Name: embryonic stem cell-derived endothelial cells for treatment of hindlimb ischemia
Uploaded: 2009-01-23T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia at JoVE.com

Die Autoren danken Andrea Axtell, Satoshi Itoh, MD, Jeff Velotta, MD, Grant Hoyt, Robert C. Robbins, MD, Jin Yu, MD, Tim Doyle, PhD, und die Stanford Small Animal Imaging Core für die technische Unterstützung. Die Autoren danken AM Bickford, Inc. für die Unterstützung der tierärztlichen Einrichtungen. Diese Arbeit wurde durch Forschungsstipendien der National Institutes of Health (R01 HL-75774, R01 CA098303, R21 HL085743, 1K12 HL087746), der California Tobacco Related Disease Research Program der University of California (15IT-0257 und 1514RT-0169) unterstützt und das California Institute for Regenerative Medicine (RS1-00183). NH wird durch ein Stipendium der American Heart Association unterstützt. kann Heart Association.

1. Differenzierung von murinen ES-Zellen in Endothelzellen <ol><li> Das Protokoll zur Differenzierung von ES-Zellen in Endothelzellen wird an anderer Stelle beschrieben ist nicht der Schwerpunkt dieses Protokoll 2,3. Kurz gesagt, werden die Zellen erlaubt, zu unterscheiden, und die Zellen, die positiv für die endotheliale Marker wie CD31 oder vascular endothelial cadherin (VE-Cadherin) werden dann mittels Fluoreszenz-activated cell sorting (FACS) gereinigt. </li></ol> 2. Der Bau des D...

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	<li>Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M., Cooke, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+hindlimb+ischemia.">Murine model of hindlimb ischemia.</a> JoVE. , (2008).</li><li>Levenberg, S., Golub, J. S., Amit, M., Itsakovitz-Eldor, J., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cells+derived+from+human+embryonic+stem+cells.">Endothelial cells derived from human embryonic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 4391-4396 (2002).</li><li>Yamashita, J., Itoh, H., Hirashima, M., Ogawa, M., Nishikawa, S., Yurugi, T., Naito, M., Nakao, K., Nishikawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flk1-positive+cells+derived+from+embryonic+stem+cells+serve+as+vascular+progenitors.">Flk1-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors.</a> Nature. 408, 926-926 (2000).</li><li>De, A., Yaghoubi, S. S., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+lentiviral+vectors+in+noninvasive+molecular+imaging.">Applications of lentiviral vectors in noninvasive molecular imaging.</a> Methods Mol Biol. 433, 177-202 (2008).</li><li>Niiyama, H., Kai, H., Yamamoto, T., Shimada, T., Sasaki, K., Murohara, T., Egashira, K., Imaizumi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+endogenous+monocyte+chemoattractant+protein-1+in+ischemia-induced+neovascularization.">Roles of endogenous monocyte chemoattractant protein-1 in ischemia-induced neovascularization.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 44, 661-666 (2004).</li><li>Cook, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+anatomy+of+the+laboratory+mouse.">The anatomy of the laboratory mouse.</a> , (1976).</li><li>Contag, P. R., Olomu, I. N., Stevenson, D. K., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescent+indicators+in+living+mammals.">Bioluminescent indicators in living mammals.</a> Nature Med. 4, 245-247 (1998).</li><li>Ray, P., De, A., Min, J. J., Tsien, R. Y., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+tri-fusion+multimodality+reporter+gene+expression+in+living+subjects.">Imaging tri-fusion multimodality reporter gene expression in living subjects.</a> Cancer Res. 64, 1323-1330 (2004).</li><li>Huang, N. F., Lee, R. J., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+and+physical+regulation+of+stem+cells+and+progenitor+cells:+potential+for+cardiovascular+tissue+engineering.">Chemical and physical regulation of stem cells and progenitor cells: potential for cardiovascular tissue engineering.</a> Tissue Eng. 13, 1809-1823 (2007).</li><li>Cao, F., Lin, S., Xie, X., Ray, P., Patel, M., Zhang, X., Drukker, M., Dylla, S. J., Connolly, A. J., Chen, X., Weissman, I. L., Gambhir, S. S., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+visualization+of+embryonic+stem+cell+survival,+proliferation,+and+migration+after+cardiac+delivery.">In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery.</a> Circulation. 113, 1005-1114 (2006).</li><li>Wilson, K., Yu, J., Lee, A., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+bioluminescence+reporter+gene+imaging+of+human+embryonic+stem+cells.">In vitro and in vivo bioluminescence reporter gene imaging of human embryonic stem cells.</a> J Vis Exp. , (2008).</li></ol>

ESZ sind eine vielversprechende Quelle Zelle für die Behandlung von Gewebe-Ischämie aufgrund ihrer Plastizität der Differenzierung und ihre Fähigkeit, sich zu erheben, um Zelllinien aus aller drei Keimblätter, einschließlich Endothelzellen geben. Zur Überwindung der ethischen Bedenken mit ESC verbunden sind, können induzierte pluripotente Stammzellen (IPSCs) eine Alternative pluripotente Stammzelle Quelle, die die ethischen Bedenken überwindet werden. Neben WSR können adulte Stammzellen, wie endotheliale Vorläuferzellen (EPC) und...

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<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
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<td>&nbsp;</td>
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<td>Syringe needle</td>
<td>Tool</td>
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<td>&nbsp;</td>
<td>28G insulin syringe is preferred</td>
</tr>
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<td>Phosphate Buffered Saline </td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
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<td>D-luciferin</td>
<td>Reagent</td>
<td>Biosynth International, Inc</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS</td>
</tr>
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<td>IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software </td>
<td>Equipment</td>
<td>Xenogen Corporation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
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embryonic stem cell-derived endothelial cells for treatment of hindlimb ischemia

Periphere arterielle Verschlusskrankheit (pAVK) ergibt sich aus Verengung der peripheren Arterien, die sauerstoffreiches Blut und Nährstoffen zu versorgen, um die Beine und Füße, Ursachen dieser Erkrankung Symptome wie Claudicatio intermittens (Schmerzen beim Gehen), schmerzhafte ischämische Geschwüre oder sogar Gliedmaßen-bedrohlichen Gangrän. Es wird allgemein angenommen, dass das vaskuläre Endothel, einer Monoschicht aus Endothelzellen, die der luminalen Oberfläche von Blut-und Lymphgefäße investiert, eine dominierende Rolle spielt in der vaskulären Homöostase und vaskuläre Regeneration. Als Ergebnis Stammzellen-basierten Regeneration des Endothels kann ein viel versprechender Ansatz zur Behandlung von PAD werden. In diesem Video zeigen wir die Transplantation von embryonalen Stammzellen (ESC)-abgeleiteten Endothelzellen zur Behandlung von einseitigen hindimb Ischämie als ein Modell der PAD, durch nicht-invasive Verfolgung der Zelle Homing und das Überleben von Biolumineszenz-Bildgebung verfolgt. Die spezifischen Materialien und Verfahren für die Zell-Liefer-und Imaging beschrieben. Dieses Protokoll folgt eine weitere Veröffentlichung in der Beschreibung der Induktion der hinteren Gliedmaßen Ischämie durch Niiyama et al. 1

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Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia

Das chirurgische Verfahren für die Lieferung von embryonalen Stammzellen abgeleitete Endothelzellen der ischämischen Hinterlauf gezeigt wird, mit nicht-invasive Tracking durch Biolumineszenz-Bildgebung.

Embryonale Stammzellen gewonnenen Endothelzellen zur Behandlung von Ischämie Hinterlauf

Peripheral arterial disease (PAD) results from narrowing of the peripheral arteries that supply oxygenated blood and nutrients to the legs and feet, This ...

Research

JoVE Journal

Biology

Propagation of Human Embryonic Stem (ES) Cells

Propagation of Human Embryonic Stem ES Cells

Vermehrung von humanen embryonalen Stammzellen (ES-Zellen)

Forschung

Biologie

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Ableitung von hämatopoetischen Stammzellen aus embryonalen Stammzellen der Maus

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Gewinnung menschlicher embryonaler Stammzellen durch Immunosurgery

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Probing for Mitochondrial Complex Activity in Human Embryonic Stem Cells

Probing für Mitochondriale komplexe Aktivität in humanen embryonalen Stammzellen

Mitochondria are cytoplasmic organelles that have a primary role in cellular metabolism and homeostasis, regulation of the cell signaling network, and ...

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

Chromatin Immunopräzipitation von humanen embryonalen Stammzellen

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

Mausmodell der hinteren Gliedmaßen Ischämie

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Chromosomal Spread Preparation of Human Embryonic Stem Cells for Karyotyping

Chromosomale Spread-Vorbereitung von humanen embryonalen Stammzellen für die Karyotypisierung

Although human embryonic stem cells (hESC) have been shown to present a stable diploid karyotype 1, many studies have reported that depending on culture ...

Isolation and Derivation of Mouse Embryonic Germinal Cells

Isolation und Ableitung von embryonalen Maus-Keimzellen

The ability of embryonic germinal cells (EG) to differentiate into primordial germinal cells (PGCs) and later into gametes during early developmental ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

Differenzierung von embryonalen Stammzellen in Oligodendrozyten Precursors

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...

Efficient Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells into Motor Neurons

Effiziente Differenzierung von embryonalen Stammzellen der Maus in Motoneuronen

Direct differentiation of embryonic stem (ES) cells into functional  motor neurons represents a promising resource to study disease mechanisms, to  screen ...