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Overview

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Principles of UV-Vis Spectroscopy

3:46

Absorbance Measurements with UV-Vis Spectroscopy

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Kinetics Experiments with UV-Vis Spectroscopy

6:47

Applications

8:57

Summary

자외선 눈에 보이는 (UV-Vis) 분광법

출처: 박사의 실험실.B 질 벤턴 - 버지니아 대학

자외선가 시동(UV-Vis) 분광법은 매우 다재다능하고 거의 모든 분자를 검출할 수 있기 때문에 가장 인기 있는 분석 기술 중 하나입니다. UV-Vis 분광법을 사용하면 UV-Vis 광이 샘플을 통과하고 샘플에 의한 빛의 투과를 측정합니다. 송신(T)에서 흡광도는 A=로그(T)로 계산할 수 있다. 흡광도 스펙트럼은 상이한 파장에서 화합물의 흡광도를 나타낸다. 모든 파장에서의 흡광도의 양은 분자의 화학 적 구조에 기인한다.

UV-Vis는 질적 방식으로 사용될 수 있으며, 기능성 군을 식별하거나 흡광도 스펙트럼을 일치시킴으로써 화합물의 정체성을 확인할 수 있다. 또한 분석물의 농도가 맥주법을 사용하여 흡수와 관련이 있기 때문에 정량적 방식으로 사용될 수 있습니다. UV-Vis 분광법은 샘플, 물 분석 및 많은 유형의 크로마토그래피에 대한 검출기로 DNA 또는 단백질의 양을 정량화하는 데 사용됩니다. 화학 반응의 운동학은 또한 시간이 지남에 따라 반복UV-Vis 측정을 취하여 UV-Vis 분광법으로 측정됩니다. UV-Vis 측정은 일반적으로 분광계로 촬영됩니다. UV-Vis는 또한 많은 화합물을 검출할 수 있기 때문에 크로마토그래피와 같은 다른 분석 기술에 매우 인기 있는 검출기입니다.

일반적으로 UV-Vis는 가장 민감한 분광법이 아니며, 많은 빛이 짧은 경로 길이에 흡수되지 않기 때문입니다. 형광과 같은 그밖 분광법은 더 높은 감도가 있습니다, 그러나 대부분의 분자가 형광이 아니기 때문에 일반적으로 적용되지 않습니다. UV-Vis는 적외선 분광법과 같은 다른 흡광도 측정에 유사한 민감성을 가집니다.

1. 분광계 교정

  1. UV-Vis 분광기를 켜고 램프가 적절한 기간(약 20분)동안 예열하여 안정화되도록 합니다.
  2. 큐벳을 샘플용 용매로 채우고 외부가 깨끗한지 확인합니다. 이것은 빈 역할을하고 용매에 의한 산란 또는 흡수로 인한 가벼운 손실을 설명하는 데 도움이됩니다.
  3. 큐벳을 분광계에 놓습니다. 큐벳은 핸들링(홈일 수 있음)을 위한 양면을 가지고 있으며 빛을 비추기 위한 것이 ...

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UV-Vis는 유색 화합물의 스펙트럼을 얻기 위해 사용될 수있다. 도 1A에서,청색 염료의 흡광스펙트럼이 도시된다. 배경은 가시 스펙트럼의 빛의 색상을 보여줍니다. 파란색 염료는 주황색/빨간색의 λ최대 흡광도를 가지고 있습니다. 도 1B는 녹색에 λ최대가 있는 적색 염료의 스펙트럼을 나타낸다.

운동학은 시간?...

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UV-Vis는 많은 화학 적 분석에 사용됩니다. 대부분의 단백질이 280 nm에서 강하게 흡수되기 때문에 용액에서 단백질의 양을 양량화하는 데 사용됩니다. 도 3은 혈중으로 인해 280과 450에서 높은 흡광도를 가지는 사이토크롬 C의 예를 나타낸다. UV-Vis는 또한 모든 염기가 260 nm에서 강하게 흡수되기 때문에 샘플에서 DNA의 양을 정량화하는 표준 기술로 사용됩니다. RNA와 단백질은 또한 260 nm에?...

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UV Vis Spectroscopy

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