Name: drosophila larval nmj dissection
Uploaded: 2009-02-04T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Drosophila Larval NMJ Dissection at JoVE.com

Avant de commencer <ol><li> Toutes les cultures doivent être cultivées à 25 ° C. </li><li> HL3.1 tampon dissection peut être préparé à l&#39;avance. Prenez une aliquote de 50 ml de HL3.1 et le garder sur la glace. </li><li> Préparer 15 ml de formaldéhyde 3,5% frais dans HL3.1. Gardez-le sur la glace. </li></ol> Dissection des larves <ol><li> Mettre une goutte de HL3.1 froid sur le plateau de dissection. Cela permet de garder l&#39;animal de se dessécher et de l&#39;étourdissement ...

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	<li>Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Properties+of+the+larval+neuromuscular+junction+in+Drosophila+Melanogaster.">Properties of the larval neuromuscular junction in Drosophila Melanogaster.</a> J. Physiol. 262, 189-214 (1976).</li><li>Johansen, J., Halpern, M. E., Johansen, K. M., Keshishian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereotypic+morphology+of+glutamatergic+synapses+on+identified+muscle+cells+of+Drosophila+larvae.">Stereotypic morphology of glutamatergic synapses on identified muscle cells of Drosophila larvae.</a> J Neurosci. 9, 710-725 (1989).</li><li>Kesheshian, H., Broadie, K., Chiba, A., Bate, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+neuromuscular+junction:+a+model+system+for+studying+synaptic+development+and+function.">The Drosophila neuromuscular junction: a model system for studying synaptic development and function.</a> Annu Rev Neurosci. 19, 545-575 (1996).</li><li>Vactor, D. V., Sink, H., Fambrough, D., Tsoo, R., Goodman, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genes+that+control+neuromuscular+specificity+in+Drosophila.">Genes that control neuromuscular specificity in Drosophila.</a> Cell. , 73-1137 (1993).</li><li>Feng, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+minimal+hemolymph-like+solution,+HL3.1,+for+physiological+recordings+at+the+neuromuscular+junctions+of+normal+and+mutant+Drosophila+larvae.">A modified minimal hemolymph-like solution, HL3.1, for physiological recordings at the neuromuscular junctions of normal and mutant Drosophila larvae.</a> J Neurogenet. 18 (2), 377-402 (2004).</li></ol>

La technique de dissection démontré dans cette vidéo peut être utilisée pour préparer des larves de drosophile pour une variété de techniques expérimentales. Si les balises protéine fluorescente sont présents, les larves peuvent être montés et imagé immédiatement. Sinon, immunomarquage peuvent être effectuées afin de marquer spécifiques compartiments synaptiques. En outre, l&#39;électrophysiologie peut facilement être effectuée sur des larves disséquées afin d&#39;évaluer le fonctionneme...

HL3 Tampon Dissection: (en mm) 70 NaCl, KCl 5, 0,2 CaCl2, MgCl2 20, 10 NaHCO3, 5 tréhalose, le saccharose 115, et 5 HEPES, pH 7,3.<br /<br /&gt; Sylgard Plate Dissection: Mélanger doucement (pour éviter les bulles) 10h01 dans un bécher. Versez la préparation dans une boîte de Petri (toutes tailles). Autoriser Sylgard pour guérir la nuit dans 37C incubateur.

drosophila larval nmj dissection

L&#39;<em&gt; Drosophile</em&gt; Jonction neuromusculaire (JNM) est un système modèle établi utilisée pour l&#39;étude du développement synaptique et la plasticité. L&#39;utilisation généralisée de la<em&gt; Drosophile</em&gt; Système de moteur est due à sa grande accessibilité. Elle peut être analysée avec une seule cellule de résolution. Il ya 30 muscles par hemisegment dont l&#39;agencement intérieur la paroi du corps périphériques sont connus. Un total de 35 neurones moteurs attachent à ces muscles dans un modèle qui a la haute fidélité. En utilisant la biologie moléculaire et la génétique, on peut créer des animaux transgéniques ou mutants. Ensuite, on peut étudier les conséquences du développement sur la morphologie et la fonction du MNJ. Afin d&#39;accéder à la JNM pour l&#39;étude, il est nécessaire de bien décortiquer chaque larve. Dans cet article, nous démontrons comment bien décortiquer<em&gt; Drosophile</emLarves&gt; pour l&#39;étude du MNJ en supprimant tous les organes internes, tout en laissant intacte la paroi du corps. Cette technique est adaptée pour préparer les larves de l&#39;imagerie, l&#39;immunohistochimie ou l&#39;électrophysiologie.

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Drosophila Larval NMJ Dissection

Ce protocole démontre comment disséquer<em&gt; Drosophile</emLarves&gt; en préparation pour l&#39;immunohistochimie et / ou l&#39;imagerie de la jonction neuromusculaire.

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