Name: embryonic stem cell-derived endothelial cells for treatment of hindlimb ischemia
Uploaded: 2009-01-23T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia at JoVE.com

Les auteurs remercient Andrea Axtell, Satoshi Itoh, MD, Jeff Velotta, MD, Grant Hoyt, Robert C. Robbins, MD, Jin Yu, MD, Tim Doyle, PhD, et le Stanford petit noyau d&#39;imagerie animale pour l&#39;assistance technique. Les auteurs remercient également AM Bickford, Inc pour le soutien des équipements vétérinaires. Cette recherche a été financée par des subventions de recherche du National Institutes of Health (R01 HL-75 774, R01 CA098303, R21 HL085743, 1K12 HL087746), le tabac en Californie Programme connexes Disease Research de l&#39;Université de Californie (15IT-0257 et 1514RT-0169) , et le California Institute for Regenerative Medicine (RS1-00183). NH est soutenu par une bourse de l&#39;American Heart Association. peut Heart Association.

1. La différenciation des CSE de souris en cellules endothéliales <ol><li> Le protocole de différenciation en cellules endothéliales CES est décrite ailleurs et n&#39;est pas l&#39;objet de ce protocole 2,3. Brièvement, les cellules sont autorisés à se différencier, et les cellules qui sont positifs pour les marqueurs endothéliaux tels que CD31 ou vasculaire cadhérine endothéliale (VE-cadhérine) sont ensuite purifiées par tri cellulaire activé par fluorescence (FACS). </li></ol><p class="jove...

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	<li>Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M., Cooke, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+hindlimb+ischemia.">Murine model of hindlimb ischemia.</a> JoVE. , (2008).</li><li>Levenberg, S., Golub, J. S., Amit, M., Itsakovitz-Eldor, J., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cells+derived+from+human+embryonic+stem+cells.">Endothelial cells derived from human embryonic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 4391-4396 (2002).</li><li>Yamashita, J., Itoh, H., Hirashima, M., Ogawa, M., Nishikawa, S., Yurugi, T., Naito, M., Nakao, K., Nishikawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flk1-positive+cells+derived+from+embryonic+stem+cells+serve+as+vascular+progenitors.">Flk1-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors.</a> Nature. 408, 926-926 (2000).</li><li>De, A., Yaghoubi, S. S., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+lentiviral+vectors+in+noninvasive+molecular+imaging.">Applications of lentiviral vectors in noninvasive molecular imaging.</a> Methods Mol Biol. 433, 177-202 (2008).</li><li>Niiyama, H., Kai, H., Yamamoto, T., Shimada, T., Sasaki, K., Murohara, T., Egashira, K., Imaizumi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+endogenous+monocyte+chemoattractant+protein-1+in+ischemia-induced+neovascularization.">Roles of endogenous monocyte chemoattractant protein-1 in ischemia-induced neovascularization.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 44, 661-666 (2004).</li><li>Cook, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+anatomy+of+the+laboratory+mouse.">The anatomy of the laboratory mouse.</a> , (1976).</li><li>Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescent+indicators+in+living+mammals.">Bioluminescent indicators in living mammals.</a> Nature Med. 4, 245-247 (1998).</li><li>Ray, P., De, A., Min, J. J., Tsien, R. Y., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+tri-fusion+multimodality+reporter+gene+expression+in+living+subjects.">Imaging tri-fusion multimodality reporter gene expression in living subjects.</a> Cancer Res. 64, 1323-1330 (2004).</li><li>Huang, N. F., Lee, R. J., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+and+physical+regulation+of+stem+cells+and+progenitor+cells:+potential+for+cardiovascular+tissue+engineering.">Chemical and physical regulation of stem cells and progenitor cells: potential for cardiovascular tissue engineering.</a> Tissue Eng. 13, 1809-1823 (2007).</li><li>Cao, F., Lin, S., Xie, X., Ray, P., Patel, M., Zhang, X., Drukker, M., Dylla, S. J., Connolly, A. J., Chen, X., Weissman, I. L., Gambhir, S. S., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+visualization+of+embryonic+stem+cell+survival,+proliferation,+and+migration+after+cardiac+delivery.">In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery.</a> Circulation. 113, 1005-1114 (2006).</li><li>Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+bioluminescence+reporter+gene+imaging+of+human+embryonic+stem+cells.">In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells.</a> J Vis Exp. , (2008).</li></ol>

CES sont une source de cellules prometteuses pour le traitement de l&#39;ischémie tissulaire en raison de leur plasticité de différenciation et de leur capacité à donner naissance à des lignées de cellules comprenant les trois feuillets embryonnaires, dont les cellules endothéliales. Pour surmonter les problèmes éthiques associés avec les CES, cellules souches pluripotentes induites (CISP) peut être une source de cellules souches pluripotentes alternatives qui surmonte les préoccupations éthiques. Outre les CES, les cellules s...

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<td>Surgical tools</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
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<td>Syringe needle</td>
<td>Tool</td>
<td>BD</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>28G insulin syringe is preferred</td>
</tr>
<tr>
<td>Phosphate Buffered Saline </td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>D-luciferin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Biosynth International, Inc</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS</td>
</tr>
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<td>IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software </td>
<td>Equipment</td>
<td>Xenogen Corporation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
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embryonic stem cell-derived endothelial cells for treatment of hindlimb ischemia

Artérielle périphérique maladie (PAD) les résultats de rétrécissement des artères périphériques qui fournissent le sang oxygéné et de nutriments pour les jambes et les pieds, cette pathologie entraîne des symptômes tels que la claudication intermittente (douleur à la marche), des ulcérations douloureuses ischémiques, ou même menaçant le membre gangrène. On croit généralement que l&#39;endothélium vasculaire, une monocouche de cellules endothéliales qui investit la surface luminale de tous les vaisseaux sanguins et lymphatiques, joue un rôle dominant dans l&#39;homéostasie vasculaire et la régénération vasculaire. En conséquence, base de cellules souches de régénération de l&#39;endothélium peut être une approche prometteuse pour le traitement de la MAP. Dans cette vidéo, nous démontrons la transplantation de cellules souches embryonnaires (CSE) dérivées des cellules endothéliales pour le traitement de l&#39;ischémie unilatérale hindimb comme un modèle de la PAD, suivi par des non-invasive de la cellule de suivi homing et de la survie par imagerie par bioluminescence. Les matériaux et les procédures spécifiques pour la livraison et l&#39;imagerie cellulaire seront décrites. Ce protocole suit une autre publication dans la description de l&#39;induction d&#39;une ischémie des membres postérieurs par Niiyama et al. 1

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Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia

La procédure chirurgicale pour la livraison de cellules souches embryonnaires dérivées des cellules endothéliales de la patte postérieure ischémique est démontrée, avec des non-invasive de suivi par imagerie par bioluminescence.

Les cellules souches embryonnaires des cellules dérivées endothéliales pour traitement de l&#39;ischémie des membres postérieurs

Peripheral arterial disease (PAD) results from narrowing of the peripheral arteries that supply oxygenated blood and nutrients to the legs and feet, This ...

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the body suggests that they hold great promise for both ...

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Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

La différenciation des cellules souches embryonnaires en précurseurs d&#39;oligodendrocytes

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