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Principles of Calibration Curves

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Preparing the Standard Solutions

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Preparing the Calibration Curve

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Summary

Curvas de calibração

Fonte: Laboratório da Dra.B. Jill Venton - Universidade da Virgínia

As curvas de calibração são usadas para entender a resposta instrumental a um analito e prever a concentração em uma amostra desconhecida. Geralmente, um conjunto de amostras padrão são feitas em várias concentrações com uma faixa que inclui o desconhecido de interesse e a resposta instrumental em cada concentração é registrada. Para obter mais precisão e entender o erro, a resposta em cada concentração pode ser repetida para que uma barra de erro seja obtida. Os dados são então adequados com uma função para que concentrações desconhecidas possam ser previstas. Normalmente a resposta é linear, no entanto, uma curva pode ser feita com outras funções, desde que a função seja conhecida. A curva de calibração pode ser usada para calcular o limite de detecção e limite de quantitação.

Ao fazer soluções para uma curva de calibração, cada solução pode ser feita separadamente. No entanto, isso pode levar muito material inicial e ser demorado. Outro método para fazer muitas concentrações diferentes de uma solução é usar diluições seriais. Com diluições seriais, uma amostra concentrada é diluída de forma stepwise para fazer concentrações mais baixas. A próxima amostra é feita a partir da diluição anterior, e o fator de diluição é muitas vezes mantido constante. A vantagem é que apenas uma solução inicial é necessária. A desvantagem é que quaisquer erros na criação de soluções — pipetação, massing, etc.— são propagados à medida que mais soluções são feitas. Assim, deve-se tomar cuidado ao fazer a solução inicial.

1. Fazendo os Padrões: Diluições seriais

  1. Faça uma solução concentrada de estoque do padrão. Normalmente, o composto é pesado com precisão e, em seguida, transferido quantitativamente para um frasco volumoso. Adicione algum solvente, misture para que a amostra se dissolva e, em seguida, encha a linha com o solvente adequado.
  2. Realizar diluições seriais. Pegue outro frasco volumoso e pipeta a quantidade de padrão necessária para a diluição, em seguida, encha a linha com solvente e misture....

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As curvas de calibração são usadas em muitos campos de química analítica, bioquímica e química farmacêutica. É comum usá-los com medições de espectroscopia, cromatografia e eletroquímica. Uma curva de calibração pode ser usada para entender a concentração de um poluente ambiental em uma amostra de solo. Pode ser usado para determinar a concentração de um neurotransmissor em uma amostra de fluido cerebral, vitamina em amostras farmacêuticas ou cafeína em alimentos. Assim, as curvas de calibração sã...

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Calibration Curves

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