Name: embryonic stem cell-derived endothelial cells for treatment of hindlimb ischemia
Uploaded: 2009-01-23T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia at JoVE.com

De auteurs danken Andrea Axtell, Satoshi Itoh, MD, Jeff Velotta, MD, Grant Hoyt, Robert C. Robbins, MD, Jin Yu, MD, Tim Doyle, PhD, en aan de Stanford Small Animal Imaging Core voor technische ondersteuning. De auteurs danken ook AM Bickford, Inc voor ondersteuning van veterinaire apparatuur. Dit onderzoek werd ondersteund door subsidies voor onderzoek van de National Institutes of Health (R01 HL-75774, R01 CA098303, R21 HL085743, 1K12 HL087746), de Californische tabak Related Disease Research Program van de University of California (15DAT-0257 en 1514RT-0169) , en het California Institute for Regeneratieve Geneeskunde (RS1-00183). NH wordt ondersteund door een beurs van de American Heart Association. kunnen Heart Association.

1. Differentiatie van muriene sociaal-economische raden in de endotheelcellen <ol><li> Het protocol voor differentiatie SER in de endotheelcellen wordt elders beschreven en is niet de focus van dit protocol 2,3. Kortom, zijn de cellen toegestaan ​​om te differentiëren, en de cellen die positief zijn voor de endotheliale merkers zoals CD31 of vasculaire endotheliale cadherine (VE-cadherine) worden vervolgens gezuiverd door fluorescentie geactiveerde cel sortering (FACS). </li></ol>...

<ol>
	<li>Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M., Cooke, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+hindlimb+ischemia.">Murine model of hindlimb ischemia.</a> JoVE. , (2008).</li><li>Levenberg, S., Golub, J. S., Amit, M., Itsakovitz-Eldor, J., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cells+derived+from+human+embryonic+stem+cells.">Endothelial cells derived from human embryonic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 4391-4396 (2002).</li><li>Yamashita, J., Itoh, H., Hirashima, M., Ogawa, M., Nishikawa, S., Yurugi, T., Naito, M., Nakao, K., Nishikawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flk1-positive+cells+derived+from+embryonic+stem+cells+serve+as+vascular+progenitors.">Flk1-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors.</a> Nature. 408, 926-926 (2000).</li><li>De, A., Yaghoubi, S. S., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+lentiviral+vectors+in+noninvasive+molecular+imaging.">Applications of lentiviral vectors in noninvasive molecular imaging.</a> Methods Mol Biol. 433, 177-202 (2008).</li><li>Niiyama, H., Kai, H., Yamamoto, T., Shimada, T., Sasaki, K., Murohara, T., Egashira, K., Imaizumi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+endogenous+monocyte+chemoattractant+protein-1+in+ischemia-induced+neovascularization.">Roles of endogenous monocyte chemoattractant protein-1 in ischemia-induced neovascularization.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 44, 661-666 (2004).</li><li>Cook, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+anatomy+of+the+laboratory+mouse.">The anatomy of the laboratory mouse.</a> , (1976).</li><li>Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescent+indicators+in+living+mammals.">Bioluminescent indicators in living mammals.</a> Nature Med. 4, 245-247 (1998).</li><li>Ray, P., De, A., Min, J. J., Tsien, R. Y., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+tri-fusion+multimodality+reporter+gene+expression+in+living+subjects.">Imaging tri-fusion multimodality reporter gene expression in living subjects.</a> Cancer Res. 64, 1323-1330 (2004).</li><li>Huang, N. F., Lee, R. J., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+and+physical+regulation+of+stem+cells+and+progenitor+cells:+potential+for+cardiovascular+tissue+engineering.">Chemical and physical regulation of stem cells and progenitor cells: potential for cardiovascular tissue engineering.</a> Tissue Eng. 13, 1809-1823 (2007).</li><li>Cao, F., Lin, S., Xie, X., Ray, P., Patel, M., Zhang, X., Drukker, M., Dylla, S. J., Connolly, A. J., Chen, X., Weissman, I. L., Gambhir, S. S., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+visualization+of+embryonic+stem+cell+survival,+proliferation,+and+migration+after+cardiac+delivery.">In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery.</a> Circulation. 113, 1005-1114 (2006).</li><li>Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+bioluminescence+reporter+gene+imaging+of+human+embryonic+stem+cells.">In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells.</a> J Vis Exp. , (2008).</li></ol>

Sociaal-economische raden zijn een veelbelovende bron cel voor de behandeling van weefsel ischemie vanwege hun plasticiteit van differentiatie en hun vermogen om aanleiding te geven tot cellijnen die alle drie kiembladen, inclusief endotheelcellen. Te overwinnen de ethische bezorgdheid in verband met sociaal-economische raden, kan geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSCs) een alternatief zijn pluripotente stamcellen bron dat de ethische bezwaren overwint. Naast de sociaal-economische raden, kunnen volwassen stamcellen, zoals endothelial...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Surgical tools</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Syringe needle</td>
<td>Tool</td>
<td>BD</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>28G insulin syringe is preferred</td>
</tr>
<tr>
<td>Phosphate Buffered Saline </td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>D-luciferin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Biosynth International, Inc</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS</td>
</tr>
<tr>
<td>IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software </td>
<td>Equipment</td>
<td>Xenogen Corporation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

embryonic stem cell-derived endothelial cells for treatment of hindlimb ischemia

Perifeer arterieel vaatlijden (PAD) het gevolg van vernauwing van de perifere slagaders die zuurstofrijk bloed en voedingsstoffen leveren aan de benen en voeten, Dit pathologie veroorzaakt symptomen zoals claudicatio intermittens (pijn bij het lopen), pijnlijke ischemische zweren, of zelfs ledematen bedreigend gangreen. Het wordt algemeen aangenomen dat de vasculaire endotheel, een monolaag van endotheelcellen die de luminale oppervlak van alle bloed-en lymfevaten investeert, een dominante rol speelt in vasculaire homeostase en vasculaire regeneratie. Als gevolg hiervan, op basis van stamcellen regeneratie van het endotheel kan een veelbelovende benadering voor de behandeling van PAD worden. In deze video, tonen we de transplantatie van embryonale stamcellen (ESC) afkomstige endotheel-cellen voor de behandeling van eenzijdige hindimb ischemie als een model van de PAD, gevolgd door de niet-invasieve volgen van cel homing en overleving van bioluminescentie imaging. De specifieke materialen en procedures voor de levering en cell imaging zal worden beschreven. Dit protocol volgt nog een publicatie in het beschrijven van de inductie van ischemie achterbeen door Niiyama et al. 1.

Watch this Scientific Journal Video about Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia at JoVE.com

Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia

De chirurgische procedure voor de levering van embryonale stamcel-afgeleide endotheelcellen van de ischemische achterbeen is aangetoond, met niet-invasieve tracking door bioluminescentie imaging.

Embryonale stamcellen afgeleide endotheelcellen voor de behandeling van ischemie achterbeen

Peripheral arterial disease (PAD) results from narrowing of the peripheral arteries that supply oxygenated blood and nutrients to the legs and feet, This ...

Research

JoVE Journal

Biology

Propagation of Human Embryonic Stem (ES) Cells

Propagation of Human Embryonic Stem ES Cells

Verspreiding van menselijke embryonale stamcellen (ES) cellen

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Afleiding van hematopoietische stamcellen van muriene embryonale stamcellen

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Afleiding van menselijke embryonale stamcellen door Immunosurgery

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Probing for Mitochondrial Complex Activity in Human Embryonic Stem Cells

Peilen naar Mitochondriale complexe activiteit in menselijke embryonale stamcellen

Mitochondria are cytoplasmic organelles that have a primary role in cellular metabolism and homeostasis, regulation of the cell signaling network, and ...

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

Chromatine immunoprecipitatie van menselijke embryonale stamcellen

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

Muizenmodel van achterbeen ischemie

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Chromosomal Spread Preparation of Human Embryonic Stem Cells for Karyotyping

Chromosomale Spread Voorbereiding van menselijke embryonale stamcellen voor Karyotypering

Although human embryonic stem cells (hESC) have been shown to present a stable diploid karyotype 1, many studies have reported that depending on culture ...

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

Isolatie en Afleiding van muis embryonale cellen Germinal

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

Differentiatie van embryonale stamcellen in de oligodendrocyt Voorlopers

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...

Efficient Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells into Motor Neurons

Efficiënte Differentiatie van muis embryonale stamcellen in de motorische neuronen

Direct differentiation of embryonic stem (ES) cells into functional  motor neurons represents a promising resource to study disease mechanisms, to  screen ...