Name: calcium imaging of cortical neurons using fura-2 am
Uploaded: 2009-01-19T00:00:00
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<p class="jove_title"> सेल संस्कृति </p><p class="jove_content"> कक्ष स्थापित तकनीकों का उपयोग कर उगाया जा सकता है है, लेकिन # 1 गिलास detaching या इमेजिंग प्रयोगों के दौरान बढ़ने से कोशिकाओं को रोकने के लिए एक सेलुलर (polylysine polyornithine, या laminin) की तरह चिपकने वाल...

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	<li>Grynkiewicz, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+generation+of+Ca2++indicators+with+greatly+improved+fluorescence+properties.">A new generation of Ca2+ indicators with greatly improved fluorescence properties.</a> <em style='font-style: italic'>J. Biol. Chem</em>. <b>260</b>, 3440-3450 (1985).</li><li>Lewis, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitogen-induced+oscillations+of+cytosolic+Ca2++and+transmembrane+Ca2++current+in+human+leukemic+T+cells.">Mitogen-induced oscillations of cytosolic Ca2+ and transmembrane Ca2+ current in human leukemic T cells.</a> <em style='font-style: italic'>Cell Regul</em>. <b>1</b>, 99-112 (1989).</li><li>Dolmetsch, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+between+intracellular+Ca2++stores+and+depletion-activated+Ca2++channels+generates+[Ca2+]i+oscillations+in+T+lymphocytes.">Signaling between intracellular Ca2+ stores and depletion-activated Ca2+ channels generates [Ca2+]i oscillations in T lymphocytes.</a> <em style='font-style: italic'>J Gen Physiol</em>. <b>103</b>, 365-388 (1994).</li></ol>

<p> इस प्रस्तुति में हम कैल्शियम इमेजिंग प्रदर्शन AM Fura - 2 का उपयोग करने के लिए सभी चरणों के माध्यम से चला गया है. हम एक मॉडल के रूप में cortical न्यूरॉन्स थे, लेकिन कैल्शियम इमेजिंग के लिए वास्तविक समय में कोशिकाओं की एक कि?...

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		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
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<td>New Item</td>
<td>Fura-2 AM</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>F1221</td>
<td>Protect from light</td>
</tr>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>DMSO</td>
<td>EM Science</td>
<td>MX1457-6</td>
<td>Keep in dry place to prevent hydration</td>
</tr>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>Albumin from bovine serum</td>
<td>Sigma</td>
<td>A8022-100G</td>
<td>Store at 4&#176;</td>
</tr>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>Imaging Chamber</td>
<td>Warner Instruments</td>
<td>Model RC-20H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>Microscope</td>
<td>Nikon</td>
<td>Eclipse TE2000-U</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>Potassium chloride</td>
<td>SIGMA</td>
<td>P9333-500G</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>New Item</td>
<td>Calibration Kit</td>
<td>Molecular Probes</td>
<td>F6774</td>
<td>Protect from light</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

calcium imaging of cortical neurons using fura-2 am

<p class="jove_content">कैल्शियम इमेजिंग एक आम तकनीक है कि सभ्य कोशिकाओं में कैल्शियम संकेतों को मापने के लिए उपयोगी है. कैल्शियम इमेजिंग तकनीक कैल्शियम सूचक रंजक, जो BAPTA आधारित जैविक अणुओं है कि सीए 2 + आयनों के बंधन के जवाब में उनके वर्णक्रमीय गुणों में परिवर्तन कर रहे हैं का लाभ ले लो. कैल्शियम सूचक रंगों को दो श्रेणियों, Fura-2 और भारत - 1 और Fluo-4 की तरह एकल तरंगदैर्ध्य रंगों की तरह अनुपात मीट्रिक रंगों में गिर जाते हैं. अनुपात - मीट्रिक रंजक कैल्शियम के जवाब में या तो उनकी उत्तेजना या उनके उत्सर्जन स्पेक्ट्रा बदलने के लिए, अनुमति intracellular कैल्शियम की एकाग्रता प्रतिदीप्ति अलग तरंगदैर्य पर उत्सर्जन या उत्तेजना के अनुपात से निर्धारित किया है. एकल तरंगदैर्ध्य जांच पर अनुपात - मीट्रिक रंगों का उपयोग करने का मुख्य लाभ यह है कि डाई एकाग्रता, रोशनी की तीव्रता, और अनुमति intracellular कैल्शियम की एकाग्रता इन कलाकृतियों की स्वतंत्र रूप से निर्धारित करने के लिए ऑप्टिकल पथ लंबाई के अनुपात संकेत स्वतंत्र है. सबसे आम कैल्शियम संकेतकों के एक 2-Fura है, जो बाध्यकारी कैल्शियम के जवाब में 505 एनएम उत्सर्जन शिखर और 380 एनएम के लिए 340 एनएम से अपनी उत्तेजना शिखर परिवर्तन है. यहाँ हम Fura-2 का उपयोग करने के लिए न्यूरॉन्स और अन्य उत्तेजनीय कोशिकाओं में intracellular कैल्शियम उन्नयन को मापने का वर्णन.</p>

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Calcium Imaging of Cortical Neurons using Fura-2 AM

<p class="jove_content">कैल्शियम संकेतों जीन अभिव्यक्ति, अस्तित्व, और भेदभाव सहित कई सेलुलर प्रक्रियाओं में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं. यहाँ हम प्रदर्शन कैसे कैल्शियम AM Fura - 2 का उपयोग इमेजिंग प्रदर्शन करने के लिए. कैल्शियम इमेजिंग एक मूल्यवान उपकरण के लिए वास्तविक समय और संकेत cascades की अपनी विनियमन में intracellular कैल्शियम के नियमन का अध्ययन है.</p>

AM Fura - 2 का उपयोग cortical न्यूरॉन्स की कैल्शियम इमेजिंग

Calcium imaging is a common technique that is useful for measuring calcium signals in cultured cells. Calcium imaging techniques take advantage of calcium ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparing E18 Cortical Rat Neurons for Compartmentalization in a Microfluidic Device

एक microfluidic डिवाइस में E18 Compartmentalization के लिए cortical चूहा न्यूरॉन्स की तैयारी

In this video, we demonstrate the preparation of E18 cortical rat neurons. E18 cortical rat neurons are obtained from E18 fetal rat cortex previously ...

In Vivo 2-Photon Calcium Imaging in Layer 2/3 of Mice

Vivo फीट 2 फोटॉन परत में कैल्शियम इमेजिंग / 2 चूहे के 3

To understand network dynamics of microcircuits in the neocortex, it is essential to simultaneously record the activity of a large number of neurons .  ...

Live Imaging of Dense-core Vesicles in Primary Cultured Hippocampal Neurons

प्राथमिक संवर्धित hippocampal न्यूरॉन्स में घने कोर vesicles के लाइव इमेजिंग

Observing and characterizing dynamic cellular processes can yield important information about cellular activity that cannot be gained from static images.  ...

<em>In vivo</em> Imaging of Deep Cortical Layers using a Microprism

In vivo Imaging of Deep Cortical Layers using a Microprism

दीप cortical एक Microprism का उपयोग कर <em>की</em> परतें <em>vivo</em> इमेजिंग में

We present a protocol for in vivo imaging of cortical tissue using a deep-brain imaging probe in the shape of a microprism.  Microprisms are 1-mm in size ...

Monitoring Dynamic Changes In Mitochondrial Calcium Levels During Apoptosis Using A Genetically Encoded Calcium Sensor

निगरानी Apoptosis के दौरान Mitochondrial कैल्शियम स्तर में गतिशील परिवर्तन एक आनुवंशिक एन्कोडेड कैल्शियम सेंसर का उपयोग

Dynamic changes in intracellular calcium concentration in response to various stimuli regulates many cellular processes such as proliferation, ...

Fluorescence-based Measurement of Store-operated Calcium Entry in Live Cells: from Cultured Cancer Cell to Skeletal Muscle Fiber

स्टोर संचालित जीवित कोशिकाओं में कैल्शियम प्रविष्टि प्रतिदीप्ति आधारित मापन संवर्धित सेल कैंसर से कंकाल की मांसपेशी फाइबर

Store operated Ca2+ entry (SOCE), earlier termed capacitative Ca2+ entry, is a tightly regulated mechanism for influx of extracellular Ca2+ into cells to ...

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading (TED)

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading TED

लक्षित-esterase साथ ईआर कैल्शियम की प्रत्यक्ष इमेजिंग प्रेरित डाई लोड हो रहा है (टेड)

Visualization of calcium dynamics is important to understand the role of calcium in cell physiology. To examine calcium dynamics, synthetic fluorescent ...

Measurement of Calcium Fluctuations Within the Sarcoplasmic Reticulum of Cultured Smooth Muscle Cells Using FRET-based Confocal Imaging

संवर्धित चिकनी मांसपेशियों का उपयोग कोशिकाओं की sarcoplasmic जालिका के भीतर कैल्शियम उतार चढ़ाव का मापन झल्लाहट आधारित Confocal इमेजिंग

Maintenance of steady-state calcium (Ca2+) levels in the sarcoplasmic reticulum (SR) of vascular smooth muscle cells (VSMCs) is vital to their overall ...

Concurrent EEG and Functional MRI Recording and Integration Analysis for Dynamic Cortical Activity Imaging

समवर्ती ईईजी और कार्यात्मक एमआरआई रिकॉर्डिंग और गतिशील Cortical गतिविधि इमेजिंग के लिए एकीकरण विश्लेषण

Electroencephalography (EEG) and functional magnetic resonance imaging (fMRI) are two of the fundamental noninvasive methods for identifying brain ...

Analysis of Beta-cell Function Using Single-cell Resolution Calcium Imaging in Zebrafish Islets

Zebrafish टाप में एकल-कक्ष रिज़ॉल्यूशन कैल्शियम इमेजिंग का उपयोग करके बीटा-कक्ष फ़ंक्शन का विश्लेषण

Pancreatic beta-cells respond to increasing blood glucose concentrations by secreting the hormone insulin. The dysfunction of beta-cells leads to ...