Coleta de Tecido Estéril

Fonte: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidade de Notre Dame, IN

Em 1959, os 3 R's foram introduzidos por W.M.S. Russell e R.L. Burch em seu livro The Principles of Humane Experimental Technique. Os 3 R's são substituição, redução e refinamento do uso de animais em pesquisas. ¹ O uso de linhas celulares e culturas teciduais originárias de animais de pesquisa é uma técnica de substituição, pois permite que muitos experimentos sejam realizados in vitro. A colheita de tecidos e órgãos para uso em culturas celulares e tecidos requer técnica asséptica para evitar a contaminação dos tecidos. A colheita estéril também é necessária para análise de proteínas e RNA e perfil metabólico de tecidos. Este manuscrito discutirá o processo de colheita de órgãos estéreis em ratos e camundongos.

1. Preparação

Os materiais comumente utilizados incluem 70% de álcool em uma garrafa de esguicho, agulhas estéreis de calibre 20-25, dois pacotes de instrumentos estéreis de tesoura de íris e fórceps de polegar (um para a pele e outro para os tecidos internos), toalhas de papel, luvas de cirurgião estérei, uma placa de petri estéril, meio estéril e solução salina estéril.
O ventilador do capô deve estar funcionando por pelo menos 15 minutos antes do procedimento, e deve ser desinfetado ...

Embora muitos dos procedimentos para a colheita de órgãos estéreis sejam semelhantes a uma necropsia padrão, o uso de técnica estéril é imperativo para que os tecidos sejam de valor para procedimentos experimentais, que incluem a colheita de células dos tecidos excisados. O perfil ou a coleta de RNA de tecidos podem ser comprometidos se a esterilidade não for mantida.

Russel, W.M.S. and Burch, R.L. 1959. The Principles of Humane Experimental Technique. Methuen: London.
Petucci, C., Rojas-Betancourt, S., and Gardell, S.J. 2012. Comparison of tissue harvest protocols for the quantitation of acylcarnitines in mouse heart and liver by mass spectrometry. Metabolomics. 8.784-792.
Parkinson, C.M., O'Brien, A., Albers, T.M., Simon, M.A., Clifford, C.B., and Pritchett-Corning, K.R. 2011. Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice. 54. e2966. 1-7.

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