0:07
Overview
1:09
Principles of Near-infrared Fluorescence Imaging
3:08
Imaging Set-up
3:55
In Vivo Sample Preparation and Image Acquisition
5:55
Ex Vivo Sample Preparation and Image Acquisition
6:46
Results
8:17
Applications
9:44
Summary
Fonte: Arvin H. Soepriatna1, Kelsey A. Bullens2, e Craig J. Goergen1
1 Weldon School of Biomedical Engineering, Purdue University, West Lafayette, Indiana
2 Departamento de Bioquímica, Universidade Purdue, West Lafayette, Indiana
A imagem de fluorescência quase infravermelha (NIRF) é uma técnica óptica excitante que utiliza sondas fluorescentes para visualizar conjuntos biomoleculares complexos em tecidos. A imagem NIRF tem muitas vantagens sobre os métodos convencionais de imagem para imagens não invasivas de doenças. Ao contrário da tomografia computadorizada de emissão de fótons (SPECT) e tomografia de emissão de pósitrons (PET), a imagem NIRF é rápida, de alto rendimento e não envolve radiação ionizante. Além disso, desenvolvimentos recentes em sondas fluorescentes específicas e ativadas da engenharia fornecem ao NIRF alta especificidade e sensibilidade, tornando-se uma modalidade atraente no estudo de câncer e doenças cardiovasculares. O procedimento apresentado visa demonstrar os princípios por trás da imagem NIRF e como realizar experimentos in vivo e ex vivo em pequenos animais para estudar uma variedade de doenças. O exemplo específico mostrado aqui emprega uma sonda fluorescente ativante para a matriz metaloproteinase-2 (MMP2) para estudar sua absorção em dois modelos diferentes de roedores de aneurismas de aoórtico abdominal (AAAs).
O procedimento a seguir fornece etapas detalhadas necessárias para coletar imagens in vivo e ex vivo NIRF de pequenos animais:
1. Configuração experimental
As imagens representativas in vivo e ex vivo NIRF tiradas de roedores com aneurismas de aoórtico abdominal (AAAs) são mostradas nas Figuras 1-2. Uma sonda fluorescente ativada foi injetada sistematicamente através da veia traseira para visualizar a atividade da matriz metaloproteinase-2 (MMP2). MMP2 é uma enzima elastolítica envolvida na degradação da matriz extracelular que desempenha um papel importante na iniciação e progressão do AAA. Todas as imagens foram adquiridas utilizando um filtro ...
A imagem NIRF conta com sondas fluorescentes para quantificar e visualizar conjuntos biomoleculares em tecidos. A energia de fóton absorvida da luz infravermelha excita moléculas fluorescentes a um estado de energia mais alta, e a luz emitida com um comprimento de onda característico mais longo é capturada por um sistema de imagem de fluorescência. Aqui, foi demonstrada a aplicação de imagens NIRF para estudar atividade MMP2 em aneurismas abdominais de ao sótão in vi...
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