0:07
Overview
1:09
Principles of Near-infrared Fluorescence Imaging
3:08
Imaging Set-up
3:55
In Vivo Sample Preparation and Image Acquisition
5:55
Ex Vivo Sample Preparation and Image Acquisition
6:46
Results
8:17
Applications
9:44
Summary
Fuente: Arvin H. Soepriatna1, Kelsey A. Bullens2, y Craig J. Goergen1
1 Weldon School of Biomedical Engineering, Universidad Purdue, West Lafayette, Indiana
2 Departamento de Bioquímica, Universidad Purdue, West Lafayette, Indiana
La fluorescencia infrarroja cercana (NIRF) es una técnica óptica emocionante que utiliza sondas fluorescentes para visualizar conjuntos biomoleculares complejos en tejidos. Las imágenes NIRF tienen muchas ventajas sobre los métodos de diagnóstico por imágenes convencionales para la toma de imágenes no invasivas de enfermedades. A diferencia de la tomografía computarizada por emisión de fotones (SPECT) y la tomografía por emisión de positrones (PET), las imágenes NIRF son rápidas y de alto rendimiento y no implican radiación ionizante. Además, los recientes avances en la ingeniería de sondas fluorescentes específicas y activables proporcionan a NIRF una alta especificidad y sensibilidad, lo que la convierte en una modalidad atractiva en el estudio del cáncer y las enfermedades cardiovasculares. El procedimiento presentado está diseñado para demostrar los principios detrás de las imágenes NIRF y cómo llevar a cabo experimentos in vivo y ex vivo en animales pequeños para estudiar una variedad de enfermedades. El ejemplo específico que se muestra aquí emplea una sonda fluorescente activa para matriz metaloproteinasa-2 (MMP2) para estudiar su absorción en dos modelos diferentes de roedores de aneurismas de la aorta abdominal (AAA).
El siguiente procedimiento proporciona los pasos detallados necesarios para recopilar imágenes in vivo y ex vivo DE NIRF de animales pequeños:
1. Configuración experimental
En las figuras 1-2 se muestran imágenes representativas de NIRF in vivo y ex vivo tomadas de roedores con aneurismas de la aorta abdominal (AAA). Una sonda fluorescente activa fue inyectada sistémicamente a través de la vena de cola para visualizar la actividad de la matriz metaloproteinasa-2 (MMP2). MMP2 es una enzima elastolítica implicada en la degradación de la matriz extracelular que desempeña un papel importante en la iniciación y progresión de La AAA. Todas las imágenes se adquirieron ut...
Las imágenes NIRF se basan en sondas fluorescentes para cuantificar y visualizar conjuntos biomoleculares en tejidos. La energía de fotones absorbida de la luz infrarroja cercana excita las moléculas fluorescentes a un estado de energía más alto, y la luz emitida con una longitud de onda característica más larga es capturada por un sistema de imágenes de fluorescencia. Aquí, la aplicación de imágenes NIRF para estudiar la actividad De MMP2 en aneurismas de la aorta abdominal se...
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