Dr.Darren Freed bu ESLP cihazını yarattı ve ESLP araştırması alanında başka hiçbir yerde görülemeyen patentli negatif basınçlı ventilasyon teknolojisi ve yazılımı kullanıyor. Laboratuvarımız daha önce negatif basınçlı ventilasyonun ESLP sırasında pozitif basınçlı ventilasyona kıyasla daha az akciğer hasarına neden olduğunu göstermiştir. Bu muhtemelen negatif basınçlı ventilasyonun daha fizyolojik mekanizmasından kaynaklanmaktadır.
Bu cihaz ve protokol, donör akciğerlerin güvenli koruma süresini uzatmak ve marjinal akciğerleri kabul edilebilir nakil standartlarına göre yenilemek için tasarlanmıştır. Cihazın kendisinin kullanımı çok basittir. En büyük zorluk, yavru domuz akciğerlerinin herhangi bir yaralanmaya neden olmadan cerrahi olarak çıkarılmasıdır.
Yetişkin insan akciğerlerine kıyasla son derece kırılgandırlar. Maksimum alveolar işe alım için pik basınçları artırarak kilogram başına 10 mililitrelik ekspiratuar gelgit hacmini koruyarak başlayın. Orta hat sternotomi yapın.
Cildi ve deri altı dokusunu kesmek için elektrokoter kullanın. Yumuşak doku eklerini inferior sternumun arka tablosundan açıkça diseke edin. Sternumu bölmek için sternal testere kullanın.
Sternal bir retraktör yerleştirin ve geniş açın. Kardiektomiyi gerçekleştirdikten sonra, akciğerleri açığa çıkarmak için mediastinal plevrayı iki taraflı olarak açın ve çıkarın. Daha sonra plevral ataşmanları diyaframdan sol alt akciğer lobuna doğru bölün, diyaframı yukarı doğru tutmak için bir Deaver retraktörü kullanın.
Şimdi, inferior pulmoner ligamenti sola bölün ve hiluma doğru devam edin. Daha sonra, inferior vena kava ve plevral ataşmanları diyaframdan ayırın ve ardından Deaver retraktörünü kullanarak diyaframı yukarı doğru geri çekin. İnferior pulmoner ligamenti sağ tarafa bölün ve hiluma doğru devam edin.
Daha sonra trakeayı ortaya çıkarmak için innominat ven ve kemer damarlarını bölün. Trakeayı çevreleyen dokuyu açıkça diseke ettikten sonra, maksimum inhalasyonda bir tüp kelepçesi kullanarak trakeayı kelepçeleyin ve ekspiratuar gelgit hacminin kilogram başına 10 mililitre olmasını sağlayın. Trakeayı transekte edin ve cerrahi çekiş sağlamak için kelepçe kısmını yukarı doğru kaldırın.
Daha sonra ağır Metzenbaum makası ve serbest bir el ile künt diseksiyon kullanarak arka trakeayı yemek borusundan diseke edin. Kalan plevral ekleri bölün. Sol bronşun üstündeki ve altındaki aortu transekte edin ve akciğerleri inen aortun bir segmenti ile göğüsten çıkarın.
Akciğerleri kelepçe ile tarttıktan sonra, hızlı bir şekilde buzla dolu bir soğutucuda saklayın. Son 1.5 litre perfüzyon hacmine ulaşmak için perfüzyon devresine 500 mililitre paketlenmiş kırmızı kan hücresi ekleyerek başlayın. Veri kayıtları için akciğerlerin fotoğraflarını çekin.
Akciğer biyopsisi için, bir santimetreküplük bir kısmı sıfır ipek sütür ile çevreleyin ve bağlayın. Ardından, metin el yazmasında açıklandığı gibi doku analizi için makas kullanarak bu bağlı kısmı çıkarın ve biyopsi segmentini bölün. Daha sonra, 3/8 yarım inçlik boru adaptörünü ana pulmoner artere sabitlemek için, forseps veya çıtçıtlar kullanarak ana pulmoner arterin zıt taraflarını kavrayın.
Ardından, adaptörü yarım inçlik kısmı ile ana pulmoner artere yerleştirin ve aynı anda sıfır ipek veya Ethibond bağları kullanarak adaptörü yerinde sabitlerken yerinde tutun. Şimdi akciğerleri silikon destek zarı üzerinde sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve ESLP cihazına bağlayın. Trakeaya trakeal bronşun bulunduğu yere yakın ikinci bir tüp kelepçesi yerleştirin.
Daha distal kelepçeyi çıkardıktan sonra, trakeayı endotrakeal tüp ile entübe edin ve iki fermuar bağı kullanarak yerine sabitleyin. Daha sonra, proksimal kelepçeyi trakeadan serbest bırakmadan önce havalandırma hattını bir boru kelepçesi kullanarak kelepçeleyin. Pulmoner arter adaptörünü pulmoner arter hattına bağlayın.
Ana pulmoner arter havalandırıldıktan sonra, perfüzyon zamanını başlatın. Ayarlar sayfasında, ısıtıcıyı başlat'a tıklayın ve sıcaklığı 38 santigrat dereceye ayarlayın. Kardiyak çıkış akışını hesaplamak için domuzun ağırlığını girin.
Ana sayfada, sürekli pozitif hava yolu basıncını 20 santimetre suya ayarlayın ve sürekli pozitif hava yolu basıncını başlat'a tıklayın. Havalandırma başladığında, havalandırma hattını açın. Arteriyel basınç sensörünü sıfırladıktan sonra, pulmoner arter hattını basınç sensörünün üzerindeki boru kelepçesi ile sıkıştırın.
Sensörü açın, ayarlar sayfasında sıfır pulmoner arter basıncı ve sıfır kan akışına tıklayın ve ana sayfada okumaların sıfırlandığını onaylayın. Hat basıncını okumak için basınç sensörü stopcock'unu kapatın. Pulmoner arter kanülüne giden hattı açın.
Ana sayfada% 10 kalp debisini seçin. PA Kılavuzuna dön'e tıklayın ve pulmoner hattın kelepçesini açın. ESLP sırasında yoğuşma oluşumunu önlemek için makineye sabitlemeden önce üst kapaktaki perfüzyon çözeltisini değiştirin.
Santrifüj analizi için 10 mililitre perfüzyon çizin ve sıfır arteriyel kan gazı çekin. Santrifüjlemeden önce numuneyi buz üzerine yerleştirin. Akciğerler 10 dakika boyunca perfüze edildikten sonra, akışı kalp debisinin% 20'sine yükseltin.
Perfüzyon sıcaklığı 32 santigrat dereceye ulaştığında, hava geçirmez bir sızdırmazlık oluşturmak için oda kapağını kelepçelerle yerine sabitleyin. Akciğerlerin en uygun şekilde konumlandırıldığından ve hava sızıntılarının onarıldığından emin olun. Kapak sabitken, sürekli pozitif hava yolu basıncını kapatmadan önce havalandırma borusunu kelepçeleyin.
Ayarlar sayfasında, sıfır intratorasik basınç, hava yolu basıncı ve hava akışını seçin. Ardından, okumaların ana sayfada sıfırlandığını onaylayın. Havalandırma borusunun kapağını açmadan önce CPAP'yi başlat'ı tıklatın.
Metin metninde belirtilen ventilasyon parametrelerini ayarlayın ve negatif basınçlı ventilasyonu etkinleştirmek için havalandırmayı başlatmak için basına tıklayın. Yan port havalandırma borusunu odaya takın. Sonraki birkaç nefes boyunca, metin makalesinde belirtildiği gibi ventilasyon parametrelerini koruyun.
10 dakikalık perfüzyondan sonra, akışı% 20'ye yükseltin ve 20 dakikalık perfüzyondan sonra akışı% 30'a yükseltinkalp debisi. Sisteme dekstroz ve insülin ekleyin. Makale talimatlarına göre,% 50 kardiyak çıkış ve beş dakikalık bir süre boyunca oksijenden arındırılmış karışık bir süpürme gazı kullanarak akciğer fonksiyonunu değerlendirin.
Koruma modu sırasında her garip saatte, gelecekteki analizler için 10 mililitrelik bir perfüzyon örneği çizin. Her saat başı bir mililitre pre-deoksijenatör arteriyel kan gazı örneği ve beş dakikalık değerlendirme modunu takiben deoksijenatör öncesi ve sonrası portlarından çizin. Ortalama pulmoner arter basıncı, dinamik uyum ve pulmoner vasküler dirençteki 12 saatlik perfüzyon ve ventilasyon sırasındaki eğilimler, kullanılan spesifik ESLP deneysel protokolünden etkilenebilir.
Burada, negatif basınçlı ventilasyon ex-situ akciğer perfüzyonu boyunca beş ve 11 saatlik değerlendirme zaman noktalarında arteriyel oksijenin kısmi basıncı ve esinlenmiş oksijen fraksiyonu oranı için tipik bir eğilim gösterilmiştir. Ödem oluşumu, endotel geçirgenliği ile ilişkili bir başka önemli inflamasyon indeksidir ve 12 saatlik negatif basınçlı ventilasyon ex-situ akciğer perfüzyonunun sonunda% 30'luk tipik bir kilo artışı gösterir. Perfüzyonat, genel akciğer durumunun vekil bir göstergesi olarak işlev görür.
Bu nedenle, perfüzyonatın kan gazı analizi, akciğerlerin metabolik durumu hakkında kapsamlı bilgi sağlar. 12 saatlik bir çalışma sırasında üç, beş, yedi, dokuz ve 11 saatte meydana gelen ESLP'nin değerlendirme modeli sırasında, sol arteriyel kısmi oksijen basıncında yukarı doğru bir eğilim gözlenmiştir. Akciğerleri cerrahi olarak çıkarırken mümkün olduğunca nazik olmak ve ayrıca hızlı ve verimli bir şekilde hareket etmek çok önemlidir.
Bu cihazın, protokolün ve laboratuvarın kurulması, başarılı bir klinik araştırmaya ve donör akciğerlerin korunmasını ve yenilenmesini uzatan çeşitli keşiflere yol açmıştır.