JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

0:00

Overview

1:06

Principles of Gas Chromatography

3:54

Instrument Initialization

5:37

Running the GC

6:32

Representative Results: Quantification of Caffeine and Palmitic Acid in Coffee

7:28

Applications

8:59

Summary

כרומטוגרפיה של גז (GC) עם גילוי יינון להבה

מקור: המעבדה של ד"ר .B ג'יל וטון - אוניברסיטת וירג'יניה

כרומטוגרפיה גז (GC) משמשת להפרדת ולזיהוי תרכובות משקל מולקולריות קטנות בשלב הגז. המדגם הוא גז או נוזל שמאודה ביציאת ההזרקה. בדרך כלל, התרכובות שנותחו הן פחות מ 1,000 Da, כי קשה לאדות תרכובות גדולות יותר. GC פופולרי עבור ניטור סביבתי ויישומים תעשייתיים כי זה מאוד אמין והוא יכול להיות מופעל כמעט ברציפות. GC משמש בדרך כלל ביישומים שבהם מולקולות קטנות ונדיפות מזוהות ועם פתרונות לא מימיים. כרומטוגרפיה נוזלית פופולרית יותר למדידות בדגימות מימיות וניתן להשתמש בה כדי לחקור מולקולות גדולות יותר, מכיוון שהמולקולות אינן צריכות להתאדות. GC הוא מועדף עבור מולקולות לא קוטביות בעוד LC נפוץ יותר להפרדת ניתוחי קוטב.

השלב הנייד לכרומטוגרפיה של גז הוא גז נושא, בדרך כלל הליום בגלל משקלו המולקולרי הנמוך והיותו אדיש מבחינה כימית. הלחץ מופעל והשלב הנייד מעביר את הניתוח דרך העמודה. ההפרדה מתבצעת באמצעות עמודה מצופה בשלב נייח. עמודים נימיים צינוריים פתוחים הם העמודים הפופולריים ביותר ויש להם את השלב הנייח מצופה על הקירות של נימי. שלבים נייחים הם לעתים קרובות נגזרות של polydimethylsiloxane, עם 5-10% של הקבוצות פונקציונלי כדי לכוון את ההפרדה. קבוצות פונקציונליות אופייניות הן פניל, ציאנופרופיל, או קבוצות טריפלואורופרופיל. עמודות נימיות הן בדרך כלל 5-50 מ '. לעמודות צרות יותר יש רזולוציה גבוהה יותר אך דורשות לחצים גבוהים יותר. ניתן להשתמש בעמודות ארוזות גם כאשר השלב הנייח מצופה על חרוזים ארוזים בעמודה. העמודות הארוזות קצרות יותר, 1-5 מ'. נימים צינוריים פתוחים מועדפים בדרך כלל מכיוון שהם מאפשרים יעילות גבוהה יותר, ניתוחים מהירים יותר, ויש להם יכולות גבוהות יותר.

זיהוי יינון להבה (FID) הוא גלאי כללי טוב עבור תרכובות אורגניות ב- GC המזהה את כמות הפחמן במדגם. לאחר הטור, דגימות נשרפות בלהבת אוויר מימן חמה. יונים פחמנית מיוצרים על ידי הבעירה. בעוד היעילות הכוללת של התהליך נמוכה (רק 1 מתוך10 5 יונים פחמן לייצר יון בלהבה) הכמות הכוללת של יונים היא פרופורציונלית ישירות לכמות הפחמן במדגם. אלקטרודות משמשות למדידת הזרם מהיונים. FID הוא גלאי הרסני, כמו המדגם כולו הוא pyrolyzed. FID אינו מושפע גזים ומים לא דליקים.

1. אתחול ה- GC

  1. הפעל את גז ואוויר נושאת הליום ולהתאים את מדי הלחץ על המכשיר.
  2. הפעל את תנור העמודים לטמפרטורה גבוהה (בדרך כלל 250 °C (250 °C) ומעלה) כדי לאפות בעמודה. אל תחרוג מהטמפרטורה המרבית של העמודה. זה יסיר את כל המזהמים. תן לו לאפות לפחות 30 דקות לפני הפעלת מדגם.

2. יצירת ...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

GC משמש עבור מגוון רחב של יישומים תעשייתיים. לדוגמה, הוא משמש כדי לבדוק את הטוהר של מוצר כימי מסונתז. GC פופולרי גם ביישומים סביבתיים. GC משמש לזיהוי חומרי הדברה, פחמימנים פוליארומטיים ופתלטים. רוב היישומים באיכות האוויר משתמשים ב- GC-FID לניטור מזהמים סביבתיים. GC משמש גם לניתוח מרחב הראש, שבו הנד...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

-- Views

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved