JoVE Logo

Sign In

Análise da Curva de Crescimento Bacteriano e suas Aplicações Ambientais

Overview

Fonte: Laboratórios do Dr. Ian Pepper e Dr. Charles Gerba - Universidade do Arizona
Autora de Demonstração: Luisa Ikner

As bactérias estão entre as formas de vida mais abundantes na Terra. Eles são encontrados em todos os ecossistemas e são vitais para a vida cotidiana. Por exemplo, as bactérias afetam o que as pessoas comem, bebem e respiram, e na verdade há mais células bacterianas dentro do corpo de uma pessoa do que células de mamíferos. Devido à importância das bactérias, é preferível estudar determinadas espécies de bactérias em laboratório. Para isso, as bactérias são cultivadas sob condições controladas em cultura pura, o que significa que apenas um tipo de bactéria está em consideração. As bactérias crescem rapidamente na cultura pura, e o número de células aumenta drasticamente em um curto período de tempo. Medindo a taxa de aumento da população celular ao longo do tempo, uma "curva de crescimento" a ser desenvolvida. Isso é importante quando se pretende utilizar ou vacinar números conhecidos do isolado bacteriano, por exemplo, para melhorar o crescimento das plantas, aumentar a biodegradação de orgânicos tóxicos, ou produzir antibióticos ou outros produtos naturais em escala industrial.

Procedure

1. Coleção de Alíquotas de Cultura Bacteriana

  1. Um dia antes da coleta de pontos de tempo de crescimento, inocular 20 mL de caldo de soja tripática (TSB) médio em um frasco de 50 mL com E. coli.
  2. Incubar durante a noite a 27 °C. Este período de incubação relativamente longo resulta em uma população de fase estacionária de tipo selvagem E. coli de aproximadamente 1099 CFU/mL.
  3. No dia seguinte, use 100 μL da cultura preparada para inocular 250 mL de TSB (...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Results

Após um experimento de revestimento de diluição serial, os seguintes dados foram obtidos. No início do crescimento exponencial designado aqui como tempo t = 0, a concentração inicial de células bacterianas é de 1.000 UFC/mL. No momento t = 6 h, a concentração de células é de 16.000 UFC/mL.

Agora, X = 2n x X0

Onde: X0 = concentração inicial de células = 1.000 UFC/mL
X = concentração de células após o tem...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Application and Summary

O conhecimento da cinética de crescimento bacteriano e números bacterianos em um meio de cultura é importante tanto do ponto de vista da pesquisa quanto do ponto de vista comercial. Na pesquisa, muitas vezes é fundamental saber o número de bactérias em uma amostra, para que o experimento possa ser replicado, se necessário, com os mesmos números. Por exemplo, durante experimentos em que inoculantes bacterianos são adicionados a um lote de solo, um mínimo de10 4 UFC precisa ser adicionado por grama de ...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags
Valor vazioemiss o

Skip to...

0:00

Overview

1:15

Principles of Bacterial Growth Curve Analysis

3:46

Collection of Bacterial Culture Aliquots

5:09

Serial Dilution Plating to Quantify Bacteria

7:19

Counting Colonies and Calculating Mean Generation Time

9:31

Applications

11:50

Summary

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved