Spettroscopia ultravioletta/visibile (UV-VIs)

Fonte: Laboratorio del Dr.B. Jill Venton - Università della Virginia

La spettroscopia ultravioletto-visibile (UV-Vis) è una delle tecniche analitiche più popolari perché è molto versatile e in grado di rilevare quasi tutte le molecole. Con la spettroscopia UV-Vis, la luce UV-Vis viene fatta passare attraverso un campione e viene misurata la trasmittanza della luce da parte di un campione. Dalla trasmittanza (T), l'assorbanza può essere calcolata come A=-log (T). Si ottiene uno spettro di assorbanza che mostra l'assorbanza di un composto a diverse lunghezze d'onda. La quantità di assorbanza a qualsiasi lunghezza d'onda è dovuta alla struttura chimica della molecola.

UV-Vis può essere utilizzato in modo qualitativo, per identificare gruppi funzionali o confermare l'identità di un composto abbinando lo spettro di assorbanza. Può anche essere usato in modo quantitativo, poiché la concentrazione dell'analita è correlata all'assorbanza usando la legge di Beer. La spettroscopia UV-Vis viene utilizzata per quantificare la quantità di DNA o proteine in un campione, per l'analisi dell'acqua e come rivelatore per molti tipi di cromatografia. La cinetica delle reazioni chimiche viene misurata anche con la spettroscopia UV-Vis prendendo ripetute misurazioni UV-Vis nel tempo. Le misurazioni UV-Vis sono generalmente prese con uno spettrofotometro. UV-Vis è anche un rivelatore molto popolare per altre tecniche analitiche, come la cromatografia, perché può rilevare molti composti.

Tipicamente, UV-Vis non è la tecnica di spettroscopia più sensibile, perché non molta luce viene assorbita su una breve lunghezza del percorso. Altre tecniche di spettroscopia come la fluorescenza hanno una sensibilità più elevata, ma non sono così generalmente applicabili, poiché la maggior parte delle molecole non sono fluorescenti. UV-Vis ha una sensibilità simile ad altre misurazioni di assorbanza, come la spettroscopia infrarossa.