatif korelasyon, bu yapı ile pozitif semptom şiddeti arasındaki ters korelasyonları gösteren önceki MRI kanıtları ile uyumlu görünmektedir76, sonuçta bu yapının psikotik semptomların üretimindeki kilit rolünü daha da göstermektedir. Benzer şekilde, BPRS-Aktivitesi ve üstün prefrontal korteks arasında bulunan pozitif korelasyon, negatif semptomlar ve GM hacimleri arasında prefrontal korteks79ile benzer bir korelasyon bildiren diğer MRI çalışmaları ile aynı fikirde görünmektedir.
Bir bütün olarak, mevcut çalışmanın sonuçları, beyin değişikliği ve psikopatolojinin şiddeti arasında önemli bir ilişki olduğuna dair ön kanıtlar salaladdır.
Mevcut çalışma bazı sınırlamalardan muzdariptir. İlk olarak, tüm psikotik hastalar sonuçları etkileyebilecek farmakolojik tedaviler alıyordu. İkincisi, esrara maruz olmayan sağlıklı denekler tarafından oluşturulan bir kontrol grubunun olmaması, iki grup esrar kullanıcısı (psikotik ve değil) ile daha fazla karşılaştırmaya izin vermez. Ayrıca, denek sayısı açısından iki grup çok benzer olmasına rağmen (10 CIP hastası vs 12 NPCU), küçük örneklem büyüklüğü elde edilen sonuçların önemini sınırlamakta ve bu nedenle ön kabul edilmelidir. Daha fazla sınırlama, araştırılan nüfusun doğasıyla kesinlikle bağlantılıdır. Nitekim, CIP (6/10) ve NPCU 'nun (3/12) oldukça küçük bir oranı olan bazı hastalarda ömür boyu başka madde tüketimi öyküsü (örneğin, kokain, LSD ve eroin/ metadon) vardı. Ayrıca, bağımlılıkla bağlantılı genetik alelleri incelemedik, bu da iki grubun ayırt olmasına yardımcı olabilirdi. Bununla birlikte, esrar tüketimi, belirli bir araç20ile sıklık ve hacim ve süre açısından değerlendirilmekle birlikte, iki grup arasında tekdüze değildi. Son olarak, bu çalışmada beyin aktivasyonunu araştırmadık ve örneğin nörokinetif durumunu değerlendirmedik. Bu nedenle, bu bilgilerin eksikliği sonuçları etkilemiş olabilir, çünkü önceki çalışmalar medial prefrontal korteks, orbitofrontal korteks ve amigdalada madde bağımlılığı olan şizofreni hastalarında seçici beyin işlev bozukluklarının varlığını gösterdiğinden, madde bağımlılığı olmayan aynı hastalara kıyasla daha uzun süreli bir düşüşle daha iyi bir premorbid nörokcognitive profil80. Bu nedenle, sonuçlarımızı doğrulamak için beyin aktivitesini keşfeden daha fonksiyonel MRI çalışmaları ve daha büyük örnekler üzerinde nöropsikolojik değerlendirmeler ve homojen tüketim alışkanlıkları gereklidir.
Sonuçlarımıza göre, esrar kaynaklı psikoz seçici beyin yapılarında GM hacmi düşüşleri ile karakterize edilebilir. Bu nedenle, endokannabinoid sisteminin beyindeki önemli ve kapsamlı rolü, esrar kullanımının artan yaygınlığı, nörogelişim sırasında kronik kullanımı ve mevcut pazardaki giderek daha yüksek THC konsantrasyonu göz önüne alınırsa, esrar maruziyetinin hangi yönlerinin (örneğin, başlatma yaşı, miktar, sıklık ve süre) psikotik ilişkili bozukluklara doğru ilerleme için en büyük riski belirlediğini açıklığa kavuşturmak zorunlu görünmektedir. Bununla birlikte, prefronto-temporo-limbik bölgelerdeki azalmaların psikotik sürecin bir alt tabakasını mı yoksa hassas denekler arasında esrar maruziyetinin doğrudan bir sonucunu mu temsil ettiği karmaşık bir konu olmaya devam etmektedir. Bu bağlamda, çalışmada kullanılan yöntemler esrar kaynaklı psikozun nörobiyolojik ve klinik özelliklerini daha iyi karakterize etmek için yararlı olabilir. Son olarak, esrar dozu, potens, THC/ Cannabidiol oranı, kullanım sıklığı, başlangıç yaşı, tanıdık psikoz öyküsü ve genetik polimorfizmler gibi potansiyel kafa karıştırıcı faktörleri de dikkate alan boyuna nörogörüntüleme çalışmaları, klinisyenlerin psikoz geliştirme olasılığı daha yüksek olan esrar kullanıcılarını tespit etmelerine yardımcı olabilecek putatif biyobelirteçleri tanımlamak için potansiyel bir zemin sağlayabilir.

Avrupa Uyuşturucu ve Uyuşturucu Bağımlılığı İzleme Merkezi'ne göre, Avrupa Birliği'ndeki yetişkinlerin yaklaşık 96 milyonunun (veya% 29'unun) yaşamları boyunca esrar başta olmak üzere yasadışı uyuşturucu denedikleri tahmin edilmektedir. Genel nüfusun en genç ve en savunmasız kısmı göz önüne alındığında, genç yetişkinlerin tahmini% 16'sı (15-34 yaş arası) son bir yıliçinde esrar kullandı ve erkek-kadın oranı yaklaşık 2:11 . Daha da önemlisi, esrar kullanımı, ruh hali değişiklikleri, artan anksiyete, yarış düşünceleri, çarpık algılar, düşünme ve problem çözmede zorluk, öğrenme ve hafıza ile ilgili devam eden sorunlar, yavaş reaksiyon süresi ve kontrol kaybı gibi sağlıklı konularda psikiyatrik semptomların gelişmesine yol açıyor gibi görünmektedir2. Bununla birlikte, bu tür belirti ve semptomlar normalde geçicidir ve psikiyatrik bir durumu veya bir tedavinin ihtiyacını özetlemez. Bununla birlikte, esrar, tetrahidrokannabinol (THC) adı verilen ana psikoaktif bileşeni aracılığıyla, şüphelilik de dahil olmak üzere olumlu psikotik semptomlara neden olabilir, paranoyak sanrılar, düşünce süreçleri bozuklukları ve algısal değişiklikler3, ayrıca körelmiş etki, ilgisizlik, avolition, doğallık eksikliği, ilgi eksikliği, pasiflik ve bilişsel eksiklikler (örneğin, hafıza, yürütme işlevi, soyut yetenek, karar verme ve dikkat) gibi şizofrenide gözlenenlere benzer olumsuz semptomlar3. Bu nedenle, şu anda, esrar tüketiminin hem sağlıklı konularda geçici psikiyatrik semptomlara neden olabileceğine hem de önceki psikotik riski olan hastalarda florid psikotik bir tablonun maskesini çekebileceğine dair kanıtlarvardır 3. Ancak, bu ilişkinin nedensel mi yoksa tamamen korelasyonel mi olduğu hala tartışmalıdır ve tartışılır4. Gerçekten de, ağır kenevir tüketimi ile psikoz riski arasında bir ilişki olduğunu öne süren epidemiyolojik çalışmalara rağmen5, dünya çapında artan esrar kullanım insidansına psikoz artmış bir insidans eşlik etmez4. Bu paradoks, esrar istismarcıları arasında, kullanımın erken başlaması, yüksek etkili esrarın günlük varsayımı ve en büyük psikotik riski taşıyan sentetik kannabinoidlerin tüketimi ile ilgili özel kafa karıştırıcı farklılıkların varlığı ile açıklanabilir3. Ayrıca, spesifik katekolü-O-metiltransferaz (COMT) polimorfizmlerinin varlığı gibi bazı genetik faktörler, kullanıcıların küçük bir kısmında esrar maruziyeti sonrası psikotik semptomlar geliştirmek için artırılmış bir güvenlik açığı verebilir6.
Bu bağlamda, insan nörogörüntüleme çalışmaları esrarın psikotik semptomlara yol açabileceği potansiyel sinir mekanizmalarını araştırmaya çalıştı7Preklinik çalışmalar daha önce THC'nin hipokampus, amigdala, striatum ve prefrontal korteks (PFC) dahil olmak üzere kannabinoid tip 1 reseptörleri (CB1R) bakımından zengin beyin bölgelerinde aktif olduğunu göstermiştir8. Gerçekten de, sağlıklı esrar kullanıcılarına deneysel THC yönetiminin bir öğrenme görevi sırasında ventrostriatal aktivasyonu zayıflatığı ve aynı zamanda psikotik semptomlar9'u ve dikkatli salience işlemi sırasında değiştirilmiş prefrontal-striatal aktivasyonu teşvik ettiği gösterilmiştir10. Yapısal manyetik rezonans görüntüleme (MRI) çalışmaları ile ilgili olarak, bazı yazarlar prefrontal korteks11 , 12 , 13,hipokampus14,15,amig'de önemli gri madde (GM) hacim azalmaları tespit etti. normal esrar kullanıcılarında16 ve putamen17 kullanıcı olmayanlara kıyasla, diğerleri bu iki grup arasında önemli bir beyin farkı bildirmedi18,19,20,21 veya medial zamansal içinde GM hacimlerinin arttığını bildirdi, amigdala, hipokampus, posterior cingulate ve düşük esrarlı ergenler arasında serebellum22kullanır.
Ayrıca, çok az çalışma, psikotik semptomları olan esrar kullanıcıları ile herhangi bir psikiyatrik durum olmadan esrar kullanıcıları arasında belirli bir beyin farkı olup olmadığını araştırdı. Bir fonksiyonel MRI çalışması, THC tüketiminden sonra psikotik semptomlar yaşayan ve yaşamayan sağlıklı denekleri karşılaştırdı ve sağ orta temporal girusta bir go / no-go görevi sırasında aktivitenin arttığını ve hem parahippocampal hem de fusiform giride aktivitenin azaldığını bildirdi, bu da sadece psikotik grupta daha fazla inhibisyon hataları ileilişkiliydi 23. Buna karşılık Epstein ve Kumra, esrar kullanım bozukluğu olan hem psikotik hem de nonpsikotik ergenlerin benzer beyin değişikliklerini paylaştığının; özellikle, sol üst frontal girus, sağ pars triangularis, sol pars opercularis, sol ve sağ supramarginal gyri, sol ve sağ alt parietal kortikaller ve sol üstün temporal girusta her iki grupta da zayıflatılmış kortikal inceltme tespit ettiler24. Daha önceki bir çalışmada, aynı yazarlar erken başlangıçlı şizofreni (EOS) ile (EOS+) ve (EOS-) esrar kullanım bozukluğu (CUD) olmayan ergenleri, sadece CUD'li ergenleri ve sağlıklı kontrollerikarşılaştırdı 25 . İlginçtir ki, hem EOS hem de CUD gruplarında sol üstün parietal bölgede sağlıklı kontrollere kıyasla daha küçük gri madde hacimleri tespit ettiler. Ancak EOS+'lı ergenlerde diğer gruplara göre katkılı hacimsel değişikliklere rastlamadılar. Son olarak, daha yeni ve daha büyük bir çalışma, bir ergen örneğinde ömür boyu esrar tüketiminden psikotik yaşam deneyimlerine kadar önemli bir toplam etki buldu. İlginçtir ki, yazarlar psikotik yaşam deneyimleri ile sağ hipokampus / parahippocampus26'nınkesilmemişleri içinde azaltılmış genişleme arasında bir ilişki buldular.
Bu nedenle, bu çalışmalar, hepsi konkordato olmasa da, esrar kaynaklı psikozun saf psikotik bozukluklarda tespit edilenlere benzer şekilde nörobiyolojik eksikliklerle karakterize olabileceğini göstermektedir. Bununla birlikte, esrar bağımlılığı ile belirlenen ve nörogörüntürleme araştırmalarıyla vurgulanan beyin değişikliklerinin klinik olarak önemli bir fenotipe mi yoksa bir istismarcının hayatının bir noktasında psikotik bir salgına mı yol açacağı hala belirsizliğini korumaktadır. Bu bağlamda, psikotik esrar kullanıcıları arasında beyin morfolojisinin herhangi bir psikiyatrik semptomu olmadan esrar kullanıcıları ile karşılaştırıldığında araştırılması, esrar kaynaklı psikozun nörobiyolojik temellerini anlamak için çok önemli olabilir. Bununla birlikte, bildiğimiz kadarıyla, şimdiye kadar hiçbir çalışma esrar kaynaklı psikotik konuları sağlıklı esrar kullanıcıları ile psikopatoloji, bağımlılık sıklığı ve süresi, yaşam kalitesi, kişilik özellikleri, doğum komplikasyonu ve çocukluk istismarı gibi beyin yapısal morfolojisi ve klinik parametreler açısından karşılaştırmamıştır. Bu bağlamda, bu çalışmanın amacı madde kaynaklı psikozlu (CIP) kronik esrar kullanıcıları ile psikotik olmayan esrar kullanıcıları (NPCU) arasındaki morfolojik beyin farklılıklarını araştırmak ve beyin açıklarını seçici sosyo-demografik, klinik ve psikososyal değişkenlerle ilişkilendirmektir. CIP hastalarının GM hacimlerinde NPCU'ya kıyasla önemli azalmalar göstereceğini ve GM hacimleri ile sosyo-demografik, klinik ve psikososyal ölçekler arasındaki olası korelasyonları göstereceğini vardır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Not applicable</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

brain morphology of cannabis users with or without psychosis: a pilot mri study

Esrar, dünya çapında en sık kullanılan yasadışı ilaçtır ve tüketimi hem sağlıklı konularda psikiyatrik semptomlara neden olabilir hem de önceden psikotik riski olan hastalarda florid psikotik bir tablonun maskesini çekebilir. Önceki çalışmalar, kronik ve uzun süreli esrar maruziyetin kannabinoid reseptörleri ile zenginleştirilmiş beyin bölgelerinde önemli olumsuz etkiler yaratabileceğini göstermektedir. Bununla birlikte, esrar bağımlılığı ile belirlenen beyin değişikliklerinin klinik olarak önemli bir fenotipe mi yoksa bir istismarcının hayatının bir noktasında psikotik bir salgına mı yol açacağı belirsizliğini korumaktadır. Bu çalışmanın amacı, esrar kaynaklı psikozlu (CIP) kronik esrar kullanıcıları ile psikotik olmayan esrar kullanıcıları (NPCU) arasındaki morfolojik beyin farklılıklarını herhangi bir psikiyatrik durum olmadan araştırmak ve beyin açıklarını seçici sosyo-demografik, klinik ve psikososyal değişkenlerle ilişkilendirmektir.
10 CIP hastası ve 12 NPCU'nun 3T manyetik rezonans görüntüleme (MRG) taramaları alındı. İlacın türü, sıklığı ve süresi ile bağımlılığın sosyo-demografik, klinik ve psikososyal parametreleri ölçüldü. CIP hastalarında psikozsuz kronik esrar kullanıcılarına kıyasla sağ üst frontal girus, sağ presenal, sağ üstün temporal girus, insula bilateral, sağ preküneus, sağ medial oksipital girus, sağ fusiform girus ve sol hipokampusta geniş gri madde (GM) azalmaları vardı. Son olarak, CIP hastalarında, sonuçlar Kısa Psikiyatrik Derecelendirme Ölçeği (BPRS), BPRS-Aktivite ve seçici GM hacimlerinin bir etki alanı arasında negatif bir korelasyon göstermiştir. Genel olarak, sonuçlar esrar kaynaklı psikozun NPCU'da bulunmayan seçici beyin küçültmeleri ile karakterize olduğunu göstermektedir. Bu nedenle, nörogörüntüleme çalışmaları, esrar kullanıcılarında psikoz gelişme riski ile ilişkili putatif biyobelirteçleri tanımlamak için potansiyel bir zemin sağlayabilir.

Sosyo-demografik, klinik ve psikososyal sonuçlar CIP hastaları ile NPCU arasında cinsiyet (χ2 =0,6, p=0,4), yaş (t=-0,21; p=0,83), bağımlılığın başlama yaşı (t=-0,79; p=0,44) ve eğitim düzeyi (t=1,21; p=0,24) açısından fark yoktu. Bununla birlikte, cip hastalarının NPCU'ya göre daha yüksek puan gösterdiği TCI'nın bir mizaç boyutunda (Harm Avoidance, t=3.71; p=0.001) ve tek karakter boyutunda (Self-Transcendence, t=2.94; p=0.008) iki grup arasında bazı farklılıklar gözlenmiştir. Son olarak, NPCU ayrıca Mahalle Ölçeğinin (NS-E) bir alt boyutunda (t=-3.55; p=0.002), SES toplamında (t=-2.13; p=0.046), Yaşam Kalitesi-İndeksinde (t=-8.1; p=0.0001), GAF'ta (t=-4.71; p=0.0001) ve TCI'nın bir karakter boyutunda (Öz Yönlendirme, t=-3.97; p=0.001).
Özellikle, CIP için, esrar bağımlılığı sıklığı 9 denek için günlüktü (%90) ve haftada birkaç kez 1 konu (%10). Bunun yerine, NPCU grubunda esrar bağımlılığı sıklığı 7 denek için günlüktü (%60), 4 denek için haftada birkaç kez (%30) ve 1 konu için ayda birden fazla kez (%10). Bağımlılığın ortalama başlangıç yaşı CIP hastaları için 18, NPCU grubu için 16 yaşındaydı. Tüm katılımcılar esrar almasına rağmen, bazı CIP hastaları (N=6) ve NPCU (N=3) kokain, LSD ve eroin / metadon da dahil olmak üzere diğer uyuşturucuların daha önce kullanıldığını, ancak esrardan daha düşük sıklıkta olduğunu bildirdi. Esrar kullanım sıklığı iki grup arasında farklılık göstermemedi (χ2=1.69, p=0.42). Ayrıca, iki grup arasında kokain, eroin/metadon ve LSD kullanımının türü ve sıklığında istatistiksel bir fark gözlenmedi (kokain: χ2=0.06, p=0.79 ve χ2=4.1, p=0.39; eroin/metadon: χ2=1.2, p=0.26 ve χ2=1.2, p=0.26; LSD: χ2=0,01, p=0,89 ve χ2=2,0, p=0,36). Örnekte poli-tüketimin bulunmasının bulguların genellenebilirliğini olumsuz etkilemiş olabileceğinin farkında olsak da, diğer ilaçların kullanımının esrar kullanımına kıyasla çok sınırlı olduğunu vurgulamak önemlidir. Gerçekten de, esrar kullanımının aksine, diğer ilaçların tüketimi ömür boyuydu ve çalışma sırasında gerçekleşmedi. Bununla birlikte, sonuçlarımız dikkatli bir şekilde alınmalı ve daha homojen bir örnekte çoğaltılmalıdır.
VBM sonuçları VBM analizi, CIP hastalarının sağ üst frontal girusta ((Brodmann bölgesi [BA] 10), sağ presenal (BA 4), sağ üstün temporal girusta (BA 22), iki taraflı insula'da NPCU'ya kıyasla geniş GM düşüşleri olduğunu göstermiştir. (BA13), sağ preküneus (BA7), sağ medial oksipital girus (BA 19), sağ fusiform girus (BA 37) ve sol hipokampus (s < 0.001 düzeltilmemiş; Tablo 2 ve Şekil 1). NPCU'da CIP hastalarına göre GM farkı görülmedi.
GM bölgeleri ile klinik ölçekler arasındaki korelasyonlar CIP hastalarında, sonuçlar BPRS'nin bir etki alanı arasında negatif bir korelasyon göstermiştir, BPRS Aktivitesi ve sol üstün temporal korteks içindeki seçici GM birimleri (BA 38, x=-40 y=17 z=-35, z=5.9, küme büyüklüğü=19) ve sol beyincik (x=-12 y=-36 z=-20, z=6.1, küme boyutu=18). Ayrıca, aynı ölçek iki taraflı olarak cuneus ile pozitif olarak ilişkiliydi (BA 18; sol: x=-9 y=-90 z=9, z=7.0, küme büyüklüğü=24; sağ: x=15 y=-85 z=24, z=7.3, küme büyüklüğü=13), sol inferior oksipital girus (BA 17; x=-9 y=-88 z=-6, z=7.4, küme büyüklüğü=34), sağ alt parietal lobül (BA 40; x=58 y=-35 z=22, z=6.7, küme boyutu=33), sağ üstün prefrontal korteks (BA 9; x=3 y=51 z=29, z=6.2, küme boyutu=23) (tüm p<0.05 pFWE düzeltildi). CIP hastalarında diğer klinik ölçeklerin hiçbirinde anlamlı korelasyon gözlenmedi.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60881/60881fig01.jpg"> Şekil 1: Madde kaynaklı psikoz (CIP) hastaları ile psikotik olmayan esrar kullanıcıları arasında anlamlı GM farkı olan bölgeler (s<0.001, düzeltilmemiş, k=30). Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görüntülemek <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60881/60881fig01large.jpg" target="_blank">için lütfen tıklayınız.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td rowspan="2"></td>
			<td>CIP hastaları</td>
			<td>Psikotik olmayan esrar kullanıcıları</td>
			<td rowspan="2">İstatistik</td>
			<td rowspan="2">p değeri</td>
		</tr><tr><td>n=10</td>
			<td>n=12</td>
		</tr><tr><td>Yaş, ortalama (SD)</td>
			<td>27 (9.21)</td>
			<td>26 (0.89)</td>
			<td>t= -0.213</td>
			<td>p=0,833</td>
		</tr><tr><td>Seks, erkek/kadın</td>
			<td>8/2</td>
			<td>11/1</td>
			<td>χ2=0.630</td>
			<td>p=0,427</td>
		</tr><tr><td>Esrar kullanımının başlama yaşı, ortalama (SD)</td>
			<td>18 (9.69)</td>
			<td>16 (1.83)</td>
			<td>t= -0.786</td>
			<td>p=0,441</td>
		</tr><tr><td rowspan="7">Tür (N); diğer uyuşturucu kullanım sıklığı</td>
			<td>Esrar (N=10); Günlük (N=9), haftada birden çok kez (N=1).</td>
			<td>Esrar (N=12); Günlük (N=7), haftada birden çok kez (N=4), ayda birden çok kez (N=1).</td>
			<td>Sıklık: χ2=1.69,</td>
			<td>p=0,42</td>
		</tr><tr><td rowspan="2">Kokain (N=4); haftada birden çok kez (N=2), ayda birden çok kez (N=2).</td>
			<td rowspan="2">Kokain (N=3); haftada birden çok kez (N=1), ayda birden çok kez (N=1), ayda birden az (N=1).</td>
			<td>Tür: χ2=0.06</td>
			<td>Türü: p=0.79</td>
		</tr><tr><td>Frekans: χ2=4.1</td>
			<td>Frekans: p=0.39</td>
		</tr><tr><td rowspan="2">Eroin/Metadon (N=1); haftada birden fazla kez.</td>
			<td rowspan="2">Eroin/Metadon kullanıcısı yok.</td>
			<td>Tür: χ2=1.2</td>
			<td>Türü: p=0.26</td>
		</tr><tr><td>Frekans: χ2=1.2</td>
			<td>Frekans: p=0.26</td>
		</tr><tr><td rowspan="2">LSD (N=1); ayda bir taneden az.</td>
			<td rowspan="2">LSD (N=1); ayda birden fazla kez.</td>
			<td>Tür: χ2=0.01</td>
			<td>Türü: p=0.89</td>
		</tr><tr><td>Frekans: χ2=2.0</td>
			<td>Frekans: p=0.36</td>
		</tr><tr><td>Başlangıç yaşı, ortalama (SD)</td>
			<td>25 (8.46)</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
		</tr><tr><td>BPRS TOT, ortalama (SD)</td>
			<td>43 (9)</td>
			<td>20 (3)</td>
			<td>t=8.860</td>
			<td>p=0,0001</td>
		</tr><tr><td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Anksiyete-Depresyon</td>
			<td>10 (5)</td>
			<td>6 (2)</td>
			<td>t=2.629</td>
			<td>p=0,016</td>
		</tr><tr><td>Anerjiya</td>
			<td>8 (3)</td>
			<td>4 (1)</td>
			<td>t=3.284</td>
			<td>p=0,004</td>
		</tr><tr><td>Düşünce Bozuklukları</td>
			<td>12 (3)</td>
			<td>4 (0)</td>
			<td>t=9.754</td>
			<td>p=0,0001</td>
		</tr><tr><td>Etkinlik</td>
			<td>6 (2)</td>
			<td>3 (0)</td>
			<td>t=4.557</td>
			<td>p=0,0001</td>
		</tr><tr><td>Düşmanlık- Şüphe</td>
			<td>8 (4)</td>
			<td>3 (0)</td>
			<td>t=4.053</td>
			<td>p=0,001</td>
		</tr><tr><td>HAM-D, ortalama (SD)</td>
			<td>11 (6.42)</td>
			<td>4 (4.96)</td>
			<td>t=3.258</td>
			<td>p=0,004</td>
		</tr><tr><td>HAM-A, ortalama (SD)</td>
			<td>11 (6.62)</td>
			<td>3 (3.93)</td>
			<td>t=3.487</td>
			<td>p=0,002</td>
		</tr><tr><td>MADRS, ortalama (SD)</td>
			<td>14 (7.76)</td>
			<td>6 (6.35)</td>
			<td>t=2.635</td>
			<td>p=0,016</td>
		</tr><tr><td>YMRS, ortalama (SD)</td>
			<td>13 (7.92)</td>
			<td>0 (1.44)</td>
			<td>t=5.378</td>
			<td>p=0,0001</td>
		</tr><tr><td>CECA-Q, ortalama (SD)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>CECA-QMA</td>
			<td>13 (5.20)</td>
			<td>13 (3.89)</td>
			<td>t=-0.069</td>
			<td>p=0,946</td>
		</tr><tr><td>CECA-QMN</td>
			<td>19 (5.83)</td>
			<td>19 (4.64)</td>
			<td>t=-0.284</td>
			<td>p=0,779</td>
		</tr><tr><td>CECA-QPA</td>
			<td>14 (6.44)</td>
			<td>14 (5.56)</td>
			<td>t=-0.130</td>
			<td>p=0,990</td>
		</tr><tr><td>CECA-QPN</td>
			<td>24 (11.69)</td>
			<td>24 (7.12)</td>
			<td>t=0,070</td>
			<td>p=0,945</td>
		</tr><tr><td>Komşuluk ölçeği*, ortalama (SD)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>NS- A</td>
			<td>9 (1.78)</td>
			<td>8 (2.23)</td>
			<td>t=0,782</td>
			<td>p=0,443</td>
		</tr><tr><td>NS- B</td>
			<td>6 (2.50)</td>
			<td>7 (1.56)</td>
			<td>t=-1.070</td>
			<td>p=0,298</td>
		</tr><tr><td>NS- C</td>
			<td>9 (5.87)</td>
			<td>10 (7.66)</td>
			<td>t=-0.265</td>
			<td>p=0,794</td>
		</tr><tr><td>NS-D</td>
			<td>6 (2.31)</td>
			<td>5 (1.53)</td>
			<td>t=1.378</td>
			<td>p=0,183</td>
		</tr><tr><td>NS-E</td>
			<td>3 (1.35)</td>
			<td>4 (0.29)</td>
			<td>t=-3.546</td>
			<td>p=0,002</td>
		</tr><tr><td>SES** toplam, ortalama (SD)</td>
			<td>33.6 (12.60)</td>
			<td>45.3 (13.05)</td>
			<td>t=-2.132</td>
			<td>p=0,046</td>
		</tr><tr><td>Okumak</td>
			<td>11.3 (4.22)</td>
			<td>15.3 (5.93)</td>
			<td>t=-1.800</td>
			<td>p=0,087</td>
		</tr><tr><td>Meslek</td>
			<td>22.3 (10.39)</td>
			<td>30.0 (8.79)</td>
			<td>t=-1.885</td>
			<td>p=0,074</td>
		</tr><tr><td>QL - Dizin, ortalama (SD)</td>
			<td>6 (1.65)</td>
			<td>10 (0.62)</td>
			<td>t=-8.098</td>
			<td>p=0,0001</td>
		</tr><tr><td>GAF, ortalama (SD)</td>
			<td>58 (15.21)</td>
			<td>83 (9.68)</td>
			<td>t=-4.715</td>
			<td>p=0,0001</td>
		</tr><tr><td>MANSA, ortalama (SD)</td>
			<td>54 (14.16)</td>
			<td>61 (6.01)</td>
			<td>t=-1.250</td>
			<td>p=0,226</td>
		</tr><tr><td>TCI, ortalama (SD)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>TCI Ns</td>
			<td>59.92 (10.75)</td>
			<td>55.95 (12.86)</td>
			<td>t=0.173</td>
			<td>p=0,864</td>
		</tr><tr><td>TCI Ha</td>
			<td>55.67 (7.71)</td>
			<td>45.61 (5.68)</td>
			<td>t=3.708</td>
			<td>p=0,001</td>
		</tr><tr><td>TCI Rd</td>
			<td>48.67 (10.41)</td>
			<td>50.49 (9.02)</td>
			<td>t=-0.668</td>
			<td>p=0,512</td>
		</tr><tr><td>TCI P</td>
			<td>49.82 (11.49)</td>
			<td>39.32 (8.83)</td>
			<td>t=2.033</td>
			<td>p=0,056</td>
		</tr><tr><td>TCI Sd</td>
			<td>28.64 (11.85)</td>
			<td>49.89 (7.42)</td>
			<td>t=-3.969</td>
			<td>p=0,001</td>
		</tr><tr><td>TCI Co</td>
			<td>42.15 (12.21)</td>
			<td>49.07 (5.60)</td>
			<td>t=-1.430</td>
			<td>p=0,168</td>
		</tr><tr><td>TCI St</td>
			<td>65.56 (12.34)</td>
			<td>50.82 (8.16)</td>
			<td>t=2.940</td>
			<td>p=0,008</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 1: Tüm örneğin sosyo-demografik, klinik ve psikososyal değişkenleri. BPRS (Kısa Psikiyatrik Derecelendirme Ölçeği); CECA-Q (Çocukluk Çağı Bakım ve İstismar Deneyimi Anketi); CIP (Esrar Kaynaklı Psikoz); GAF (İşleyiş Küresel Değerlendirmesi); HAM-A (Hamilton Anksiyete Derecelendirme Ölçeği); MADRS (Montgomery-Asberg Depresyon Derecelendirme Ölçeği); HAM-D (Hamilton Depresyon Derecelendirme Ölçeği); MANSA (Manchester Yaşam Kalitesinin Kısa Değerlendirmesi); NS-A (Komşuluk memnuniyeti); NS-B (Güvenlik duyguları); NS-C (Komşuluk insidansları); NS-D (Kolektif etkinlik); NS-E (Esrar kabulü); SD (Standart Sapma); SES (Sosyo Ekonomik Durum); QL-İndeksi (Yaşam Kalitesi-İndeksi); ); TCI (Mizaç ve Karakter Envanteri); TCI Ns (Yenilik Arayışı); TCI Ha (Zarardan Kaçınma); TCI Rd (Ödül Bağımlılığı); TCI P (Kalıcılık); TCI Sd (Kendini Yönlendirme); TCI Co (Kooperatifçilik); TCI St (Kendini Aşma); YMRS (Genç Mania Derecelendirme Ölçeği). * NS-A, 16'sının ikamet alanından aşırı memnuniyeti temsil ettiği 0 ile 16 arasında değişmektedir; NS-B, 8'in güçlü bir güvenlik hissini temsil ettiği 0 ile 8 arasında değişir; NS-C, 0 ile 32 arasında değişir, burada 32 yüksek düzeyde insiyvilities gösterir; NS-D, 8'in komşular arasında yüksek düzeyde kolektif etkinliği temsil ettiği 0 ile 12 arasında değişir; NS-E, 'güçlü bir şekilde kabul et' (4 puan) ile 'güçlü bir şekilde katılmama' (0 puanı) arasında değişmektedir. ** Daha düşük okul seviyeleri daha düşük puanlarla, daha yüksek okul seviyeleri ise daha yüksek puanlarla ilişkilidir (yani. 7.sınıftan küçük = 3; Yüksek lisans derecesi= 21). Benzer şekilde, daha düşük bilişsel etkileşime sahip meslekler daha düşük puanlarla ilişkilendirilirken, daha fazla bilişsel kaynak gerektiren meslekler daha yüksek puanlarla ilişkilidir (Çiftlik işçisi= 5; Doktor= 45).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td rowspan="2">Girus</td>
			<td rowspan="2">BA</td>
			<td rowspan="2">Yanallık</td>
			<td colspan="3">MNI koordinatları</td>
			<td rowspan="2">Küme boyutu</td>
			<td rowspan="2">z-değerleri</td>
			<td rowspan="2">Cohen'in d efekt boyutu</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="3">x y z</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="8">CIP hastaları psikotik olmayan esrar kullanıcıları <</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td>Üstün Ön</td>
			<td>10</td>
			<td>Sağ</td>
			<td>13</td>
			<td>65</td>
			<td>22</td>
			<td>38</td>
			<td>3.4</td>
			<td>-1,26</td>
		</tr>
<tr>
<td>Precentral</td>
			<td>4</td>
			<td>Sağ</td>
			<td>59</td>
			<td>-5</td>
			<td>26</td>
			<td>61</td>
			<td>3.8</td>
			<td>-0,83</td>
		</tr>
<tr>
<td>Üstün Zamansal</td>
			<td>22</td>
			<td>Sağ</td>
			<td>62</td>
			<td>-7</td>
			<td>3</td>
			<td>146</td>
			<td>4.2</td>
			<td>-0,60</td>
		</tr>
<tr>
<td>Insula</td>
			<td>13</td>
			<td>Sağ</td>
			<td>36</td>
			<td>-21</td>
			<td>13</td>
			<td>142</td>
			<td>4.1</td>
			<td>-0,43</td>
		</tr>
<tr>
<td>Insula</td>
			<td>13</td>
			<td>Sol</td>
			<td>-33</td>
			<td>-23</td>
			<td>14</td>
			<td>32</td>
			<td>3.8</td>
			<td>-0,46</td>
		</tr>
<tr>
<td>Precuneus</td>
			<td>7</td>
			<td>Sağ</td>
			<td>6</td>
			<td>-66</td>
			<td>50</td>
			<td>41</td>
			<td>3.7</td>
			<td>-0,51</td>
		</tr>
<tr>
<td>Medial Oksipital</td>
			<td>19</td>
			<td>Sağ</td>
			<td>33</td>
			<td>-86</td>
			<td>21</td>
			<td>80</td>
			<td>4</td>
			<td>-0,84</td>
		</tr>
<tr>
<td>Fusiform</td>
			<td>37</td>
			<td>Sol</td>
			<td>-25</td>
			<td>-47</td>
			<td>-8</td>
			<td>32</td>
			<td>3.7</td>
			<td>-0,29</td>
		</tr>
<tr>
<td>Hipokampus</td>
			<td>-</td>
			<td>Sol</td>
			<td>-33</td>
			<td>-22</td>
			<td>-5</td>
			<td>36</td>
			<td>3.8</td>
			<td>-0,68</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="8">Psikotik olmayan esrar kullanıcıları < CIP hastaları</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="8">Suprathreshold kümesi yok</td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 2: VBM sonuçları. CIP hastaları ve psikotik olmayan esrar kullanıcıları arasında önemli ölçüde azaltılmış gri madde hacimleri gösteren beyin bölgeleri (P< 0.001 düzeltilmemiş). BA (Brodmann bölgesi); CIP (Esrar Kaynaklı Psikoz); MNI (Montreal Nöroloji Enstitüsü)

Watch this Scientific Journal Video about Brain Morphology of Cannabis Users With or Without Psychosis: A Pilot MRI Study at JoVE.com

Brain Morphology of Cannabis Users With or Without Psychosis: A Pilot MRI Study

Bu, esrar kaynaklı psikoz hastaları ile psikotik olmayan kronik esrar kullanıcıları arasındaki gri madde hacmi farklılıklarını araştırmayı amaçlayan bir 3T manyetik rezonans görüntüleme çalışmasıdır.

Psikozlu veya Psikozsuz Esrar Kullanıcılarının Beyin Morfolojisi: Pilot MRI Çalışması

Cannabis is the illicit drug most commonly used worldwide, and its consumption can both induce psychiatric symptoms in otherwise healthy subjects and ...

brain-morphology-cannabis-users-with-or-without-psychosis-pilot-mri

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Neuroscience

Unit 1

Drug Abuse and Addiction

SCIENTISTS IN ACTION

6.3K Görüntüleme.  University of Milan. Bu, esrar kaynaklı psikoz hastaları ile psikotik olmayan kronik esrar kullanıcıları arasındaki gri madde hacmi farklılıklarını araştırmayı amaçlayan bir 3T manyetik rezonans görüntüleme çalışmasıdır.

Video: Brain Morphology of Cannabis Users With or Without Psychosis: A Pilot MRI Study

Targeting of Deep Brain Structures with Microinjections for Delivery of Drugs, Viral Vectors, or Cell Transplants

Microinjections into the brain parenchyma are important procedures to deliver drugs, viral vectors or cell transplants.  The brain lesion that an injecting needle produces during its trajectory is a major concern especially in the mouse brain for not only the brain is small but also sometimes multiple injections are needed.  We show here a method to produce glass capillary needles with a 50-&mu;m lumen which significantly reduces the brain damage and allows a precise targeting into the rodent brain. This method allows a delivery of small volumes (from 20 to 100 nl), reduces bleeding risks, and minimizes passive diffusion of drugs into the brain parenchyma. By using different size of capillary glass tubes, or changing the needle lumen, several types of substances and cells can be injected. Microinjections with a glass capillary tube represent a significant improvement in injection techniques and deep brain targeting with minimal collateral damage in small rodents.

In this article, we show a method to make glass capillary needles with a 50-&mu;m lumen. This technique significantly reduces the brain damage, minimizes passive diffusion of drugs and allows a precise targeting into the rodent brain.

İlaçlar, Viral Vektörler, veya Hücre Transplantasyon teslimi için Microinjections Derin Beyin Yapıları Hedefleme

Microinjections into the brain parenchyma are important procedures to deliver drugs, viral vectors or cell transplants.  The brain lesion that an ...

Nörobilim

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains technically challenging. One approach, Activation-Induced Manganese-enhanced MRI (AIM MRI), has been used successfully to map neuronal activity in rodents 1-5. In AIM MRI, Mn2+ acts a calcium analog and accumulates in depolarized neurons 6,7. Because Mn2+ shortens the T1 tissue property, regions of elevated neuronal activity will enhance in MRI. Furthermore, Mn2+ clears slowly from the activated regions; therefore, stimulation can be performed outside the magnet prior to imaging, enabling greater experimental flexibility. However, because Mn2+ does not readily cross the blood-brain barrier (BBB), the need to open the BBB has limited the use of AIM MRI, especially in mice.
One tool for opening the BBB is ultrasound. Though potentially damaging, if ultrasound is administered in combination with gas-filled microbubbles (i.e., ultrasound contrast agents), the acoustic pressure required for BBB opening is considerably lower. This combination of ultrasound and microbubbles can be used to reliably open the BBB without causing tissue damage 8-11.
Here, a method is presented for performing AIM MRI by using microbubbles and ultrasound to open the BBB. After an intravenous injection of perflutren microbubbles, an unfocused pulsed ultrasound beam is applied to the shaved mouse head for 3 minutes. For simplicity, we refer to this technique of BBB Opening with Microbubbles and UltraSound as BOMUS 12. Using BOMUS to open the BBB throughout both cerebral hemispheres, manganese is administered to the whole mouse brain. After experimental stimulation of the lightly sedated mice, AIM MRI is used to map the neuronal response.
To demonstrate this approach, herein BOMUS and AIM MRI are used to map unilateral mechanical stimulation of the vibrissae in lightly sedated mice 13. Because BOMUS can open the BBB throughout both hemispheres, the unstimulated side of the brain is used to control for nonspecific background stimulation. The resultant 3D activation map agrees well with published representations of the vibrissae regions of the barrel field cortex 14. The ultrasonic opening of the BBB is fast, noninvasive, and reversible; and thus this approach is suitable for high-throughput and/or longitudinal studies in awake mice.

A technique is described for broadly opening the blood-brain barrier in the mouse using microbubbles and ultrasound. Using this technique, manganese can be administered to the mouse brain. Because manganese is an MRI contrast agent that accumulates in depolarized neurons, this approach enables imaging of neuronal activity.

Ultrasonik Kan-beyin bariyeri bozulması ve Manganez kontrastlı MRG kullanma İşlevsel beyin görüntüleme

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Developmental events in the brain including neuronal morphogenesis and migration are highly orchestrated processes. In vitro and in vivo analyses allow for an in-depth characterization to identify pathways involved in these events. Cerebellar granule neurons (CGNs) that are derived from the developing cerebellum are an ideal model system that allows for morphological analyses. Here, we describe a method of how to genetically manipulate CGNs and how to study axono- and dendritogenesis of individual neurons. With this method the effects of RNA interference, overexpression or small molecules can be compared to control neurons. In addition, the rodent cerebellar cortex is an easily accessible in vivo system owing to its predominant postnatal development. We also present an in vivo electroporation technique to genetically manipulate the developing cerebella and describe subsequent cerebellar analyses to assess neuronal morphology and migration.

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Neuronal morphogenesis and migration are crucial events underlying proper brain development. Here, we describe methods to genetically manipulate cultured cerebellar granule neurons and the developing cerebellum for the assessment of morphology and migratory characteristics of neurons.

Serebellar Granül Nöronlar Genetik Manipülasyon<em&gt; In Vitro</em&gt; Ve<em&gt; In Vivo</em&gt; Nöronal morfoloji ve Göç Eğitim için

Developmental events in the brain including neuronal morphogenesis and migration are highly orchestrated processes. In vitro and in vivo analyses allow ...

The Olfactory System as a Model to Study Axonal Growth Patterns and Morphology In Vivo

The olfactory system has the unusual capacity to generate new neurons throughout the lifetime of an organism. Olfactory stem cells in the basal portion of the olfactory epithelium continuously give rise to new sensory neurons that extend their axons into the olfactory bulb, where they face the challenge to integrate into existing circuitry. Because of this particular feature, the olfactory system represents a unique opportunity to monitor axonal wiring and guidance, and to investigate synapse formation. Here we describe a procedure for in vivo labeling of sensory neurons and subsequent visualization of axons in the olfactory system of larvae of the amphibian Xenopus laevis. To stain sensory neurons in the olfactory organ we adopt the electroporation technique. In vivo electroporation is an established technique for delivering fluorophore-coupled dextrans or other macromolecules into living cells. Stained sensory neurons and their axonal processes can then be monitored in the living animal either using confocal laser-scanning or multiphoton microscopy. By reducing the number of labeled cells to few or single cells per animal, single axons can be tracked into the olfactory bulb and their morphological changes can be monitored over weeks by conducting series of in vivo time lapse imaging experiments. While the described protocol exemplifies the labeling and monitoring of olfactory sensory neurons, it can also be adopted to other cell types within the olfactory and other systems.

The Olfactory System as a Model to Study Axonal Growth Patterns and Morphology In Vivo

We describe a protocol for in vivo labeling of olfactory sensory neurons by electroporation and subsequent confocal laser-scanning or multiphoton microscopy to visualize neuronal morphology and its development over time.

Bir Model Olarak Koku Sistemi Akson Büyüme Modelleri ve Morfoloji Eğitim için<em&gt; In Vivo</em

The olfactory system has the unusual capacity to generate new neurons throughout the lifetime of an organism. Olfactory stem cells in the basal portion of ...

Stripe Assay to Study the Attractive or Repulsive Activity of a Protein Substrate Using Dissociated Hippocampal Neurons

Growing axons develop a highly motile structure at their tip, termed the growth cone. The growth cone contacts extracellular environmental cues to navigate axonal growth. Netrin, slit, semaphorin, and ephrins are known guidance molecules that can attract or repel axons upon binding to receptors and co-receptors on the axon. The activated receptors initiate various signaling molecules in the growth cone that alter the structure and movement of the neuron. Here, we describe the detailed protocol for a stripe assay to assess the ability of a guidance molecule to attract or repel neurons. In this method, dissociated hippocampal neurons from E15.5 mice are cultured on laminin-coated dishes processed with alternating stripes of ectodomain of fibronectin and leucine-rich transmembrane protein-2 (FLRT2) and control immunoglobulin G (IgG) fragment crystallizable region (Fc) protein. Both axons and cell bodies were strongly repelled from the FLRT2-coated stripe regions after 24 h of culture. Immunostaining with tau1 showed that ~90% of the neurons were distributed on the Fc-coated stripes compared to the FLRT2-Fc-coated stripes (~10%). This result indicates that FLRT2 has a strong repulsive effect on these neurons. This powerful method is applicable not only for primary cultured neurons but also for a variety of other cells, such as neuroblasts.

Axon guidance molecules regulate neuronal migration and targeted growth-cone navigation. We present a powerful method, the stripe assay, to assess the ability of guidance molecules to attract or repulse neurons. In this protocol, we demonstrate the stripe assay by showing FLRT2's ability to repel cultured hippocampal neurons.

Çizgili Deneyi Disosiye Hipokampal Nöronlar kullanarak Protein Substrat çekici veya itici Aktivite Eğitim için

Growing axons develop a highly motile structure at their tip, termed the growth cone. The growth cone contacts extracellular environmental cues to ...

Utilizing 3D Printing Technology to Merge MRI with Histology: A Protocol for Brain Sectioning

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume three-dimensionally. While MRI is an extremely sensitive tool for detecting tissue abnormalities, association of signal changes with an underlying pathological process is usually not straightforward. In the central nervous system, for example, inflammation, demyelination, axonal damage, gliosis, and neuronal death may all induce similar findings on MRI. As such, interpretation of MRI scans depends on the context, and radiological-histopathological correlation is therefore of the utmost importance. Unfortunately, traditional pathological sectioning of brain tissue is often imprecise and inconsistent, thus complicating the comparison between histology sections and MRI. This article presents novel methodology for accurately sectioning primate brain tissues and thus allowing precise matching between histology and MRI. The detailed protocol described in this article will assist investigators in applying this method, which relies on the creation of 3D printed brain slicers. Slightly modified, it can be easily implemented for brains of other species, including humans.

The overall goal of this protocol is to accurately align magnetic resonance imaging (MRI) image volumes with histology sections via the creation of customized 3D-printed brain holders and slicer boxes.

3D Baskı Teknolojisini kullanan Histoloji ile MRG Birleştirme: Beyin için Protokol Kesit

Magnetic resonance imaging (MRI) allows for the delineation between normal and abnormal tissue on a macroscopic scale, sampling an entire tissue volume ...

Application of Automated Image-guided Patch Clamp for the Study of Neurons in Brain Slices

Whole-cell patch clamp is the gold-standard method to measure the electrical properties of single cells. However, the in vitro patch clamp remains a challenging and low-throughput technique due to its complexity and high reliance on user operation and control. This manuscript demonstrates an image-guided automatic patch clamp system for in vitro whole-cell patch clamp experiments in acute brain slices. Our system implements a computer vision-based algorithm to detect fluorescently labeled cells and to target them for fully automatic patching using a micromanipulator and internal pipette pressure control. The entire process is highly automated, with minimal requirements for human intervention. Real-time experimental information, including electrical resistance and internal pipette pressure, are documented electronically for future analysis and for optimization to different cell types. Although our system is described in the context of acute brain slice recordings, it can also be applied to the automated image-guided patch clamp of dissociated neurons, organotypic slice cultures, and other non-neuronal cell types.

This protocol describes how to conduct automatic image-guided patch-clamp experiments using a system recently developed for standard in vitro electrophysiology equipment.

Beyin dilimlerinde nöronların çalışması için otomatik görüntü yönlendirmeli Yama Kelepçesi Uygulaması

Whole-cell patch clamp is the gold-standard method to measure the electrical properties of single cells. However, the in vitro patch clamp remains a ...

A Human Blood-Brain Interface Model to Study Barrier Crossings by Pathogens or Medicines and Their Interactions with the Brain

The early screening of nervous system medicines on a pertinent and reliable in cellulo BBB model for their penetration and their interaction with the barrier and the brain parenchyma is still an unmet need. To fill this gap, we designed a 2D in cellulo model, the BBB-Minibrain, by combining a polyester porous membrane culture insert human BBB model with a Minibrain formed by a tri-culture of human brain cells (neurons, astrocytes and microglial cells). The BBB-Minibrain allowed us to test the transport of a neuroprotective drug candidate (e.g., Neurovita), through the BBB, to determine the specific targeting of this molecule to neurons and to show that the neuroprotective property of the drug was preserved after the drug had crossed the BBB. We have also demonstrated that BBB-Minibrain constitutes an interesting model to detect the passage of virus particles across the endothelial cells barrier and to monitor the infection of the Minibrain by neuroinvasive virus particles. The BBB-Minibrain is a reliable system, easy to handle for researcher trained in cell culture technology and predictive of the brain cells phenotypes after treatment or insult. The interest of such in cellulo testing would be twofold: introducing derisking steps early in the drug development on the one hand and reducing the use of animal testing on the other hand.

Here we present a protocol describing the setting of an in cellulo BBB (Blood brain barrier)-Minibrain polyester porous membrane culture insert system in order to evaluate the transport of biomolecules or infectious agents across a human BBB and their physiological impact on the neighboring brain cells.

Bariyer geçişleri patojenler veya ilaçlar ve onların etkileşim beyin ile çalışmak için bir insan kan-beyin arabirim modeli

The early screening of nervous system medicines on a pertinent and reliable in cellulo BBB model for their penetration and their interaction with the ...

Functional MRI in Conjunction with a Novel MRI-compatible Hand-induced Robotic Device to Evaluate Rehabilitation of Individuals Recovering from Hand Grip Deficits

Functional magnetic resonance imaging (fMRI) is a non-invasive magnetic resonance imaging technique that images brain activation in vivo, using endogenous deoxyhemoglobin as an endogenous contrast agent to detect changes in blood-level-dependent oxygenation (BOLD effect). We combined fMRI with a novel robotic device (MR-compatible hand-induced robotic device [MR_CHIROD]) so that a person in the scanner can execute a controlled motor task, hand-squeezing, which is a very important hand movement to study in neurological motor disease. We employed parallel imaging (generalized auto-calibrating partially parallel acquisitions [GRAPPA]), which allowed higher spatial resolution resulting in increased sensitivity to BOLD. The combination of fMRI with the hand-induced robotic device allowed precise control and monitoring of the task that was executed while a participant was in the scanner; this may prove to be of utility in rehabilitation of hand motor function in patients recovering from neurological deficits (e.g., stroke). Here we outline the protocol for using the current prototype of the MR_CHIROD during an fMRI scan.

We performed functional MRI using a novel MRI-compatible hand-induced robotic device to evaluate its utility for monitoring hand motor function in individuals recovering from neurological deficits.

El Kavrama Açıklarından Kurtulan Bireylerin Rehabilitasyonunun Değerlendirilmesinde Yeni MRI Uyumlu El Kaynaklı Robotik Cihazla Birlikte Fonksiyonel MRG

Functional magnetic resonance imaging (fMRI) is a non-invasive magnetic resonance imaging technique that images brain activation in vivo, using endogenous ...

Combining Multiplex Fluorescence In Situ Hybridization with Fluorescent Immunohistochemistry on Fresh Frozen or Fixed Mouse Brain Sections

Fluorescent in situ hybridization (FISH) is a molecular technique that identifies the presence and spatial distribution of specific RNA transcripts within cells. Neurochemical phenotyping of functionally identified neurons usually requires concurrent labelling with multiple antibodies (targeting protein) using immunohistochemistry (IHC) and optimization of in situ hybridization (targeting RNA), in tandem. A &#34;neurochemical signature&#34; to characterize particular neurons may be achieved however complicating factors include the need to verify FISH and IHC targets before combining the methods, and the limited number of RNAs and proteins that may be targeted simultaneously within the same tissue section.
Here we describe a protocol, using both fresh frozen and fixed mouse brain preparations, which detects multiple mRNAs and proteins in the same brain section using RNAscope FISH followed by fluorescence immunostaining, respectively. We use the combined method to describe the expression pattern of low abundance mRNAs (e.g., galanin receptor 1) and high abundance mRNAs (e.g., glycine transporter 2), in immunohistochemically identified brainstem nuclei.
Key considerations for protein labelling downstream of the FISH assay extend beyond tissue preparation and optimization of FISH probe labelling. For example, we found that antibody binding and labelling specificity can be detrimentally affected by the protease step within the FISH probe assay. Proteases catalyze hydrolytic cleavage of peptide bonds, facilitating FISH probe entry into cells, however they may also digest the protein targeted by the subsequent IHC assay, producing off target binding. The subcellular location of the targeted protein is another factor contributing to IHC success following FISH probe assay. We observed IHC specificity to be retained when the targeted protein is membrane bound, whereas IHC targeting cytoplasmic protein required extensive troubleshooting. Finally, we found handling of slide-mounted fixed frozen tissue more challenging than fresh frozen tissue, however IHC quality was overall better with fixed frozen tissue, when combined with RNAscope.

Combining Multiplex Fluorescence In Situ Hybridization with Fluorescent Immunohistochemistry on Fresh Frozen or Fixed Mouse Brain Sections

This protocol describes a method for combining fluorescence in situ hybridization (FISH) and fluorescence immunohistochemistry (IHC) in both fresh frozen and fixed mouse brain sections, with the goal of achieving multilabel FISH and fluorescence IHC signal. IHC targeted cytoplasmic and membrane attached proteins.

Multipleks Floresan In Situ Hibridizasyonun Floresan İmmünohistokimya ile Taze Dondurulmuş veya Sabit Fare Beyin Kesitlerinde Birleştirilmesi

Fluorescent in situ hybridization (FISH) is a molecular technique that identifies the presence and spatial distribution of specific RNA transcripts within ...