Name: homing of hematopoietic cells to the bone marrow
Uploaded: 2009-03-18T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Homing of Hematopoietic Cells to the Bone Marrow at JoVE.com

<p class="jove_content"> Este protocolo foi testado e otimizado no laboratório do Dr. David Scadden. Financiamento é fornecido pelo Dana Farber Cancer Institute / Massachusetts General Hospital de Clínicas de Hematologia e Oncologia do Programa Fellowship. </p>

<ol><li> Começamos a experiência homing, extraindo células para serem usadas no experimento. Para esta experiência atual que estamos interessados ​​em descobrir se o homing de medula óssea para os nichos nos ossos longos de animais destinatário é diferente para as células extraídas da medula óssea de animais WT, como C57BL/6J (WT) e aqueles que são transgênicos nocautes para o receptor de Lysophosphatidic 1 (LPAR1) (KO). </li><li> Antes de iniciar o experimento, iremos recolher os materiais que precisamos para este experimento. ...

<ol>
	<li>Adams, G. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+engraftment+at+the+endosteal+niche+is+specified+by+the+calcium-sensing+receptor.">Stem cell engraftment at the endosteal niche is specified by the calcium-sensing receptor.</a> <em style='font-style: italic'>Nature</em>. <b>439</b> (7076), 599-603 (2006).</li><li>Broxmeyer, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+in+hematopoiesis.">Chemokines in hematopoiesis.</a> <em style='font-style: italic'>Curr Opin Hematol</em>. <b>15</b> (1), 49-58 (2008).</li></ol>

<p class="jove_content"> Homing é o processo pelo qual células da medula óssea, incluindo as células-tronco, as células progenitoras e células diferenciadas, o seu caminho para a medula óssea depois de ser injetado na corrente sanguínea ou na cavidade da medula óssea de camundongos. Como é óbvio a partir da definição, um cientista pode optar por estudar o homing das células-tronco hematopoiéticas, células progenitoras ou células diferenciadas identificados por imunofenotipagem e isoladas por separação de células. Normalmente...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DPBS (Dulbecco&#x2019;s Phosphate Buffered Saline</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Mediatech, Inc</td>
<td>21-031-CV</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile Fetal Bovine Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Valley Biomedical, Inc</td>
<td>BS3033</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.5M EDTA (pH 8.0)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Boston BioProducts</td>
<td>BM-150</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tryphan Blue solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Mediatech, Inc</td>
<td>25-900-CI</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>ACK Lysing Buffer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Lonza</td>
<td>10-548E</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isopropranolol U.S.P.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Denison Pharmaceuticals, Inc</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vybrant DiD cell-labelling solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>V22887</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vybrant DiI cell-labelling solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>V22885</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

homing of hematopoietic cells to the bone marrow

<p class="jove_content"> Homing é o fenômeno pelo qual transplantadas células hematopoiéticas são capazes de viajar de e para enxertar ou estabelecer residência na medula óssea. Chemomkines vários e receptores estão envolvidos no homing das células-tronco hematopoiéticas. [1, 2] </p><p class="jove_content"> Este documento descreve o protocolo clássico homing utilizados em estudos de células-tronco hematopoiéticas. Em geral, isso envolve isolar a população de células cuja homing precisa ser investigada, manchando esta população com um corante de juros e injetar essas células na corrente sanguínea de um animal destinatário. O animal é então destinatário sacrificados em um tempo pré-determinado após a injeção e da medula óssea avaliados para a percentagem ou número absoluto de células que são positivos para a tintura de interesse. Em um dos esquemas mais comuns experimental, a eficiência homing das células hematopoiéticas de dois animais geneticamente distintos (um animal tipo selvagem e fora knock-correspondente) é comparada. Este artigo descreve o protocolo de células hematopoiéticas homing no quadro de como o experimento. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Homing of Hematopoietic Cells to the Bone Marrow at JoVE.com

Homing of Hematopoietic Cells to the Bone Marrow

<p class="jove_content">Este artigo descreve um protocolo usado para estudar o homing das células hematopoiéticas para seus nichos na medula óssea.</p>

Homing das células hematopoiéticas da medula óssea

Homing is the phenomenon whereby transplanted hematopoietic cells are able to travel to and engraft or establish residence in the bone marrow.  Various ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation and Analysis of Hematopoietic Stem Cells from the Placenta

Isolamento e Análise de Células-Tronco Hematopoéticas da Placenta

Hematopoietic stem cells (HSCs) have the ability to self-renew and generate all cell types of the blood lineages throughout the lifetime of an individual. ...

Biologia

Culture of myeloid dendritic cells from bone marrow precursors

Cultura de células dendríticas mielóides a partir de precursores da medula óssea

Myeloid dendritic cells (DCs) are frequently used to study the interactions between innate and adaptive immune mechanisms and the early response to ...

Generation of Bone Marrow Derived Murine Dendritic Cells for Use in 2-photon Imaging

Geração de Medula Óssea Derivado Células Dendríticas murino para uso em dois fótons de imagem

Several methods for the preparation of murine dendritic cells can be found in the literature. Here, we present a method that produces greater than 85% ...

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

Elaboração de culturas de células primárias hematopoéticas de medula óssea de camundongos para Eletroporação

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

Lentiviral-mediated Knockdown During <em>Ex Vivo</em> Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentivirus mediada Durante Knockdown<em> Ex Vivo</em> Eritropoese de Células-Tronco Hematopoéticas

Erythropoiesis is a commonly used model system to study cell differentiation. During erythropoiesis, pluripotent adult human hematopoietic stem cells ...

<em>In Vivo</em> 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

<em>In Vivo</em> Rastreamento 4-Dimensional de tronco hematopoéticas e células progenitoras em adultos mouse na calota craniana de Medula Óssea

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Osteoclast Derivation from Mouse Bone Marrow

Osteoclastos Derivação do mouse Medula Óssea

Osteoclasts are highly specialized cells that are derived from the monocyte/macrophage lineage of the bone marrow. Their unique ability to resorb both the ...

Expression of Fluorescent Fusion Proteins in Murine Bone Marrow-derived Dendritic Cells and Macrophages

Expressão de proteínas da fusão fluorescente em murino derivadas da medula óssea as células dendríticas e macrófagos

Dendritic cells and macrophages are crucial cells that form the first line of defense against pathogens. They also play important roles in the initiation ...

Isolation, Purification, and Differentiation of Osteoclast Precursors from Rat Bone Marrow

Isolamento, purificação e diferenciação de precursores de osteoclast da medula óssea de ratos

Osteoclasts are large, multinucleated, and bone-resorbing cells of the monocyte-macrophage lineage that are formed by the fusion of monocytes or ...

Proplatelet Formation Dynamics of Mouse Fresh Bone Marrow Explants

Dinâmica de formação de propulato de plantas de medula óssea fresca

The last stage of megakaryopoiesis leads to cytoplasmic extensions from mature megakaryocytes, the so-called proplatelets. Much has been learned about the ...