Raccolta di tessuti sterili

Fonte: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Università di Notre Dame, IN

Nel 1959 le 3 R furono introdotte da W.M.S. Russell e R.L. Burch nel loro libro The Principles of Humane Experimental Technique. Le 3 R sono la sostituzione, la riduzione e il perfezionamento dell'uso degli animali nella ricerca. ¹ L'uso di linee cellulari e colture tissutali originate da animali da ricerca è una tecnica sostitutiva, in quanto consente di condurre molti esperimenti in vitro. Il prelievo di tessuti e organi per l'uso in colture cellulari e tissutali richiede una tecnica asettica per evitare la contaminazione dei tessuti. La raccolta sterile è necessaria anche per l'analisi di proteine e RNA e la profilazione metabolica dei tessuti. Questo manoscritto discuterà il processo di prelievo di organi sterili in ratti e topi.

1. Preparazione

I materiali comunemente usati includono alcol al 70% in una bottiglia di schizzo, aghi sterili da 20-25 gauge, due confezioni di strumenti sterili di forbici per l'iride e pinza per il pollice (una per la pelle e una per i tessuti interni), asciugamani di carta, guanti da chirurgo sterili, una capsula di Petri sterile, un mezzo sterile e una soluzione salina sterile.
La ventola del cappuccio deve essere in funzione per almeno 15 minuti prima della procedura e deve essere disinfettata c

Sebbene molte delle procedure per il prelievo di organi sterili siano simili a un'autopsia standard, l'uso della tecnica sterile è imperativo affinché i tessuti siano di valore per le procedure sperimentali, che includono il prelievo di cellule dai tessuti asportati. La profilazione o la raccolta di RNA dai tessuti può essere compromessa se la sterilità non viene mantenuta.

Russel, W.M.S. and Burch, R.L. 1959. The Principles of Humane Experimental Technique. Methuen: London.
Petucci, C., Rojas-Betancourt, S., and Gardell, S.J. 2012. Comparison of tissue harvest protocols for the quantitation of acylcarnitines in mouse heart and liver by mass spectrometry. Metabolomics. 8.784-792.
Parkinson, C.M., O'Brien, A., Albers, T.M., Simon, M.A., Clifford, C.B., and Pritchett-Corning, K.R. 2011. Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice. 54. e2966. 1-7.

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