成長曲線:コロニー形成単位と光学密度測定を用いて成長曲線を生成する

ソース: アンドリュー J. ヴァンアルスト¹, リアノン M. ルヴェーク¹, ナタリアマーティン¹, ビクター J. ディリタ¹
¹ミシガン州立大学微生物・分子遺伝学科、イーストランシング、ミシガン州、アメリカ合衆国

成長曲線は、細菌の成長運動学と細胞生理学に関する貴重な情報を提供します。それらは、細菌が可変増殖条件でどのように反応するかを決定し、特定の細菌に最適な増殖パラメータを定義することを可能にします。原型的な成長曲線は、成長の4つの段階を経て進行します:ラグ、指数、静止、および死(1)。

図1:細菌増殖曲線。バッチ培養で増殖した細菌は、ラグ、指数、静止、死の4つの段階を通じて進行します。ラグフェーズは、細菌が急速な細胞増殖および分裂が可能な生理学的状態に達するのにかかる時間の期間である。指数相は、DNA複製、RNA転写、タンパク質産生がすべて一定の速い速度で起こる最速の細胞増殖および分裂の段階です。静止相は、栄養制限および/または毒性中間蓄積による細菌の増殖の減速および高原化によって特徴付けられる。死期は、重度の栄養制限の結果として細胞リシスが起こる段階である。

ラグフェーズは、細菌が急速な細胞増殖および分裂が可能な生理学的状態に達するのにかかる時間の期間である。この遅れは、細菌が新しい環境に適応するのに時間がかかるために発生します。必要な細胞成分がラグフェーズで生成されると、細菌はDNA複製、RNA転写、タンパク質産生がすべて起こる成長の指数関数的段階に入ります。

1. セットアップ

必要な実験室材料:液体媒体、固化寒天媒体、エルレンマイヤーフラスコ、15 mL試験管、リン酸緩衝生理食(PBS)、細菌細胞拡散機、70%エタノール、および分光光度計。すべてのソリューションとガラス製品は、使用前に殺菌する必要があります。
70%エタノールで殺菌してワークステーションを準備します。メディアの汚染を防ぐために、ブンセンバ?...

コロニー形成単位と光学密度のプロットは、成長運動を視覚化する2つの方法です。CFU/mLとOD600の関係を決定することにより、光学密度プロットは、時間の経過に伴うCFU/mLの推定値も提供します。最短の倍増時間をもたらす条件は、与えられた細菌の増殖に最適と考えられる。

成長曲線は、細菌の成長運動学と生理学を理解するために貴重です。それらは、細菌が可変増殖条件でどのように反応するかを決定し、特定の細菌に最適な増殖パラメータを定義することを可能にします。コロニー形成ユニットと光学密度プロットの両方には、ラグ相の持続時間、到達した最大細胞密度、および細菌の倍増時間の計算を可能にする貴重な情報が含まれています。成長曲線は?...

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